| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| ·生物发光 | 第11-16页 |
| ·青海弧菌的概述 | 第11页 |
| ·发光的分子和生化基础 | 第11-13页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第13页 |
| ·发光条件优化 | 第13-14页 |
| ·发光菌在安全检测中的应用 | 第14页 |
| ·作为报告基因进行细菌量与发光强度相关性的构建 | 第14-15页 |
| ·利用lux基因表达的优缺点 | 第15页 |
| ·重组发光菌的构建研究 | 第15-16页 |
| ·转座现象 | 第16-20页 |
| ·概述 | 第16-17页 |
| ·转座机制 | 第17页 |
| ·转座应用的研究进展 | 第17-20页 |
| ·本研究目的意义 | 第20-21页 |
| 第二章 青海弧菌荧光素酶异源表达条件优化 | 第21-35页 |
| ·试验材料 | 第22-23页 |
| ·菌株与质粒 | 第22页 |
| ·酶与试剂 | 第22页 |
| ·仪器设备 | 第22-23页 |
| ·试验方法 | 第23-25页 |
| ·转化 | 第23页 |
| ·分子和蛋白水平的验证 | 第23页 |
| ·条件优化 | 第23-25页 |
| ·结果与分析 | 第25-34页 |
| ·luxAB基因的检测 | 第25-27页 |
| ·初始pH值的影响 | 第27-29页 |
| ·癸醛添加量的影响 | 第29页 |
| ·接种量的影响 | 第29-30页 |
| ·不同IPTG浓度的影响 | 第30-31页 |
| ·装液量的影响 | 第31页 |
| ·温度的影响 | 第31-32页 |
| ·IPTG添加和诱导时间对菌株发光的影响 | 第32页 |
| ·正交试验 | 第32-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 青海弧菌荧光素酶转座载体构建 | 第35-48页 |
| ·试验材料 | 第36-38页 |
| ·菌株与质粒 | 第36-37页 |
| ·酶与试剂 | 第37页 |
| ·仪器设备 | 第37-38页 |
| ·试验方法 | 第38-43页 |
| ·菌株活化 | 第38页 |
| ·菌种保藏 | 第38页 |
| ·质粒提取 | 第38-39页 |
| ·引物设计 | 第39页 |
| ·PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·电泳胶回收纯化 | 第40-41页 |
| ·E.coli Top10感受态细胞制备 | 第41页 |
| ·T载体连接 | 第41页 |
| ·感受态细胞转化及扩增培养 | 第41-42页 |
| ·T载体构建后提质粒 | 第42页 |
| ·T载体构建后酶切胶回收 | 第42页 |
| ·酶切片段连接构建重组载体 | 第42页 |
| ·感受态细胞转化及扩增培养 | 第42页 |
| ·酶切验证 | 第42页 |
| ·测序验证 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-46页 |
| ·质粒p HSG396-luxAB提取 | 第43页 |
| ·lux基因PCR扩增 | 第43-44页 |
| ·T载体构建及转化E. coli TOP10后的验证 | 第44-45页 |
| ·重组质粒构建及转化E. coli TOP10 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46-48页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第48-50页 |
| ·结论 | 第48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| ·展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录1 试验使用的菌株和质粒 | 第55-56页 |
| 附录2 缩略词 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |