| 摘要 | 第1-6页 |
| abstract | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·苦荞简介 | 第10页 |
| ·芦丁的研究进展 | 第10-12页 |
| ·芦丁的概况 | 第10页 |
| ·芦丁的药理研究进展 | 第10-12页 |
| ·降解芦丁相关酶的研究进展 | 第12-17页 |
| ·α-L鼠李糖苷酶的研究进展 | 第12-13页 |
| ·β 糖苷酶的研究进展 | 第13-15页 |
| ·β 糖苷酶的底物特异性及催化机制的研究 | 第15-16页 |
| ·β 糖苷酶的分子研究和重组表达 | 第16-17页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第17-18页 |
| ·基因多样性形成的原因 | 第18-20页 |
| ·外显子的改变 | 第18-19页 |
| ·内含子多样性及其研究进展 | 第19-20页 |
| ·可变剪接（AS） | 第20页 |
| ·展望 | 第20-21页 |
| ·研究目的意义 | 第21-22页 |
| 第二章 芦丁降解酶基因组DNA多态性分析 | 第22-28页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·工具酶与主要试剂 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-24页 |
| ·苦荞基因组DNA提取 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·RDE基因组DNA多态性克隆测序 | 第23页 |
| ·转化子的筛选与鉴定 | 第23-24页 |
| ·测序鉴定 | 第24页 |
| ·实验结果 | 第24-27页 |
| ·RDE基因组DNA克隆 | 第24-27页 |
| ·讨论与分析 | 第27-28页 |
| 第三章 一种快速纯化苦荞籽粒芦丁降解酶的方法 | 第28-34页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-31页 |
| ·不同浓度甲醇溶剂对芦丁降解酶粗酶液提取及活性的影响 | 第28-29页 |
| ·芦丁降解酶粗酶液SDS-PAGE检测 | 第29页 |
| ·Native-PAGE酶谱法检测芦丁降解酶的活性。 | 第29-30页 |
| ·紫外分光光度计法检测芦丁降解酶粗酶液活性 | 第30页 |
| ·芦丁降解酶的提取方法优化 | 第30页 |
| ·芦丁降解酶的纯化 | 第30-31页 |
| ·实验结果与分析 | 第31-33页 |
| ·SDS-PAGE检测不同浓度甲醇溶剂对芦丁降解酶粗酶液提取的影响 | 第31页 |
| ·Native PAGE酶谱检测不同浓度甲醇溶剂对芦丁降解酶粗酶液活性的影响 | 第31-32页 |
| ·紫外分光光度计法检测芦丁降解酶粗酶液活性 | 第32页 |
| ·芦丁降解酶的纯化 | 第32-33页 |
| ·讨论与分析 | 第33-34页 |
| 第四章 芦丁降解酶在毕赤酵母中的重组表达及纯化 | 第34-41页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·工具酶与主要试剂 | 第34页 |
| ·试剂配制 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·pPICZα A-rde分泌表达载体构建 | 第34-35页 |
| ·重组质粒转化 | 第35-36页 |
| ·重组转化子的表达分析 | 第36页 |
| ·目的蛋白纯化 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白糖基化分析及与天然蛋白大小比较分析 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-39页 |
| ·重组质粒的构建和鉴定 | 第37-38页 |
| ·转化子PCR鉴定 | 第38页 |
| ·重组蛋白表达及纯化分析 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白糖基化分析及与天然蛋白大小比较分析 | 第39页 |
| ·讨论与分析 | 第39-41页 |
| 第五章 芦丁降解酶的催化特性分析 | 第41-46页 |
| ·材料与试剂 | 第41页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·主要试剂配制 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| ·RDE蛋白含量测定 | 第41页 |
| ·RDE酶活测定 | 第41-42页 |
| ·实验结果 | 第42-44页 |
| ·不同反应时间对芦丁降解酶活性的影响 | 第42页 |
| ·pH对酶活性的影响 | 第42-43页 |
| ·温度对酶活性的影响 | 第43-44页 |
| ·RDE动力学参数Km和Vmax | 第44页 |
| ·讨论与分析 | 第44-46页 |
| 第六章 结论与展望 | 第46-48页 |
| ·结论 | 第46页 |
| ·展望 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-56页 |
| 附录 | 第56-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
