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木瓜脂肪酶的制备、性质及应用研究

摘要第1-8页
Abstract第8-16页
第1章 文献综述第16-30页
   ·脂肪酶概述第16-22页
     ·脂肪酶的定义第16页
     ·脂肪酶的来源第16-17页
     ·脂肪酶的特点第17页
     ·脂肪酶催化的反应类型及酶活检测方法第17-18页
     ·脂肪酶的结构与催化机制第18-20页
       ·脂肪酶的一级结构特点第18页
       ·脂肪酶二级结构的特点第18页
       ·脂肪酶三级结构的特点第18页
       ·脂肪酶的“盖子”结构第18-19页
       ·催化机制第19-20页
     ·脂肪酶的选择性第20-22页
       ·脂肪酶的底物选择性第20页
       ·脂肪酸(酰基供体)或醇的选择性第20页
       ·区域或位置选择性第20页
       ·体选择性第20页
       ·脂肪酶选择性的分子基础第20-21页
       ·影响脂肪酶选择性的因素第21-22页
   ·非水相脂肪酶催化的研究进展第22-28页
     ·非水相脂肪酶催化概述第22-23页
     ·脂肪酶在非水相中催化的影响因素第23-24页
       ·水对脂肪酶非水相催化的影响第23页
       ·有机溶剂对脂肪酶非水相催化的影响第23-24页
       ·酶的形式对脂肪酶非水相催化的影响第24页
     ·非水相体系中脂肪酶的应用第24-28页
       ·脂肪酶在食品中的应用第24-25页
       ·脂肪酶在手性拆分中的应用第25-28页
   ·本课题的意义和研究内容第28-30页
第2章 木瓜脂肪酶的分离及酶学性质第30-43页
   ·引言第30页
   ·实验材料第30-33页
     ·脂肪酶第30-31页
     ·主要试剂第31-32页
     ·主要实验仪器第32-33页
   ·实验方法第33-36页
     ·CPL的纯化及冻干粉酶制剂的制备第33页
     ·CPL水解活力的测定第33页
     ·温度对CPL水解活力的影响第33-34页
     ·CPL的热稳定性测定第34页
     ·pH对CPL酶活的影响第34页
     ·CPL水含量的测定第34页
     ·羧酸、醇碳链长度对CPL活性的影响第34-36页
   ·结果与讨论第36-41页
     ·CPL的水解活力第36页
     ·冷冻干燥过程对CPL酶活的影响第36-38页
     ·温度对CPL水解活力的影响第38页
     ·CPL的热稳定性第38-39页
     ·CPL的pH稳定性第39页
     ·有机溶剂对CPL酶活的影响第39-40页
     ·CPL催化羧酸与醇的酯化反应过程中对羧酸碳链长度的选择性第40页
     ·CPL催化羧酸与醇的酯化反应过程中对醇碳链长度的选择性第40-41页
   ·小结第41-43页
第3章 CPL催化合成萜烯醇酯第43-59页
   ·引言第43-44页
   ·实验材料与方法第44-49页
     ·脂肪酶第44-45页
     ·主要原料及试剂药品第45页
     ·主要仪器设备第45-46页
     ·检测方法的建立第46-47页
     ·饱和盐溶液控制水活度第47页
     ·CPL催化合成萜烯醇酯反应第47页
     ·中心复合实验设计(CCD)—优化反应参数第47-49页
   ·实验结果和分析讨论第49-58页
     ·不同底物、酰基供体对反应转化率的影响第49-52页
     ·不同极性有机溶剂对CPL活性的影响第52-53页
     ·溶剂初始水活度对CPL酶活的影响第53页
     ·CPL与几种商业酶效果比较第53-54页
     ·反应动力学分析第54-56页
     ·响应面优化第56-58页
   ·本章小结第58-59页
第4章 离子液体中合成香茅醇酯第59-67页
   ·引言第59页
   ·实验材料与方法第59-60页
     ·脂肪酶第59页
     ·主要原料及试剂药品第59-60页
     ·主要仪器设备第60页
     ·检测方法的建立第60页
     ·饱和盐溶液控制水活度第60页
     ·CPL催化合成萜烯醇酯反应第60页
   ·实验结果与分析第60-66页
     ·CPL在有机溶剂中的批次稳定性实验第60-61页
     ·利用离子液体作为反应介质提高酶的稳定性第61-63页
     ·利用离子液体对酶进行浸泡处理提高酶的稳定性第63-65页
     ·高熔点ILs固定化包埋CPL提高操作稳定性的研究第65-66页
   ·本章小结第66-67页
第5章 芳香仲醇的酶促拆分第67-77页
   ·前言第67-68页
   ·实验方法第68-71页
     ·主要实验材料和试剂第68页
     ·实验仪器第68-69页
     ·底物的合成及检测方法的建立第69-70页
     ·CPL酯化拆分芳香仲醇第70-71页
   ·实验结果与讨论第71-76页
     ·CPL催化拆分4-苯基-2-丁醇第71-72页
     ·反应温度对CPL拆分4-苯基-2-丁醇的影响第72-73页
     ·溶剂对CPL拆分反应的影响第73-74页
     ·酰基供体对CPL拆分反应的影响第74页
     ·底物摩尔比对CPL拆分反应的影响第74-75页
     ·CPL对其它芳香仲醇的拆分第75-76页
   ·小结第76-77页
第6章 CPL催化2-芳基丙酸类NSAIDs的酶促拆分第77-90页
   ·前言第77页
   ·实验方法第77-80页
     ·主要实验材料和试剂第77-78页
     ·实验仪器第78页
     ·底物的合成及检测方法的建立第78-79页
     ·脂肪酶CPL水解拆分洛芬酯的反应第79-80页
   ·实验结果与讨论第80-88页
     ·洛芬及其酯对映体的手性色谱柱分离第80-81页
     ·CPL对布洛芬酯的拆分第81-82页
     ·CPL对其他2-芳基丙酸手性化合物的拆分第82-83页
     ·反应温度及溶剂对拆分的影响第83-85页
     ·反应动力学分析第85页
     ·反应热力学分析第85-88页
   ·本章小结第88-90页
第7章 CPL催化拆分beta-氨基酸及其在达泊西汀生物法合成中的应用第90-120页
   ·引言第90-93页
   ·材料与方法第93-103页
     ·技术路线第93页
     ·主要实验材料和试剂第93页
     ·实验仪器第93-94页
     ·底物的合成第94-97页
       ·β-苯丙氨酸及其衍生物的合成第94页
       ·N-保护氨基酸第94-96页
       ·酯化第96-97页
       ·其他氨基酸及其衍生物的合成第97页
     ·检测方法的建立第97-103页
       ·β-苯丙氨酸的对映体含量分析第97-98页
       ·N-Ac-β-苯丙氨酸的对映体含量分析第98页
       ·N-保护-β-氨基酸酯的对映体含量分析第98-103页
   ·实验结果与讨论第103-118页
     ·底物的合成第103-104页
     ·手性柱的检测第104页
       ·ChirobioticT手性柱分离消旋β-苯丙氨酸第104页
       ·T手性柱分离N-Ac-β-苯丙氨酸第104页
       ·Chiralcel OD-H手性柱分离各种不同酯基的N-保护-β-氨基酸酯第104页
       ·Chiralcel OD-H手性柱分离各种不同N-保护的β-氨基酸酯第104页
     ·底物结构对CPL拆分效果的影响第104-106页
     ·氨基酸酯碳链长度及酯基团电荷性质对拆分效果的影响第106-107页
     ·氨基不同保护基团的影响第107-109页
     ·氨基位置对拆分效果的影响第109-110页
     ·β-苯丙氨酸苯环上不同取代基团对拆分效果的影响第110-111页
     ·CPL对脂肪族氨基酸的拆分效果第111-112页
     ·反应过程中的条件对拆分效果的影响第112-115页
       ·醇解拆分过程中亲和试剂链长度对拆分效果的影响第112-114页
       ·溶剂对CPL拆分反应的影响第114-115页
       ·温度对CPL拆分反应的影响第115页
     ·酶法-化学法合成手性药物达泊西汀第115-118页
       ·CPL催化醇解N-乙酰-β-苯丙氨酸三氟乙酯第116页
       ·(S)-N-Ac-β-苯丙氨酸甲酯的脱保护、去甲酯化第116-117页
       ·(S)-3-氨基-3-苯基丙醇的制备第117页
       ·(S)-3-二甲胺基-3-苯基丙醇的制备第117页
       ·达泊西汀的制备第117-118页
   ·小结第118-120页
第8章 总结与展望第120-123页
   ·结论第120-122页
   ·展望第122-123页
参考文献第123-134页
攻读博士学位期间发表论文第134-135页
致谢第135页

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