| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| ·豆豉纤溶酶的研究现状 | 第9-15页 |
| ·豆豉纤溶酶的菌种特性 | 第9-10页 |
| ·豆豉纤溶酶的理化性质 | 第10页 |
| ·豆豉纤溶酶的发酵工艺 | 第10-11页 |
| ·豆豉纤溶酶的分离纯化 | 第11页 |
| ·豆豉纤溶酶的酶活测定 | 第11-12页 |
| ·豆豉纤溶酶的分子生物学研究 | 第12-13页 |
| ·豆豉纤溶酶溶栓实验 | 第13-14页 |
| ·溶栓药物研究现状 | 第14-15页 |
| ·研究目的和意义 | 第15-16页 |
| ·主要研究内容 | 第16-17页 |
| 2 豆豉纤溶酶产生菌的分离及分类鉴定 | 第17-37页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·豆豉、载体与菌株 | 第17页 |
| ·工具酶和试剂 | 第17页 |
| ·仪器 | 第17-18页 |
| ·试剂配制 | 第18页 |
| ·豆豉纤溶酶产生菌的筛选 | 第18-20页 |
| ·菌种的初筛 | 第18-19页 |
| ·菌种的复筛 | 第19-20页 |
| ·菌种的保藏 | 第20页 |
| ·菌种的分类鉴定 | 第20-23页 |
| ·革兰氏染色 | 第20页 |
| ·芽孢染色 | 第20页 |
| ·在pH5.7培养基上的生长情况 | 第20-21页 |
| ·淀粉水解 | 第21页 |
| ·酪蛋白水解 | 第21页 |
| ·甲基乙酰甲醇试验(V-P试验) | 第21页 |
| ·明胶水解 | 第21页 |
| ·接触酶反应 | 第21页 |
| ·硝酸盐还原反应 | 第21-22页 |
| ·糖发酵试验 | 第22页 |
| ·柠檬酸盐或丙酸盐的利用 | 第22页 |
| ·吲哚试验 | 第22-23页 |
| ·菌种的分子生物学鉴定 | 第23-26页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第23页 |
| ·16S rRNA基因的PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第24页 |
| ·PCR纯化产物与pMD18-T Simple载体连接 | 第24页 |
| ·E.coli JM109感受态细胞的制备及连接产物的转化 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的提取 | 第25页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的核苷酸序列测定 | 第26页 |
| ·结果与分析 | 第26-35页 |
| ·豆豉纤溶酶产生菌的筛选 | 第26-30页 |
| ·菌种鉴定 | 第30-31页 |
| ·16S rRNA基因的PCR扩增结果 | 第31页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第31-32页 |
| ·16S rRNA基因的序列测定结果及分析 | 第32-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·豆豉纤溶酶产生菌的筛选 | 第35页 |
| ·豆豉纤溶酶产生菌的菌种鉴定 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 3 豆豉纤溶酶发酵条件优化 | 第37-52页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·菌株 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·仪器 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37-38页 |
| ·试验方法 | 第38页 |
| ·菌种的保存和活化 | 第38页 |
| ·种子液的制备 | 第38页 |
| ·发酵培养 | 第38页 |
| ·豆豉纤溶酶的酶活测定 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-50页 |
| ·培养基成分的优化 | 第38-44页 |
| ·发酵工艺条件对产酶的影响 | 第44-49页 |
| ·正交试验 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 4 豆豉纤溶酶纯化 | 第52-64页 |
| ·材料 | 第52-53页 |
| ·菌种 | 第52页 |
| ·培养基 | 第52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·仪器 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-57页 |
| ·培养方法 | 第53页 |
| ·粗酶液的制备 | 第53页 |
| ·纤溶酶活性检测和蛋白含量的测定 | 第53页 |
| ·纯化步骤 | 第53-56页 |
| ·凝胶电泳 | 第56页 |
| ·豆豉纤溶酶分子量 | 第56页 |
| ·豆豉纤溶酶反应最适温度和最适pH值的确定 | 第56-57页 |
| ·豆豉纤溶酶的稳定性 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-62页 |
| ·蛋白质含量的标准曲线 | 第57-58页 |
| ·离子交换层析上样缓冲体系pH值的选择 | 第58页 |
| ·离子交换层析离子强度的选择 | 第58-59页 |
| ·纤溶酶纯化结果 | 第59-61页 |
| ·豆豉纤溶酶反应的最适温度 | 第61页 |
| ·豆豉纤溶酶的最适pH值 | 第61-62页 |
| ·温度对豆豉纤溶酶稳定性的影响 | 第62页 |
| ·pH值对豆豉纤溶酶稳定性的影响 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |