摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-27页 |
1.1 原核生物的基因转录调控机制 | 第11-12页 |
1.1.1 原核生物的基因表达调控 | 第11页 |
1.1.2 原核生物的基因转录调控作用元件 | 第11-12页 |
1.1.3 原核生物的基因转录调控模型 | 第12页 |
1.2 原核生物基因转录的调控蛋白 | 第12-13页 |
1.2.1 调控蛋白的分类 | 第12页 |
1.2.2 调控蛋白的结构及功能 | 第12-13页 |
1.3 原核生物转录调控蛋白的结合位点 | 第13-16页 |
1.3.1 调控蛋白结合位点的结构 | 第13页 |
1.3.2 原核生物转录调控系统的分类 | 第13-16页 |
1.4 原核生物转录调控机制的研究方法与进展 | 第16-23页 |
1.4.1 DNA-蛋白相互作用研究方法 | 第16-19页 |
1.4.2 DNA-蛋白相互作用位点的研究方法 | 第19-22页 |
1.4.3 靶基因表达量的研究方法 | 第22-23页 |
1.5 选题背景及意义 | 第23-24页 |
1.6 研究的主要内容 | 第24-27页 |
第二章 变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸利用操纵子的鉴定 | 第27-51页 |
2.1 实验材料 | 第27-32页 |
2.1.1 菌株及质粒 | 第27-28页 |
2.1.2 主要试剂和溶液配制 | 第28-31页 |
2.1.3 培养基 | 第31页 |
2.1.4 主要仪器与设备 | 第31-32页 |
2.2 实验方法 | 第32-41页 |
2.2.1 变形假单胞菌kgu操纵子中结构基因的共转录分析 | 第32-34页 |
2.2.2 变形假单胞菌ptxS-kguE复合区域启动子区的鉴定 | 第34-40页 |
2.2.3 引物延伸实验 | 第40-41页 |
2.3 实验结果与分析 | 第41-49页 |
2.3.1 变形假单胞菌总RNA的提取和鉴定 | 第41-42页 |
2.3.2 变形假单胞菌kgu操纵子中结构基因的共转录分析 | 第42-43页 |
2.3.3 变形假单胞菌ptxS-kguE复合区域启动子区的鉴定 | 第43-48页 |
2.3.4 变形假单胞菌kgu操纵子的转录起始位点的确定 | 第48-49页 |
2.4 本章小结 | 第49-51页 |
第三章 变形假单胞菌PtxS蛋白与2-酮基葡萄糖酸利用操纵子的相互作用 | 第51-69页 |
3.1 实验材料 | 第51-54页 |
3.1.1 菌株及质粒 | 第51页 |
3.1.2 主要试剂及配制 | 第51-54页 |
3.1.3 主要仪器和设备 | 第54页 |
3.2 实验方法 | 第54-61页 |
3.2.1 变形假单胞菌PtxS蛋白的表达与纯化 | 第54-57页 |
3.2.2 变形假单胞菌PtxS蛋白与kgu操纵子启动子区的特异性结合 | 第57-60页 |
3.2.3 变形假单胞菌PtxS蛋白与kgu操纵子启动子区的结合位点分析 | 第60-61页 |
3.3 实验结果与分析 | 第61-68页 |
3.3.1 重组蛋白PtxS的表达与纯化 | 第61-63页 |
3.3.2 重组质粒pMD19-T-Pkgu的构建 | 第63-65页 |
3.3.3 变形假单胞菌PtxS蛋白与kgu操纵子启动子区的特异性结合 | 第65-66页 |
3.3.4 变形假单胞菌PtxS蛋白与kgu操纵子启动子区的结合位点 | 第66-68页 |
3.3.5 变形假单胞菌kgu操纵子启动子区的结构 | 第68页 |
3.4 本章小结 | 第68-69页 |
第四章 变形假单胞菌PtxS蛋白对2-酮基葡萄糖酸利用操纵子转录的调控 | 第69-77页 |
4.1 实验材料 | 第69页 |
4.1.1 菌株及质粒 | 第69页 |
4.1.2 主要试剂 | 第69页 |
4.1.3 主要仪器设备 | 第69页 |
4.2 实验方法 | 第69-72页 |
4.2.1 基于实时荧光定量PCR技术验证PtxS蛋白对kgu操纵子转录的调控 | 第69-71页 |
4.2.2 基于lacZ报告基因融合实验验证PtxS蛋白对kgu操纵子转录的调控 | 第71-72页 |
4.3 实验结果与分析 | 第72-75页 |
4.3.1 实时荧光定量PCR分析结果 | 第72-74页 |
4.3.2 lacZ报告基因融合实验结果 | 第74-75页 |
4.4 实验小结 | 第75-77页 |
第五章 结论与展望 | 第77-81页 |
5.1 全文主要结论 | 第77-79页 |
5.2 存在问题及展望 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-91页 |
致谢 | 第91-93页 |
在攻读硕士期间发表的论文 | 第93页 |