| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第9-17页 |
| 1.1 乙偶姻的性质及其应用 | 第9-10页 |
| 1.2 乙偶姻的生产方法 | 第10-11页 |
| 1.3 乙偶姻的发酵工艺 | 第11-14页 |
| 1.3.1 碳源 | 第11-12页 |
| 1.3.2 氮源 | 第12页 |
| 1.3.3 无机离子 | 第12-13页 |
| 1.3.4 温度 | 第13页 |
| 1.3.5 氧 | 第13页 |
| 1.3.6 pH | 第13-14页 |
| 1.4 细菌乙偶姻的代谢途径及2,3-丁二醇脱氢酶 | 第14-16页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-27页 |
| 2.1 样品 | 第17页 |
| 2.2 主要仪器 | 第17页 |
| 2.3 培养基 | 第17页 |
| 2.4 培养条件 | 第17-18页 |
| 2.5 菌株筛选 | 第18页 |
| 2.6 菌株生理生化鉴定 | 第18页 |
| 2.7 16S RDNA序列分析方法 | 第18-19页 |
| 2.7.1 基因组DNA的抽提 | 第18页 |
| 2.7.2 16S rDNA扩增 | 第18-19页 |
| 2.7.3 16S rDNA基因扩增产物的纯化 | 第19页 |
| 2.7.4 16S rDNA基因测序 | 第19页 |
| 2.7.5 系统发育分析 | 第19页 |
| 2.8 菌株耐高渗能力测定 | 第19-20页 |
| 2.9 生物量的检测 | 第20页 |
| 2.10 乙偶姻及其它代谢产物的测定 | 第20页 |
| 2.11 培养基成分优化 | 第20-21页 |
| 2.11.1 不同碳源对乙偶姻发酵的影响 | 第20页 |
| 2.11.2 不同葡萄糖浓度的对乙偶姻发酵的影响 | 第20页 |
| 2.11.3 不同氮源浓度对乙偶姻发酵的影响 | 第20-21页 |
| 2.11.4 不同无机盐浓度对乙偶姻发酵的影响 | 第21页 |
| 2.11.5 正交实验优化 | 第21页 |
| 2.12 培养条件优化 | 第21-22页 |
| 2.12.1 不同接种量对乙偶姻发酵的影响 | 第21页 |
| 2.12.2 不同种龄对乙偶姻发酵的影响 | 第21页 |
| 2.12.3 不同装液量对乙偶姻发酵的影响 | 第21页 |
| 2.12.4 不同培养温度对乙偶姻发酵的影响 | 第21页 |
| 2.12.5 不同初始pH对乙偶姻发酵的影响 | 第21-22页 |
| 2.13 地衣芽胞杆菌MEL-09发酵过程曲线 | 第22页 |
| 2.14 数据分析 | 第22页 |
| 2.15 地衣芽胞杆菌BDH候选基因筛选 | 第22页 |
| 2.16 同源缺失载体构建及电转地衣芽胞杆菌MEL-09 | 第22-27页 |
| 2.16.1 菌株和质粒 | 第22页 |
| 2.16.2 PCR引物 | 第22-23页 |
| 2.16.3 培养基和培养条件 | 第23页 |
| 2.16.4 工具酶 | 第23页 |
| 2.16.5 各种抽提液 | 第23-24页 |
| 2.16.6 DNA的体外重组 | 第24页 |
| 2.16.7 大肠杆菌感受态制备及转化 | 第24页 |
| 2.16.8 大肠杆菌转化子质粒快检 | 第24-25页 |
| 2.16.9 大肠杆菌质粒的小量抽提 | 第25页 |
| 2.16.10 同源缺失载体构建 | 第25页 |
| 2.16.11 地衣芽胞杆菌电转化 | 第25-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-51页 |
| 3.1 菌株的筛选和鉴定 | 第27-32页 |
| 3.1.1 菌株的筛选 | 第27-28页 |
| 3.1.2 菌株MEL-09的生理生化鉴定 | 第28-29页 |
| 3.1.3 菌株MEL-09的系统发育分析 | 第29-30页 |
| 3.1.4 菌株耐高渗能力测定 | 第30-32页 |
| 3.2 摇瓶发酵工艺优化 | 第32-46页 |
| 3.2.1 摇瓶发酵培养基成份优化结果 | 第32-40页 |
| 3.2.2 摇瓶发酵条件优化结果 | 第40-45页 |
| 3.2.3 摇瓶发酵过程曲线 | 第45-46页 |
| 3.3 地衣芽胞杆菌MEL-09 BDH初探 | 第46-50页 |
| 3.3.1 地衣芽胞杆菌MEL-09 BDH候选蛋白及基因 | 第47-48页 |
| 3.3.2 同源缺失载体构建 | 第48-49页 |
| 3.3.3 地衣芽胞杆菌MEL-09的电转化 | 第49-50页 |
| 3.4 结论 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 在读期间发表论文 | 第58-59页 |
| 附录 | 第59页 |
