德氏根酶产延胡索酸的发酵过程优化与羧化途径强化
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| ·研究背景 | 第8-13页 |
| ·延胡索酸的理化性质 | 第8-9页 |
| ·延胡索酸的合成方式 | 第9页 |
| ·德氏根霉胞内的物质代谢方式 | 第9-11页 |
| ·代谢流调控对延胡索酸积累的影响 | 第11-12页 |
| ·德氏根霉基因操作技术 | 第12页 |
| ·延胡索酸跨膜运输方式 | 第12-13页 |
| ·立项依据 | 第13-14页 |
| ·国内外的研究现状 | 第13页 |
| ·本课题的研究意义 | 第13-14页 |
| ·研究内容 | 第14-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-20页 |
| ·菌种 | 第16页 |
| ·德氏根霉产酸培养方法 | 第16页 |
| ·德氏根霉菌落形态控制 | 第16页 |
| ·代谢工程改造德氏根霉孢子 | 第16-18页 |
| ·表达载体构建 | 第16-17页 |
| ·表达载体转化德氏根霉孢子 | 第17-18页 |
| ·分析方法 | 第18-19页 |
| ·HPLC 分析 | 第18页 |
| ·延胡索酸浓度分析 | 第18页 |
| ·细胞干重 | 第18页 |
| ·菌落形态 | 第18-19页 |
| ·目的寡核苷酸序列分析 | 第19页 |
| ·目的蛋白分析 | 第19页 |
| ·酶活分析 | 第19页 |
| ·统计分析 | 第19-20页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第20-43页 |
| ·培养基优化对德氏根霉产酸的影响 | 第20-26页 |
| ·氮源优化对德氏根霉产酸的影响 | 第20-22页 |
| ·碳源优化对德氏根霉产酸的影响 | 第22-23页 |
| ·中和剂优化对德氏根霉产酸的影响 | 第23-24页 |
| ·添加剂优化对德氏根霉产酸的影响 | 第24-25页 |
| ·讨论 | 第25-26页 |
| ·德氏根霉菌体形态对产酸的影响 | 第26-35页 |
| ·培养基组分对德氏根霉形态的影响 | 第26-28页 |
| ·温度对德氏根霉颗粒大小的影响 | 第28页 |
| ·德氏根霉形态对延胡索酸积累量的影响 | 第28-29页 |
| ·德氏根霉颗粒大小对延胡索酸积累量的影响 | 第29页 |
| ·德氏根霉形态在发酵罐水平对延胡索酸积累量的影响 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-35页 |
| ·丙酮酸羧化酶基因过量表达对德氏根霉产酸影响 | 第35-41页 |
| ·外源表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·外源表达载体转化德氏根霉孢子 | 第36-37页 |
| ·德氏根霉转化子生长特性 | 第37-38页 |
| ·德氏根霉转化子胞内丙酮酸羧化酶酶活测定 | 第38-39页 |
| ·延胡索酸高产转化子筛选 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·结论 | 第41-42页 |
| ·展望 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-46页 |
| 参考文献 | 第46-55页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55页 |
