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低聚异麦芽糖优良菌株的理性选育及高效转化工艺的研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 前言第12-22页
    1.1 引言第12页
    1.2 人体肠道微生态简介第12-14页
        1.2.1 双歧杆菌对于人体健康意义的研究简介第12-13页
        1.2.2 双歧杆菌的独特生理功能第13-14页
        1.2.3 提高肠道内双歧杆菌数量的方法第14页
    1.3 功能性低聚糖种类第14-15页
    1.4 低聚异麦芽糖第15-17页
        1.4.1 低聚异麦芽糖定义第15-16页
        1.4.2 目前市面主要的低聚异麦芽糖产品规格第16页
        1.4.3 低聚异麦芽糖的独特功能第16-17页
    1.5 低聚异麦芽糖传统的生产第17页
    1.6 传统工艺生产低聚异麦芽糖存在的不足第17-18页
    1.7 微生物发酵法生产低聚异麦芽糖研究进展第18-21页
        1.7.1 α-葡萄糖苷酶简介第18页
        1.7.2 国内关于α-葡萄糖苷酶高产菌株的育种研究进展第18-19页
        1.7.3 微生物发酵法转化生产低聚异麦芽糖的优势分析第19页
        1.7.4 微生物发酵法转化生产低聚异麦芽糖领域存在的问题第19-21页
    1.8 课题意义、研究基础和主要内容第21-22页
第二章 优良菌株的理性选育第22-42页
    2.1 材料和方法第22-26页
        2.1.1 出发菌株、相关试剂和主要设备第22-23页
        2.1.2 平板培养基、发酵培养基及其酶活检测试剂第23-24页
        2.1.3 出发菌株Aspergillus niger K7α-葡萄糖苷酶与糖化酶的分布研究第24-25页
        2.1.4 ~γCo-60辐照Aspergillus niger K7获得突变株库第25-26页
    2.2 低糖化酶、高α-葡萄糖苷酶的优良菌株的筛选第26-29页
        2.2.1 葡萄糖反馈阻遏产酶效应第26页
        2.2.2 人为解除葡萄糖反馈阻遏产酶效应对于K7产α-葡萄糖苷酶影响第26页
        2.2.3 葡萄糖氧化酶的添加量的选择第26-27页
        2.2.4 α-葡萄糖苷酶对于麦芽糖的相对专一特性第27页
        2.2.5 筛选解除了葡萄糖阻遏产酶效应的菌株的模型设计第27-28页
        2.2.6 糖化酶活力表征平板第28页
        2.2.7 菌体所含糖化酶活力测定第28页
        2.2.8 α-葡萄糖苷酶转苷活力测定第28-29页
        2.2.9 正突变株与出发菌株K7一步发酵法生产低聚异麦芽糖比较第29页
    2.3 结果与讨论第29-40页
        2.3.1 DNS溶液葡萄糖标准曲线第29-30页
        2.3.2 出发菌株性能考察第30页
        2.3.3 葡萄糖氧化酶的添加量对于菌体生长和发酵液中葡萄糖含量的影响第30-31页
        2.3.4 葡萄糖氧化酶解除葡萄糖反馈阻遏产酶效应对于K7产α-葡萄糖苷酶实验结果第31页
        2.3.5 糖化酶活力标记可行性检验第31-33页
        2.3.6 ~γCo-60辐照诱变K7出发菌株致死曲线绘制第33-34页
        2.3.7 α-葡萄糖苷酶高产、糖化酶低活力菌株的筛选第34-36页
        2.3.8 出发菌株K7与突变株F86在糖化酶低活力筛选平板点样所得单菌落观察比较第36-37页
        2.3.9 突变株F86的生长曲线和产α-葡萄糖苷酶曲线第37-38页
        2.3.10 F86关于葡萄糖产α-葡萄糖苷酶阻遏效应解除与否的检测第38-39页
        2.3.11 出发菌株K7与F86一步发酵法产低聚异麦芽糖产糖曲线比较第39-40页
    2.4 小结第40-42页
第三章 突变株F86产α-葡萄糖苷酶发酵条件摇瓶优化及其50 L、500 L放大实验第42-60页
    3.1 材料与方法第42-43页
        3.1.1 材料、培养基与试剂第42-43页
    3.2 发酵培养基优化第43-44页
        3.2.1 氮源单因素实验第43页
        3.2.2 碳源单因素实验第43-44页
        3.2.3 无机盐离子单因素实验第44页
    3.3 发酵条件单因素实验第44-45页
        3.3.1 接种量对于F86发酵产α-葡萄糖苷酶的影响第44页
        3.3.2 发酵初始温度对于F86发酵产α-葡萄糖苷酶的影响第44页
        3.3.3 初始pH对于F86发酵产α-葡萄糖苷酶的影响第44页
        3.3.4 装液量对于F86发酵产α-葡萄糖苷酶的影响第44-45页
        3.3.5 摇床转速对于F86发酵产α-葡萄糖苷酶的影响第45页
        3.3.6 玉米浆干粉添加量、玉米淀粉添加量、发酵温度三因素正交优化第45页
    3.4 黑曲霉F86罐体发酵产α-葡萄糖苷酶研究第45-46页
        3.4.1 黑曲霉F86在5L发酵罐发酵产酶研究第46页
        3.4.2 黑曲霉F86在50L、500 L发酵罐发酵产酶研究第46页
    3.5 结果与讨论第46-58页
        3.5.1 DNS标准曲线第46-47页
        3.5.2 氮源种类及其添加量对于F86发酵产α-葡萄糖苷酶的影响第47-48页
        3.5.3 碳源选择及其添加量对于F86发酵产α-葡萄糖苷酶的影响第48-49页
        3.5.4 无机盐种类及添加量对于F86发酵产α-葡萄糖苷酶的影响第49-50页
        3.5.5 接种量对于F86发酵产α-葡萄糖苷酶的影响第50-51页
        3.5.6 温度对于F86发酵产α-葡萄糖苷酶的影响第51页
        3.5.7 初始pH对于F86产α-葡萄糖苷酶的影响第51-53页
        3.5.8 装液量对于F86产α-葡萄糖苷酶的影响第53页
        3.5.9 摇床转速对于F86产α-葡萄糖苷酶的影响第53-55页
        3.5.10 玉米将干粉添加量、玉米淀粉添加量、发酵温度三因素正交优化试验结果第55-56页
        3.5.11 突变株F86在5L罐体发酵实验结果第56-57页
        3.5.12 F86在50L、500 L微生物发酵罐中发酵产α-葡萄糖苷酶的实验结果第57-58页
    3.6 小结第58-60页
第四章 F86菌丝体重复利用转化木薯淀粉糖化液生成IMO的研究第60-74页
    4.1 材料第60-61页
        4.1.1 菌株第60页
        4.1.2 试剂第60页
        4.1.3 仪器设备第60页
        4.1.4 培养基第60-61页
    4.2 方法第61-62页
        4.2.1 DNS溶液还原糖标准曲线制作第61页
        4.2.2 转化条件对于生成低聚异麦芽糖第61页
        4.2.3 木薯淀粉前处理对于转化生成低聚异麦芽糖的影响第61-62页
        4.2.4 液化时间和糖化时间对于转化转化生成低聚异麦芽糖的影响第62页
        4.2.5 除杂对于菌丝体重复利用和转化效果的影响第62页
        4.2.6 F86菌丝体重复利用转化木薯淀粉糖化液实验第62页
    4.3 实验结果记录与分析第62-72页
        4.3.1 DNS-葡萄糖标准曲线第62页
        4.3.2 温度对于转化生成低聚异麦芽糖的影响实验结果第62-63页
        4.3.3 最佳转化温度的确定第63-64页
        4.3.4 pH对于转化转化生成低聚异麦芽糖的影响第64页
        4.3.5 底物浓度对于转化生成低聚异麦芽糖的影响第64-65页
        4.3.6 液化时间和糖化时间实验第65-66页
        4.3.7 除杂对于菌丝体重复利用和转化效果的影响第66-67页
        4.3.8 F86菌丝体转化木薯淀粉糖化液生成低聚异麦芽糖第67-72页
    4.4 小结第72-74页
第五章 总结与展望第74-76页
    5.1 总结第74-75页
    5.2 展望第75-76页
参考文献第76-84页
致谢第84-85页
攻读硕士学位期间发表论文情况第85页

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