摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第一章 绪论 | 第12-23页 |
1.1 γ-聚谷氨酸 | 第12-17页 |
1.1.1 γ-PGA的结构和性质 | 第12-13页 |
1.1.2 γ-PGA的产生 | 第13-15页 |
1.1.3 培养基组成和发酵条件对γ-PGA生成的影响 | 第15-16页 |
1.1.4 γ-PGA的提取和纯化 | 第16页 |
1.1.5 γ-PGA的降解 | 第16-17页 |
1.2 微生物产生γ-PGA可能的合成机制 | 第17-19页 |
1.2.1 微生物合成γ-PGA的可能途径 | 第17页 |
1.2.2 γ-PGA生物合成相关的基因 | 第17-18页 |
1.2.3 PgsBCA合成酶的性质 | 第18-19页 |
1.3 γ-PGA的功能和应用 | 第19-21页 |
1.3.1 在食品领域的应用 | 第19-20页 |
1.3.2 在化妆品方面的应用 | 第20页 |
1.3.3 医药领域的应用 | 第20页 |
1.3.4 农业领域的应用 | 第20-21页 |
1.3.5 污水处理方面 | 第21页 |
1.4 本课题的立题依据和意义 | 第21-22页 |
1.5 本课题的主要研究思路与内容 | 第22-23页 |
第二章 γ-PGA合成菌的筛选和鉴定 | 第23-34页 |
2.1 前言 | 第23页 |
2.2 材料与方法 | 第23-27页 |
2.2.1 主要试剂 | 第23页 |
2.2.2 主要仪器 | 第23页 |
2.2.3 菌种筛选 | 第23-24页 |
2.2.4.菌株发酵和产物分离纯化 | 第24-26页 |
2.2.5 γ-PGA产物的测定和鉴定 | 第26-27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-32页 |
2.3.1 菌株的筛选和鉴定 | 第27-30页 |
2.3.2 发酵产物的鉴定 | 第30-32页 |
2.4 本章小结 | 第32-34页 |
第三章B. methylotrophicus SK19.001 合成生产γ-PGA | 第34-49页 |
3.1 前言 | 第34页 |
3.2 材料与方法 | 第34-37页 |
3.2.1 主要材料 | 第34页 |
3.2.2 主要仪器 | 第34页 |
3.2.3 培养基 | 第34页 |
3.2.4 碳源对γ-PGA产量的影响 | 第34-35页 |
3.2.5 不同碳源浓度对SK19.001 产γ-PGA的影响 | 第35页 |
3.2.6 氮源对SK19.001 产γ-PGA的影响 | 第35页 |
3.2.7 不同氮源浓度对SK19.001 产γ-PGA的影响 | 第35页 |
3.2.8 培养条件对SK19.001 产γ-PGA的影响 | 第35页 |
3.2.9 柠檬酸对SK19.001 产γ-PGA的影响 | 第35页 |
3.2.10 金属离子对SK19.001 产γ-PGA的影响 | 第35-36页 |
3.2.11 10 L发酵罐生产γ-PGA | 第36页 |
3.2.12 分析方法 | 第36-37页 |
3.3 结果与讨论 | 第37-47页 |
3.3.1 碳源对B. methylotrophicus SK19.001 产γ-PGA的影响 | 第37-39页 |
3.3.2 不同浓度的甘油对B. methylotrophicus SK19.001 产γ-PGA的影响 | 第39页 |
3.3.3 氮源对B. methylotrophicus SK19.001 产γ-PGA的影响 | 第39-41页 |
3.3.4 蛋白胨浓度对B. methylotrophicus SK19.001 产γ-PGA的影响 | 第41页 |
3.3.5 发酵条件对B. methylotrophicus SK19.001 产γ-PGA的影响 | 第41-42页 |
3.3.6 柠檬酸对B. methylotrophicus SK19.001 产γ-PGA的影响 | 第42-43页 |
3.3.7 金属离子对B. methylotrophicus SK19.001 产γ-PGA的影响 | 第43-44页 |
3.3.8 生长过程曲线 | 第44-47页 |
3.4 本章小结 | 第47-49页 |
第四章 γ-PGA合成途径及立体构型调控机理 | 第49-63页 |
4.1 前言 | 第49-50页 |
4.2 材料与方法 | 第50-54页 |
4.2.1 菌株 | 第50页 |
4.2.2 培养基与试剂 | 第50页 |
4.2.3 实验仪器与设备 | 第50页 |
4.2.4 TCA循环中间体和不同氨基酸对γ-PGA发酵的影响 | 第50页 |
4.2.5 中间体物质对碳源的调控作用 | 第50-51页 |
4.2.6 内源谷氨酸合成相关酶的测定 | 第51-52页 |
4.2.7 SK19.001 中内源谷氨酸构型转变的研究 | 第52-53页 |
4.2.8 反相高效液相色谱法测定D-谷氨酸的含量 | 第53-54页 |
4.3 结果与讨论 | 第54-62页 |
4.3.1 TCA循环中间体和不同氨基酸对γ-PGA发酵的影响 | 第54-56页 |
4.3.2 中间体物质对碳源的调控作用 | 第56页 |
4.3.3 中间体物质对α-酮戊二酸支路关键酶活性的影响 | 第56-57页 |
4.3.4 内源谷氨酸合成途径的研究 | 第57-59页 |
4.3.5 D-谷氨酸合成途径的研究 | 第59-61页 |
4.3.6 B. methylotrophicus SK19.001 产γ-PGA合成机制的推断 | 第61-62页 |
4.4 本章小结 | 第62-63页 |
第五章 γ-PGA合成酶基因的克隆表达 | 第63-79页 |
5.1 前言 | 第63页 |
5.2 材料与方法 | 第63-70页 |
5.2.1 菌株和质粒 | 第63页 |
5.2.2 工具酶和分子量Marker | 第63-64页 |
5.2.3 培养基和试剂 | 第64页 |
5.2.4 实验仪器和设备 | 第64页 |
5.2.5 引物设计 | 第64-65页 |
5.2.6 B.methylotrophicus SK19.001 pgsBCA基因的克隆 | 第65页 |
5.2.7 pET28pgs重组质粒的构建 | 第65-67页 |
5.2.8 pET28pgs重组质粒的转化和验证 | 第67-69页 |
5.2.9 工程菌株发酵和产物鉴定 | 第69-70页 |
5.3 结果与讨论 | 第70-78页 |
5.3.1 B. methylotrophicus SK19.001 pgsBCA基因的克隆 | 第70-71页 |
5.3.2 pET28pgs载体的构建与转化 | 第71-73页 |
5.3.3 含pgsBCA基因的E.coli重组菌的发酵 | 第73-75页 |
5.3.4 B.methylotrophicus SK19.001 pgsBCA合成酶基因和编码蛋白序列分析 | 第75-78页 |
5.4 本章小结 | 第78-79页 |
第六章 γ-聚谷氨酸对冷冻面团抗冻性的研究 | 第79-96页 |
6.1 前言 | 第79页 |
6.2 材料与方法 | 第79-83页 |
6.2.1 γ-PGA | 第79-80页 |
6.2.2 主要材料与试剂 | 第80页 |
6.2.3 主要仪器与设备 | 第80页 |
6.2.4 面粉水分含量及各成分的测定 | 第80页 |
6.2.5 面包酵母发酵力的测定 | 第80-81页 |
6.2.6 面团的制备 | 第81页 |
6.2.7 不同因素对冷冻面团发酵力的影响 | 第81-82页 |
6.2.8 γ-PGA对酵母细胞的保护性研究 | 第82页 |
6.2.9 差示扫描量热法(DSC)测定冷冻面团未冻结水分含量 | 第82-83页 |
6.2.10 扫描电子显微镜(SEM)观测冷冻面团的微观结构 | 第83页 |
6.3 结果与讨论 | 第83-94页 |
6.3.1 面粉的基本成分表 | 第83页 |
6.3.2 不同因素对冷冻面团发酵力的影响 | 第83-86页 |
6.3.3 γ-PGA对酵母细胞的保护性 | 第86-87页 |
6.3.4 差示扫描量热法(DSC)测定冷冻面团未冻结水分含量 | 第87-89页 |
6.3.5 冷冻面团的微观结构分析 | 第89-94页 |
6.4 本章小结 | 第94-96页 |
主要结论与展望 | 第96-98页 |
主要结论 | 第96-97页 |
展望 | 第97-98页 |
论文创新点 | 第98-100页 |
致谢 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-112页 |
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第112页 |