摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第14-32页 |
1.1 MLF研究的历史 | 第14-15页 |
1.2 MLF对葡萄酒质量的影响 | 第15-17页 |
1.2.1 对葡萄酒质量的促进作用 | 第15页 |
1.2.2 可能对葡萄酒产生的危害 | 第15-17页 |
1.3 葡萄酒酿造过程中的乳酸菌 | 第17页 |
1.4 MLB生长的影响因素 | 第17-20页 |
1.4.1 葡萄酒p H对MLB生长的影响 | 第17-18页 |
1.4.2 葡萄酒中酒精含量对MLB生长的影响 | 第18页 |
1.4.3 葡萄酒中二氧化硫含量对MLB生长的影响 | 第18-19页 |
1.4.4 温度对葡萄酒中MLB生长的影响 | 第19页 |
1.4.5 葡萄酒中酵母对MLB生长的影响 | 第19-20页 |
1.5 其它乳酸菌MLF发酵剂的研究进展 | 第20-22页 |
1.6 葡萄酒中细菌的分类鉴定 | 第22-29页 |
1.6.1 葡萄酒中细菌种的鉴定 | 第23页 |
1.6.2 葡萄酒中细菌菌株水平的鉴定方法 | 第23-26页 |
1.6.3 葡萄酒微生态中细菌的鉴定 | 第26-29页 |
1.7 研究的目的、意义及研究的主要内容 | 第29-31页 |
1.7.1 研究的主要目的和意义 | 第29-31页 |
1.7.2 研究的主要内容 | 第31页 |
1.8 研究的技术路线 | 第31-32页 |
第二章 O. oeni AFLP分析方法的建立及中国葡萄酒产区O. oeni种质资源遗传多样性分析 | 第32-48页 |
2.1 前言 | 第32-33页 |
2.2 材料、试剂、仪器设备 | 第33-34页 |
2.2.1 供试菌株 | 第33页 |
2.2.2 培养基 | 第33-34页 |
2.2.3 试剂 | 第34页 |
2.2.4 仪器设备 | 第34页 |
2.3 试验方法 | 第34-38页 |
2.3.1 O. oeni的培养 | 第34页 |
2.3.2 O. oeni DNA的提取 | 第34-35页 |
2.3.3 双酶切反应体系的建立 | 第35页 |
2.3.4 酶切连接产物的预扩增 | 第35-36页 |
2.3.5 选择性扩增 | 第36页 |
2.3.6 PCR选择性扩增引物的筛选 | 第36页 |
2.3.7 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第36-38页 |
2.3.8 数据分析 | 第38页 |
2.4 结果与分析 | 第38-45页 |
2.4.1 提取的O. oeni基因组DNA质量的检测 | 第38-39页 |
2.4.2 O. oeni基因组DNA酶切连接产物的预扩增 | 第39-40页 |
2.4.3 选择性扩增 | 第40-41页 |
2.4.4 O. oeni AFLP引物组合的筛选 | 第41-42页 |
2.4.5 中国葡萄酒产区分离的O. oeni的AFLP分析 | 第42-45页 |
2.5 讨论 | 第45-48页 |
第三章 澳大利亚南澳地区高潜在酒精度葡萄原料的发酵及自然MLF过程中细菌的分离鉴定 | 第48-59页 |
3.1 前言 | 第48页 |
3.2 材料、试剂、仪器设备 | 第48-49页 |
3.2.1 材料 | 第48-49页 |
3.2.2 酒样 | 第49页 |
3.2.3 试剂 | 第49页 |
3.2.4 设备 | 第49页 |
3.3 方法 | 第49-52页 |
3.3.1 歌海娜(Grenache)葡萄酒的发酵试验 | 第49-50页 |
3.3.2 苹果酸的测定 | 第50页 |
3.3.3 细菌的分离 | 第50页 |
3.3.4 细菌的初步筛选 | 第50页 |
3.3.5 细菌DNA的提取 | 第50页 |
3.3.6 细菌的 16S r RNA序列分析 | 第50-51页 |
3.3.7 细菌的种特异性PCR鉴定(Species-specific PCR) | 第51-52页 |
3.4 结果与分析 | 第52-56页 |
3.4.1 歌海娜葡萄酒的发酵结果 | 第52-54页 |
3.4.2 细菌菌株的分离纯化 | 第54页 |
3.4.3 细菌的 16S r RNA序列分析 | 第54页 |
3.4.4 细菌的种特异性PCR鉴定(Species-specific PCR) | 第54-56页 |
3.5 讨论 | 第56-59页 |
第四章 澳大利亚南澳地区歌海娜葡萄酒自然MLF过程中分离O. oeni菌株的AFLP分析 | 第59-74页 |
4.1 前言 | 第59页 |
4.2 材料 | 第59-60页 |
4.2.1 供试菌株 | 第59页 |
4.2.2 培养基 | 第59页 |
4.2.3 试剂 | 第59页 |
4.2.4 设备 | 第59-60页 |
4.3 方法 | 第60-63页 |
4.3.1 DNA提取 | 第60-61页 |
4.3.2 菌株基因组DNA的双酶切连接反应体系 | 第61页 |
4.3.3 酶切连接产物的预扩增 | 第61页 |
4.3.4 选择性扩增 | 第61-62页 |
4.3.5 扩增产物的毛细管电泳检测 | 第62页 |
4.3.6 数据分析 | 第62-63页 |
4.3.7 AFLP的重复性试验 | 第63页 |
4.3.8 O.oeni 选择性扩增引物组合的筛选 | 第63页 |
4.4 结果与分析 | 第63-69页 |
4.4.1 两种基因组DNA提取方法提取效果的比较 | 第63-64页 |
4.4.2 分离菌株基因组酶切连接产物的预扩增 | 第64-65页 |
4.4.3 选择性扩增 | 第65页 |
4.4.4 AFLP的重复性试验 | 第65-66页 |
4.4.5 选择性扩增引物的筛选 | 第66页 |
4.4.6 巴罗莎谷产区歌海娜葡萄酒中分离的104株O. oeni的AFLP分析 | 第66-69页 |
4.5 讨论 | 第69-74页 |
第五章 分离乳酸细菌的流式细胞仪快速计数方法的探讨和耐酒精分析 | 第74-87页 |
5.1 前言 | 第74-76页 |
5.2 材料、试剂、仪器设备 | 第76-77页 |
5.2.1 供试菌株 | 第76页 |
5.2.2 试剂 | 第76页 |
5.2.3 培养基 | 第76页 |
5.2.4 仪器设备 | 第76-77页 |
5.3 方法 | 第77-79页 |
5.3.1 细菌的培养和计数 | 第77页 |
5.3.2 分离细菌在MRS-AJ培养基中的生长曲线 | 第77页 |
5.3.3 分离细菌的FCM快速计数探讨 | 第77-78页 |
5.3.4 分离细菌的耐酒精分析 | 第78-79页 |
5.3.5 数据处理 | 第79页 |
5.4 结果与分析 | 第79-84页 |
5.4.1 细菌在MRS-AJ培养基中的生长曲线 | 第79页 |
5.4.2 O. oeni的两种细胞计数方法比较 | 第79-80页 |
5.4.3 L. hilgardii的两种细胞计数方法比较 | 第80-81页 |
5.4.4 O. oeni在含高酒精浓度的MRS-AJ培养基中的生长情况 | 第81-82页 |
5.4.5 L. hilgardii在含高酒精浓度的MRS-AJ培养基中的生长情况 | 第82-84页 |
5.5 讨论 | 第84-87页 |
第六章 结论、创新点和展望 | 第87-90页 |
6.1 结论 | 第87-88页 |
6.2 研究的创新点 | 第88页 |
6.3 展望 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-102页 |
缩略词 | 第102-103页 |
致谢 | 第103-104页 |
作者简介 | 第104页 |