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苹果酸—乳酸发酵细菌的多样性及其耐酒精分析

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第14-32页
    1.1 MLF研究的历史第14-15页
    1.2 MLF对葡萄酒质量的影响第15-17页
        1.2.1 对葡萄酒质量的促进作用第15页
        1.2.2 可能对葡萄酒产生的危害第15-17页
    1.3 葡萄酒酿造过程中的乳酸菌第17页
    1.4 MLB生长的影响因素第17-20页
        1.4.1 葡萄酒p H对MLB生长的影响第17-18页
        1.4.2 葡萄酒中酒精含量对MLB生长的影响第18页
        1.4.3 葡萄酒中二氧化硫含量对MLB生长的影响第18-19页
        1.4.4 温度对葡萄酒中MLB生长的影响第19页
        1.4.5 葡萄酒中酵母对MLB生长的影响第19-20页
    1.5 其它乳酸菌MLF发酵剂的研究进展第20-22页
    1.6 葡萄酒中细菌的分类鉴定第22-29页
        1.6.1 葡萄酒中细菌种的鉴定第23页
        1.6.2 葡萄酒中细菌菌株水平的鉴定方法第23-26页
        1.6.3 葡萄酒微生态中细菌的鉴定第26-29页
    1.7 研究的目的、意义及研究的主要内容第29-31页
        1.7.1 研究的主要目的和意义第29-31页
        1.7.2 研究的主要内容第31页
    1.8 研究的技术路线第31-32页
第二章 O. oeni AFLP分析方法的建立及中国葡萄酒产区O. oeni种质资源遗传多样性分析第32-48页
    2.1 前言第32-33页
    2.2 材料、试剂、仪器设备第33-34页
        2.2.1 供试菌株第33页
        2.2.2 培养基第33-34页
        2.2.3 试剂第34页
        2.2.4 仪器设备第34页
    2.3 试验方法第34-38页
        2.3.1 O. oeni的培养第34页
        2.3.2 O. oeni DNA的提取第34-35页
        2.3.3 双酶切反应体系的建立第35页
        2.3.4 酶切连接产物的预扩增第35-36页
        2.3.5 选择性扩增第36页
        2.3.6 PCR选择性扩增引物的筛选第36页
        2.3.7 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第36-38页
        2.3.8 数据分析第38页
    2.4 结果与分析第38-45页
        2.4.1 提取的O. oeni基因组DNA质量的检测第38-39页
        2.4.2 O. oeni基因组DNA酶切连接产物的预扩增第39-40页
        2.4.3 选择性扩增第40-41页
        2.4.4 O. oeni AFLP引物组合的筛选第41-42页
        2.4.5 中国葡萄酒产区分离的O. oeni的AFLP分析第42-45页
    2.5 讨论第45-48页
第三章 澳大利亚南澳地区高潜在酒精度葡萄原料的发酵及自然MLF过程中细菌的分离鉴定第48-59页
    3.1 前言第48页
    3.2 材料、试剂、仪器设备第48-49页
        3.2.1 材料第48-49页
        3.2.2 酒样第49页
        3.2.3 试剂第49页
        3.2.4 设备第49页
    3.3 方法第49-52页
        3.3.1 歌海娜(Grenache)葡萄酒的发酵试验第49-50页
        3.3.2 苹果酸的测定第50页
        3.3.3 细菌的分离第50页
        3.3.4 细菌的初步筛选第50页
        3.3.5 细菌DNA的提取第50页
        3.3.6 细菌的 16S r RNA序列分析第50-51页
        3.3.7 细菌的种特异性PCR鉴定(Species-specific PCR)第51-52页
    3.4 结果与分析第52-56页
        3.4.1 歌海娜葡萄酒的发酵结果第52-54页
        3.4.2 细菌菌株的分离纯化第54页
        3.4.3 细菌的 16S r RNA序列分析第54页
        3.4.4 细菌的种特异性PCR鉴定(Species-specific PCR)第54-56页
    3.5 讨论第56-59页
第四章 澳大利亚南澳地区歌海娜葡萄酒自然MLF过程中分离O. oeni菌株的AFLP分析第59-74页
    4.1 前言第59页
    4.2 材料第59-60页
        4.2.1 供试菌株第59页
        4.2.2 培养基第59页
        4.2.3 试剂第59页
        4.2.4 设备第59-60页
    4.3 方法第60-63页
        4.3.1 DNA提取第60-61页
        4.3.2 菌株基因组DNA的双酶切连接反应体系第61页
        4.3.3 酶切连接产物的预扩增第61页
        4.3.4 选择性扩增第61-62页
        4.3.5 扩增产物的毛细管电泳检测第62页
        4.3.6 数据分析第62-63页
        4.3.7 AFLP的重复性试验第63页
        4.3.8 O.oeni 选择性扩增引物组合的筛选第63页
    4.4 结果与分析第63-69页
        4.4.1 两种基因组DNA提取方法提取效果的比较第63-64页
        4.4.2 分离菌株基因组酶切连接产物的预扩增第64-65页
        4.4.3 选择性扩增第65页
        4.4.4 AFLP的重复性试验第65-66页
        4.4.5 选择性扩增引物的筛选第66页
        4.4.6 巴罗莎谷产区歌海娜葡萄酒中分离的104株O. oeni的AFLP分析第66-69页
    4.5 讨论第69-74页
第五章 分离乳酸细菌的流式细胞仪快速计数方法的探讨和耐酒精分析第74-87页
    5.1 前言第74-76页
    5.2 材料、试剂、仪器设备第76-77页
        5.2.1 供试菌株第76页
        5.2.2 试剂第76页
        5.2.3 培养基第76页
        5.2.4 仪器设备第76-77页
    5.3 方法第77-79页
        5.3.1 细菌的培养和计数第77页
        5.3.2 分离细菌在MRS-AJ培养基中的生长曲线第77页
        5.3.3 分离细菌的FCM快速计数探讨第77-78页
        5.3.4 分离细菌的耐酒精分析第78-79页
        5.3.5 数据处理第79页
    5.4 结果与分析第79-84页
        5.4.1 细菌在MRS-AJ培养基中的生长曲线第79页
        5.4.2 O. oeni的两种细胞计数方法比较第79-80页
        5.4.3 L. hilgardii的两种细胞计数方法比较第80-81页
        5.4.4 O. oeni在含高酒精浓度的MRS-AJ培养基中的生长情况第81-82页
        5.4.5 L. hilgardii在含高酒精浓度的MRS-AJ培养基中的生长情况第82-84页
    5.5 讨论第84-87页
第六章 结论、创新点和展望第87-90页
    6.1 结论第87-88页
    6.2 研究的创新点第88页
    6.3 展望第88-90页
参考文献第90-102页
缩略词第102-103页
致谢第103-104页
作者简介第104页

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