| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-38页 |
| ·前言 | 第16-17页 |
| ·血栓的形成机理 | 第17-19页 |
| ·抗凝疗法 | 第19-20页 |
| ·抗血小板疗法 | 第20-21页 |
| ·溶栓疗法 | 第21-37页 |
| ·纤溶系统 | 第21-25页 |
| ·溶栓药物的研究进展 | 第25-37页 |
| ·本研究的主要内容和意义 | 第37-38页 |
| 第二章 豆豉纤溶酶产生菌种的筛选及鉴定 | 第38-50页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·菌种来源 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38-39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-45页 |
| ·缓冲液的配制 | 第39页 |
| ·双层纤维蛋白平板的配制 | 第39-40页 |
| ·LB-纤维蛋白平板的配制 | 第40页 |
| ·纤溶活性的测定 | 第40-41页 |
| ·纤溶酶产生菌种的筛选 | 第41页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第41-42页 |
| ·菌种的鉴定 | 第42-45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-49页 |
| ·尿激酶活性标准曲线 | 第45-46页 |
| ·蛋白质含量标准曲线 | 第46页 |
| ·菌种的筛选 | 第46-47页 |
| ·菌种的鉴定 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 第三章 豆豉纤溶酶产生菌种DC-12的诱变 | 第50-63页 |
| ·实验材料 | 第51-53页 |
| ·菌种 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·培养基 | 第52-53页 |
| ·主要仪器设备 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-56页 |
| ·出发菌株的纯化 | 第53页 |
| ·菌种活化与前培养 | 第53页 |
| ·菌悬液的制备 | 第53页 |
| ·诱变剂量的确定 | 第53-54页 |
| ·诱变处理 | 第54页 |
| ·后培养 | 第54-55页 |
| ·初筛 | 第55页 |
| ·复筛 | 第55页 |
| ·筛选标准 | 第55页 |
| ·突变株菌落形态和细胞形态观察 | 第55页 |
| ·遗传稳定性试验 | 第55-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-62页 |
| ·诱变剂剂量的确定 | 第56-57页 |
| ·筛选结果 | 第57-59页 |
| ·突变株菌落形态及细胞形态观察 | 第59-60页 |
| ·突变株的遗传稳定性分析 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 第四章 豆豉纤溶酶产生菌突变株DC-12N8发酵条件的研究 | 第63-74页 |
| ·实验材料 | 第63-64页 |
| ·菌种 | 第63页 |
| ·主要试剂 | 第63-64页 |
| ·培养基 | 第64页 |
| ·主要仪器设备 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-65页 |
| ·斜面菌种的保存 | 第64-65页 |
| ·种子培养条件 | 第65页 |
| ·未优化的发酵培养条件 | 第65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-73页 |
| ·培养基成分及培养条件的优化 | 第65-70页 |
| ·发酵过程曲线 | 第70-73页 |
| ·本章小结 | 第73-74页 |
| 第五章 豆豉纤溶酶的分离纯化 | 第74-86页 |
| ·实验材料 | 第74-75页 |
| ·粗酶液 | 第74页 |
| ·试剂 | 第74-75页 |
| ·主要仪器设备 | 第75页 |
| ·实验方法 | 第75-79页 |
| ·层析缓冲液的配制 | 第75页 |
| ·硫酸铵分段盐析 | 第75-76页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow层析 | 第76页 |
| ·CM-Sepharose Fast Flow层析 | 第76页 |
| ·Sephadex G-75凝胶过滤 | 第76页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第76-79页 |
| ·结果与讨论 | 第79-85页 |
| ·硫酸铵分段盐析 | 第79-80页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow层析 | 第80-81页 |
| ·CM-Sepharose Fast Flow层析 | 第81-82页 |
| ·Sephadex G-75凝胶过滤 | 第82-83页 |
| ·分子量的测定 | 第83-84页 |
| ·讨论 | 第84-85页 |
| ·本章小结 | 第85-86页 |
| 第六章 豆豉纤溶酶DN-FE基因的克隆及序列分析 | 第86-102页 |
| ·实验材料 | 第86-88页 |
| ·菌株与质粒载体 | 第86-87页 |
| ·主要试剂 | 第87页 |
| ·培养基 | 第87-88页 |
| ·主要仪器设备 | 第88页 |
| ·实验方法 | 第88-91页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE基因的PCR扩增 | 第88-89页 |
| ·DN-FE基因的克隆 | 第89-91页 |
| ·DN-FE基因的序列测定及分析 | 第91页 |
| ·结果与讨论 | 第91-101页 |
| ·从豆豉纤溶酶菌株洲总DNA中克隆的DN-FE基因 | 第91-92页 |
| ·PCR产物的克隆及重组子的鉴定 | 第92-93页 |
| ·DN-FE基因测序及序列分析 | 第93-101页 |
| ·本章小结 | 第101-102页 |
| 第七章 豆豉纤溶酶DN-FE酶学性质的研究 | 第102-119页 |
| ·实验材料 | 第102页 |
| ·菌种 | 第102页 |
| ·主要试剂 | 第102页 |
| ·主要仪器设备 | 第102-103页 |
| ·实验方法 | 第103-107页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE的最适反应温度 | 第103页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE的最适反应pH | 第103-104页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE的温度稳定性 | 第104页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE的pH稳定性 | 第104页 |
| ·金属离子对豆豉纤溶酶DN-FE酶活力的影响 | 第104页 |
| ·抑制剂对豆豉纤溶酶DN-FE酶活力的影响 | 第104-105页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE酰胺水解活性的测定 | 第105-106页 |
| ·豆豉纤酶DN-FE水解酷蛋白活性的测定 | 第106-107页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE溶解纤维蛋白的作用方式 | 第107页 |
| ·结果与讨论 | 第107-118页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE的最适反应温度 | 第107-108页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE的最适反应pH | 第108页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE的温度稳定性 | 第108-109页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE的pH稳定性 | 第109-110页 |
| ·金属离子对豆豉纤溶酶DN-FE酶活力的影响 | 第110-111页 |
| ·抑制剂对豆豉纤溶酶DN-FE酶活力的影响 | 第111-112页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE酰胺水解活性的测定 | 第112-114页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE水解蛋酪蛋白活性的测定 | 第114-115页 |
| ·豆豉纤溶酶DN-FE溶解纤维蛋白的作用方式 | 第115-116页 |
| ·不同来源的纤溶酶酶学性质的比较 | 第116页 |
| ·讨论 | 第116-118页 |
| ·本章小结 | 第118-119页 |
| 结论与展望 | 第119-122页 |
| 参考文献 | 第122-129页 |
| 攻读博士学位期间发表论文情况 | 第129-130页 |
| 附录 豆豉纤溶酶产生菌DC-12菌种鉴定报告 | 第130-132页 |
| 致谢 | 第132页 |
