| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 GTF 和糖尿病 | 第10-15页 |
| 1.1.1 铬和糖尿病 | 第10-13页 |
| 1.1.2 铬补充剂 | 第13-14页 |
| 1.1.3 高活性铬补充剂—GTF | 第14-15页 |
| 1.2 发酵制备 GTF 的工艺研究 | 第15-16页 |
| 1.3 GTF 的分离纯化研究 | 第16-17页 |
| 1.3.1 GTF 的分离纯化 | 第16-17页 |
| 1.3.2 GTF 的结构解析 | 第17页 |
| 1.4 GTF 的作用机理研究 | 第17-18页 |
| 1.5 研究内容及技术路线 | 第18-21页 |
| 第二章 高产 GTF 酵母菌株发酵特性研究 | 第21-32页 |
| 2.1 前言 | 第21-22页 |
| 2.2 材料与方法 | 第22-27页 |
| 2.2.1 仪器与试剂 | 第22页 |
| 2.2.2 实验菌株 | 第22页 |
| 2.2.3 培养基配制 | 第22-23页 |
| 2.2.4 番红染液配制 | 第23页 |
| 2.2.5 菌株遗传稳定性实验 | 第23页 |
| 2.2.6 发酵工艺 | 第23-25页 |
| 2.2.6.1 15L 发酵工艺 | 第23-24页 |
| 2.2.6.1.1 制备种子液 | 第23页 |
| 2.2.6.1.2 发酵工艺 | 第23-24页 |
| 2.2.6.2 50L 发酵工艺 | 第24-25页 |
| 2.2.6.2.1 制备种子液 | 第24页 |
| 2.2.6.2.2 发酵工艺 | 第24-25页 |
| 2.2.7 市售富铬酵母产品测定 | 第25页 |
| 2.2.8 番红染色 | 第25页 |
| 2.2.9 指标测定 | 第25-27页 |
| 2.2.9.1 生物量测定 | 第25-26页 |
| 2.2.9.2 有机铬测定 | 第26页 |
| 2.2.9.3 总铬测定 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-30页 |
| 2.3.1 菌株遗传稳定性实验 | 第27-28页 |
| 2.3.2 菌株形态观察 | 第28页 |
| 2.3.3 发酵工艺研究 | 第28-29页 |
| 2.3.4 讨论 | 第29-30页 |
| 2.4 本章小结 | 第30-32页 |
| 第三章 酵母菌葡萄糖耐量因子（GTF）的提取纯化研究 | 第32-41页 |
| 3.1 前言 | 第32页 |
| 3.2 材料与方法 | 第32-36页 |
| 3.2.1 仪器与试剂 | 第32-33页 |
| 3.2.2 菌株 | 第33页 |
| 3.2.3 富铬酵母菌体的制备 | 第33页 |
| 3.2.4 GTF 提取浓缩处理 | 第33-34页 |
| 3.2.5 SuperdexTM75 凝胶过滤层析 | 第34页 |
| 3.2.6 Sephadex G25 凝胶过滤层析 | 第34-35页 |
| 3.2.7 反相高效液相色谱（RP-HPLC） | 第35-36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-40页 |
| 3.3.1 Superdex~(TM)75 凝胶过滤层析 | 第36-37页 |
| 3.3.2 Sephadex G25 凝胶过滤层析 | 第37-38页 |
| 3.3.3 RP-HPLC 第一次纯化 | 第38-39页 |
| 3.3.4 RP-HPLC 第二次纯化 | 第39页 |
| 3.3.5 讨论 | 第39-40页 |
| 3.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 第四章 GTF 对胰岛素抵抗型 3T3-L1 脂肪细胞葡萄糖代谢的影响 | 第41-58页 |
| 4.1 前言 | 第41-42页 |
| 4.2 材料与方法 | 第42-47页 |
| 4.2.1 仪器与试剂 | 第42页 |
| 4.2.2 细胞 | 第42-43页 |
| 4.2.3 试剂配制 | 第43-44页 |
| 4.2.3.1 磷酸盐缓冲液（PBS） | 第43页 |
| 4.2.3.2 完全培养基的配制 | 第43页 |
| 4.2.3.3 细胞冻存液 | 第43页 |
| 4.2.3.4 细胞诱导液配制 | 第43-44页 |
| 4.2.3.5 5mg/mL MTT 储存液 | 第44页 |
| 4.2.3.6 铬样品的溶解 | 第44页 |
| 4.2.4 细胞培养 | 第44-45页 |
| 4.2.4.1 培养细胞 | 第44页 |
| 4.2.4.2 细胞冻存 | 第44页 |
| 4.2.4.3 细胞复苏 | 第44-45页 |
| 4.2.4.4 细胞计数 | 第45页 |
| 4.2.5 前脂肪细胞诱导分化成脂肪细胞 | 第45-46页 |
| 4.2.6 胰岛素抵抗模型的建立及评价 | 第46页 |
| 4.2.6.1 胰岛素抵抗型细胞的建立 | 第46页 |
| 4.2.6.2 胰岛素抵抗型细胞的评价 | 第46页 |
| 4.2.7 葡萄糖消耗量的测定 | 第46-47页 |
| 4.2.7.1 不同剂量 GTF 对细胞葡萄糖代谢的影响 | 第46页 |
| 4.2.7.2 GTF 作用不同时间对细胞葡萄糖代谢的影响 | 第46页 |
| 4.2.7.3 不同铬制剂对细胞葡萄糖代谢的影响 | 第46-47页 |
| 4.2.8 细胞活性测定-MTT 法 | 第47页 |
| 4.2.8.1 不同剂量 GTF 对细胞存活率的影响 | 第47页 |
| 4.2.8.2 不同铬制剂对细胞存活率的影响 | 第47页 |
| 4.3 结果与分析 | 第47-57页 |
| 4.3.1 3T3-L1 前脂肪细胞的培养及诱导分化 | 第47-50页 |
| 4.3.2 胰岛素抵抗模型的建立 | 第50-51页 |
| 4.3.3 不同剂量 GTF 对细胞葡萄糖代谢的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.4 GTF 作用不同时间对细胞葡萄糖代谢的影响 | 第52-53页 |
| 4.3.5 不同来源铬对细胞葡萄糖代谢的影响 | 第53-54页 |
| 4.3.6 细胞存活率测定-MTT 法 | 第54-55页 |
| 4.3.6.1 不同剂量 GTF 对细胞存活率的影响 | 第54-55页 |
| 4.3.6.2 不同来源铬对细胞存活率的影响 | 第55页 |
| 4.3.7 讨论 | 第55-57页 |
| 4.4 本章小结 | 第57-58页 |
| 第五章 全文结论与工作展望 | 第58-61页 |
| 5.1 本文实验研究总结 | 第58-59页 |
| 5.1.1 菌株发酵特性研究 | 第58-59页 |
| 5.1.2 GTF 的提取纯化 | 第59页 |
| 5.1.3 GTF 对胰岛素抵抗型 3T3-L1 脂肪细胞葡萄糖代谢的影响 | 第59页 |
| 5.2 工作展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第67-68页 |
| 缩略词表 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
