| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 英文缩写索引 | 第8-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-25页 |
| 1.1 消毒剂概述 | 第17-18页 |
| 1.2 细菌的生物被膜及其耐药机制 | 第18-19页 |
| 1.2.1 细菌的生物被膜 | 第18-19页 |
| 1.2.2 细菌生物被膜的耐药性机制 | 第19页 |
| 1.3 LM的检测方法 | 第19-20页 |
| 1.3.1 传统的分离鉴定方法 | 第19-20页 |
| 1.3.2 免疫学检测方法 | 第20页 |
| 1.3.3 传统的PCR检测方法 | 第20页 |
| 1.3.4 实时荧光定量PCR检测方法 | 第20页 |
| 1.4 细菌多样性的分析方法 | 第20-23页 |
| 1.4.1 16S rDNA克隆文库分析法 | 第21页 |
| 1.4.2 限制性片段长度多态性分析法 | 第21-22页 |
| 1.4.3 末端限制性片段长度多态性分析法 | 第22页 |
| 1.4.4 变性梯度凝胶电泳分析 | 第22-23页 |
| 1.4.5 高通量测序分析 | 第23页 |
| 1.5 国内外研究现状 | 第23-24页 |
| 1.6 本课题研究内容及目的 | 第24-25页 |
| 第二章 消毒环境生物被膜中LM的筛选与鉴定 | 第25-33页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.2.1 菌株及来源 | 第25页 |
| 2.2.2 主要试剂与仪器 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.3.1 样品采集 | 第26页 |
| 2.3.2 单核增生李斯特菌初步分离与鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.3 单核增生李斯特菌的形态学鉴定 | 第27页 |
| 2.3.4 单核增生李斯特菌的的PCR鉴定 | 第27-29页 |
| 2.4 结果分析 | 第29-31页 |
| 2.4.1 初步分离与鉴定结果 | 第29-30页 |
| 2.4.2 PCR鉴定结果 | 第30-31页 |
| 2.5 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 苯扎溴铵对单核增生李斯特菌的MIC测定 | 第33-37页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 实验材料 | 第33-34页 |
| 3.2.1 实验菌株 | 第33页 |
| 3.2.2 主要试剂与仪器 | 第33-34页 |
| 3.2.3 主要溶液与培养基的配置 | 第34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-35页 |
| 3.3.1 单核增生李斯特菌的活化 | 第34页 |
| 3.3.2 含药琼脂平板制备 | 第34-35页 |
| 3.3.3 接种物制备与接种 | 第35页 |
| 3.3.4 读取结果 | 第35页 |
| 3.4 结果与分析 | 第35-36页 |
| 3.5 讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 基于16S rDNA基因的T-RFLP与克隆文库分析 | 第37-52页 |
| 4.1 引言 | 第37页 |
| 4.2 实验材料 | 第37-39页 |
| 4.2.1 实验样品 | 第37页 |
| 4.2.2 主要试剂与仪器 | 第37-38页 |
| 4.2.3 主要溶液与培养基的配置 | 第38-39页 |
| 4.3 实验方法 | 第39-44页 |
| 4.3.1 样品基因组DNA的提取 | 第39页 |
| 4.3.2 16S rDNA片段的PCR扩增及纯化 | 第39-41页 |
| 4.3.3 T-RFLP分析 | 第41页 |
| 4.3.4 16S rDNA克隆文库的构建 | 第41-43页 |
| 4.3.5 数据统计分析 | 第43-44页 |
| 4.4 结果与分析 | 第44-50页 |
| 4.4.1 总DNA的提取结果 | 第44-45页 |
| 4.4.2 16S rDNA的扩增结果 | 第45-46页 |
| 4.4.3 T-RFLP分析结果 | 第46-47页 |
| 4.4.4 16S rDNA文库分析结果 | 第47-50页 |
| 4.5 讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 DGGE分析菌群结构及优势菌 | 第52-65页 |
| 5.1 引言 | 第52页 |
| 5.2 实验材料 | 第52-54页 |
| 5.2.1 实验样品 | 第52-53页 |
| 5.2.2 主要试剂与仪器 | 第53-54页 |
| 5.2.3 主要溶液与培养基的配置 | 第54页 |
| 5.3 实验方法 | 第54-58页 |
| 5.3.1 PCR扩增及纯化 | 第54-56页 |
| 5.3.2 DGGE胶的配制 | 第56-57页 |
| 5.3.3 DGGE(变性梯度凝胶电泳) | 第57-58页 |
| 5.3.4 DGGE条带的回收及PCR扩增 | 第58页 |
| 5.3.5 回收条带克隆及测序 | 第58页 |
| 5.4 结果和分析 | 第58-62页 |
| 5.4.1 基因组DNA的16S rDNA V3区扩增 | 第58-59页 |
| 5.4.2 DGGE谱图分析 | 第59-60页 |
| 5.4.3 DNA测序结果及优势菌分析 | 第60-62页 |
| 5.5 讨论 | 第62-65页 |
| 结论与展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
