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叠氮溴化乙锭(EMA)联用PCR方法应用于鸡肉中沙门氏菌活菌检测研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
缩略语第12-13页
前言第13-15页
第一章 文献综述第15-31页
 1 沙门氏菌快速检测方法研究进展第15-22页
   ·免疫学方法第15-18页
     ·酶联免疫吸附法第15-16页
     ·免疫荧光标记法第16-17页
     ·斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)第17页
     ·免疫磁性分离(IMS)技术第17页
     ·PCR-ELISA法第17-18页
   ·分子生物学方法第18-21页
     ·聚合酶链式反应法第18-20页
     ·核酸分子杂交第20-21页
     ·基因芯片技术第21页
   ·其他检测沙门氏菌的方法第21-22页
     ·电阻抗法第21-22页
     ·示培养法第22页
     ·噬菌体法第22页
     ·生物传感器法第22页
 2 叠氮溴化乙锭(EMA)研究进展第22-25页
   ·EMA PCR方法在致病菌检测中的应用第23-24页
   ·EMA PCR方法存在问题第24-25页
 参考文献第25-31页
第二章 肠炎沙门氏菌EMA PCR检测方法的建立第31-43页
 1 材料与方法第31-33页
   ·试验材料第31-32页
     ·菌种来源第31页
     ·试验试剂第31-32页
   ·试验设备第32页
   ·试验方法第32-33页
     ·肠炎沙门氏菌活菌和死菌菌悬液的制备第32页
     ·EMA使用浓度优化第32-33页
     ·曝光时间优化第33页
     ·EMA PCR方法灵敏度检验第33页
     ·不同活菌比例的混合菌液的EMA PCR检测第33页
     ·引物序列及PCR反应第33页
 2 结果与分析第33-36页
   ·抑制死菌DNA扩增的EMA质量浓度的确定第33-34页
   ·抑制死菌DNA扩增的最佳曝光时间的确定第34-35页
   ·EMA-PCR方法对肠炎沙门氏菌活菌检测灵敏度分析第35-36页
   ·不同活菌比例混合菌液的EMA-PCR检测结果第36页
 3 讨论第36-37页
 4 本章小结第37-39页
 参考文献第39-43页
第三章 鸡肉中活的鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的EMA RT-PCR检测方法的建立第43-55页
 1 材料与方法第43-46页
   ·试验材料第43-44页
     ·菌种来源第43页
     ·试验试剂第43-44页
   ·试验设备第44页
   ·试验方法第44-46页
     ·鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌活菌和死菌菌悬液的制备第44页
     ·菌悬液添加EMA的处理方法及DNA模版的提取第44-45页
     ·鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌定量标准曲线的制作第45页
     ·人工污染鸡肉样品的RT-PCR和EMA RT-PCR定量检测第45页
     ·引物及RT-PCR扩增参数第45-46页
     ·数据分析第46页
 2 结果与分析第46-51页
   ·EMA对鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌DNA RT-PCR扩增反应的影响第46-48页
   ·定量标准曲线第48-49页
   ·混合菌液污染鸡肉样品检测结果第49-51页
 3 讨论第51-52页
 4 本章小结第52-53页
 参考文献第53-55页
第四章 鸡肉中混合鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌EMA RT-PCR检测方法建立第55-67页
 1 材料与方法第55-58页
   ·试验材料第55-56页
     ·菌种来源第55页
     ·试验试剂第55-56页
   ·试验设备第56页
   ·试验方法第56-58页
     ·活菌混合菌悬液和死菌混合菌悬液的制备第56页
     ·活菌混合菌悬液标准曲线的制作第56页
     ·活菌混合菌悬液或死菌混合菌悬液人工污染鸡肉样品的RT-PCR和EMA RT-PCR定量检测第56-57页
     ·活菌/死菌混合菌悬液人工污染鸡肉样品的RT-PCR和EMA RT-PCR定量检测第57页
     ·引物及RT-PCR扩增参数第57-58页
     ·数据分析第58页
 2 结果与分析第58-63页
   ·活菌混合菌悬液标准曲线第58-59页
   ·活菌或死菌混合菌悬液人工污染鸡肉样品的RT-PCR和EMA RT-PCR定量检测结果第59-62页
   ·活菌/死菌混合菌悬液人工污染鸡肉样品的RT-PCR和EMA RT-PCR定量检测结果第62-63页
 3 讨论第63-64页
 4 本章小结第64-65页
 参考文献第65-67页
全文结论第67-69页
致谢第69-71页
攻读学位期间发表学术论文目录第71页

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