摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
缩略语 | 第12-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-31页 |
1 沙门氏菌快速检测方法研究进展 | 第15-22页 |
·免疫学方法 | 第15-18页 |
·酶联免疫吸附法 | 第15-16页 |
·免疫荧光标记法 | 第16-17页 |
·斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA) | 第17页 |
·免疫磁性分离(IMS)技术 | 第17页 |
·PCR-ELISA法 | 第17-18页 |
·分子生物学方法 | 第18-21页 |
·聚合酶链式反应法 | 第18-20页 |
·核酸分子杂交 | 第20-21页 |
·基因芯片技术 | 第21页 |
·其他检测沙门氏菌的方法 | 第21-22页 |
·电阻抗法 | 第21-22页 |
·示培养法 | 第22页 |
·噬菌体法 | 第22页 |
·生物传感器法 | 第22页 |
2 叠氮溴化乙锭(EMA)研究进展 | 第22-25页 |
·EMA PCR方法在致病菌检测中的应用 | 第23-24页 |
·EMA PCR方法存在问题 | 第24-25页 |
参考文献 | 第25-31页 |
第二章 肠炎沙门氏菌EMA PCR检测方法的建立 | 第31-43页 |
1 材料与方法 | 第31-33页 |
·试验材料 | 第31-32页 |
·菌种来源 | 第31页 |
·试验试剂 | 第31-32页 |
·试验设备 | 第32页 |
·试验方法 | 第32-33页 |
·肠炎沙门氏菌活菌和死菌菌悬液的制备 | 第32页 |
·EMA使用浓度优化 | 第32-33页 |
·曝光时间优化 | 第33页 |
·EMA PCR方法灵敏度检验 | 第33页 |
·不同活菌比例的混合菌液的EMA PCR检测 | 第33页 |
·引物序列及PCR反应 | 第33页 |
2 结果与分析 | 第33-36页 |
·抑制死菌DNA扩增的EMA质量浓度的确定 | 第33-34页 |
·抑制死菌DNA扩增的最佳曝光时间的确定 | 第34-35页 |
·EMA-PCR方法对肠炎沙门氏菌活菌检测灵敏度分析 | 第35-36页 |
·不同活菌比例混合菌液的EMA-PCR检测结果 | 第36页 |
3 讨论 | 第36-37页 |
4 本章小结 | 第37-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
第三章 鸡肉中活的鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的EMA RT-PCR检测方法的建立 | 第43-55页 |
1 材料与方法 | 第43-46页 |
·试验材料 | 第43-44页 |
·菌种来源 | 第43页 |
·试验试剂 | 第43-44页 |
·试验设备 | 第44页 |
·试验方法 | 第44-46页 |
·鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌活菌和死菌菌悬液的制备 | 第44页 |
·菌悬液添加EMA的处理方法及DNA模版的提取 | 第44-45页 |
·鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌定量标准曲线的制作 | 第45页 |
·人工污染鸡肉样品的RT-PCR和EMA RT-PCR定量检测 | 第45页 |
·引物及RT-PCR扩增参数 | 第45-46页 |
·数据分析 | 第46页 |
2 结果与分析 | 第46-51页 |
·EMA对鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌DNA RT-PCR扩增反应的影响 | 第46-48页 |
·定量标准曲线 | 第48-49页 |
·混合菌液污染鸡肉样品检测结果 | 第49-51页 |
3 讨论 | 第51-52页 |
4 本章小结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-55页 |
第四章 鸡肉中混合鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌EMA RT-PCR检测方法建立 | 第55-67页 |
1 材料与方法 | 第55-58页 |
·试验材料 | 第55-56页 |
·菌种来源 | 第55页 |
·试验试剂 | 第55-56页 |
·试验设备 | 第56页 |
·试验方法 | 第56-58页 |
·活菌混合菌悬液和死菌混合菌悬液的制备 | 第56页 |
·活菌混合菌悬液标准曲线的制作 | 第56页 |
·活菌混合菌悬液或死菌混合菌悬液人工污染鸡肉样品的RT-PCR和EMA RT-PCR定量检测 | 第56-57页 |
·活菌/死菌混合菌悬液人工污染鸡肉样品的RT-PCR和EMA RT-PCR定量检测 | 第57页 |
·引物及RT-PCR扩增参数 | 第57-58页 |
·数据分析 | 第58页 |
2 结果与分析 | 第58-63页 |
·活菌混合菌悬液标准曲线 | 第58-59页 |
·活菌或死菌混合菌悬液人工污染鸡肉样品的RT-PCR和EMA RT-PCR定量检测结果 | 第59-62页 |
·活菌/死菌混合菌悬液人工污染鸡肉样品的RT-PCR和EMA RT-PCR定量检测结果 | 第62-63页 |
3 讨论 | 第63-64页 |
4 本章小结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-67页 |
全文结论 | 第67-69页 |
致谢 | 第69-71页 |
攻读学位期间发表学术论文目录 | 第71页 |