摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第15-25页 |
1.1 引言 | 第15页 |
1.2 辅酶Q10的理化性质 | 第15-16页 |
1.3 辅酶Q10各种的应用 | 第16-17页 |
1.3.1 医学领域中的应用 | 第16-17页 |
1.3.2 化妆品中的应用 | 第17页 |
1.3.3 食品中的应用 | 第17页 |
1.4 辅酶Q10的研究进展 | 第17-23页 |
1.4.1 辅酶Q10的生产方法及生产概况 | 第17-19页 |
1.4.1.1 生物提取法 | 第17-18页 |
1.4.1.2 化学合成法 | 第18页 |
1.4.1.3 微生物发酵法 | 第18-19页 |
1.4.2 辅酶Q10产生菌的诱变育种 | 第19-20页 |
1.4.2.1 紫外诱变与和LiCl诱变 | 第19页 |
1.4.2.2 耐前体突变株选育 | 第19-20页 |
1.4.2.3 利用细胞毒性物质筛选高性能菌株 | 第20页 |
1.4.3 发酵过程中的影响因素 | 第20-23页 |
1.4.3.1 碳氮源 | 第20-21页 |
1.4.3.2 无机盐类及微量元素 | 第21页 |
1.4.3.3 前体物质 | 第21页 |
1.4.3.4 灭菌方式 | 第21-22页 |
1.4.3.5 pH | 第22页 |
1.4.3.6 发酵温度 | 第22页 |
1.4.3.7 溶氧水平 | 第22-23页 |
1.4.3.8 补料分批发酵技术 | 第23页 |
1.5 论文研究内容及意义 | 第23-25页 |
第二章 辅酶Q10产生菌的诱变筛选 | 第25-40页 |
2.1 引言 | 第25页 |
2.2 材料与方法 | 第25-27页 |
2.2.1 材料 | 第25页 |
2.2.2 主要仪器与设备 | 第25-26页 |
2.2.3 主要试剂 | 第26页 |
2.2.4 培养基 | 第26-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-30页 |
2.3.1 培养方法 | 第27页 |
2.3.1.1 菌种保藏方法 | 第27页 |
2.3.1.2 斜面培养 | 第27页 |
2.3.1.3 种子培养 | 第27页 |
2.3.1.4 发酵培养 | 第27页 |
2.3.2 检测方法 | 第27-28页 |
2.3.2.1 辅酶Q10提取方法 | 第27-28页 |
2.3.2.2 辅酶Q10分析方法 | 第28页 |
2.3.2.3 菌浓的测定 | 第28页 |
2.3.3 诱变选育 | 第28-29页 |
2.3.3.1 诱变选育流程 | 第28页 |
2.3.3.2 悬浮液的制备 | 第28页 |
2.3.3.3 紫外诱变(UV) | 第28-29页 |
2.3.3.4 LiCl诱变 | 第29页 |
2.3.3.5 对羟基苯甲酸(PHB)和罗红霉素对菌株最小抑制浓度的确定 | 第29页 |
2.3.4 突变株筛选方法 | 第29页 |
2.3.4.1 诱变菌株的初筛 | 第29页 |
2.3.4.2 辅酶Q10高产菌株的复筛 | 第29页 |
2.3.5 突变株的稳定性研究 | 第29-30页 |
2.4 结果与讨论 | 第30-38页 |
2.4.1 出发菌种的生长特性 | 第30-31页 |
2.4.2 菌株诱变选育 | 第31-35页 |
2.4.2.1 紫外诱变时间对存活率的影响 | 第31-32页 |
2.4.2.2 氯化锂(LiCl)诱变 | 第32-34页 |
2.4.2.3 ULC-8的分离纯化 | 第34页 |
2.4.2.4 对羟基苯甲酸(PHB)临界浓度的选定 | 第34-35页 |
2.4.2.5 罗红霉素对出发菌株临界浓度的选定 | 第35页 |
2.4.3 ULC-36菌株抗性筛选 | 第35-38页 |
2.4.3.1 PHB抗性筛选 | 第35-36页 |
2.4.3.2 ULP-52的分离纯化 | 第36-37页 |
2.4.3.3 ULP-175菌株的抗罗红霉素筛选 | 第37页 |
2.4.3.4 ULR-68的分离纯化 | 第37-38页 |
2.4.4 菌株的传代稳定性 | 第38页 |
2.5 本章小结 | 第38-40页 |
第三章 辅酶Q10发酵培养基的优化 | 第40-57页 |
3.1 引言 | 第40-41页 |
3.2 实验材料 | 第41页 |
3.2.1 出发菌株 | 第41页 |
3.2.2 仪器与设备 | 第41页 |
3.2.3 主要药品与试剂 | 第41页 |
3.2.4 培养基 | 第41页 |
3.3 实验方法 | 第41-44页 |
3.3.1 培养方法 | 第41页 |
3.3.1.1 菌种保藏方法 | 第41页 |
3.3.1.2 斜面培养 | 第41页 |
3.3.1.3 种子培养 | 第41页 |
3.3.1.4 发酵培养 | 第41页 |
3.3.2 分析方法 | 第41页 |
3.3.2.1 辅酶Q10的分析方法 | 第41页 |
3.3.3 种子母瓶培养时间的优化 | 第41-42页 |
3.3.4 发酵摇瓶实验 | 第42页 |
3.3.4.1 摇瓶装量对发酵结果的影响 | 第42页 |
3.3.4.2 培养温度对发酵结果的影响 | 第42页 |
3.3.4.3 摇床转速对发酵结果的影响 | 第42页 |
3.3.4.4 接种量对发酵结果的影响 | 第42页 |
3.3.4.5 pH对发酵结果的影响 | 第42页 |
3.3.5 碳源最佳浓度的确定 | 第42-43页 |
3.3.6 氮源最佳浓度确定 | 第43页 |
3.3.6.1 硫酸铵的优化 | 第43页 |
3.3.6.2 酵母抽提物的优化 | 第43页 |
3.3.7 无机盐优化 | 第43-44页 |
3.3.7.1 硫酸镁的优化 | 第43页 |
3.3.7.2 氯化钠的优化 | 第43-44页 |
3.3.7.3 硫酸亚铁的优化 | 第44页 |
3.3.7.4 磷酸二氢钾的优化 | 第44页 |
3.7 结果与讨论 | 第44-50页 |
3.7.1 种龄优化 | 第44-45页 |
3.7.2 装量对发酵的影响 | 第45-46页 |
3.7.3 温度对发酵的影响 | 第46-47页 |
3.7.4 转速对发酵的影响 | 第47-48页 |
3.7.5 接种量对发酵的影响 | 第48-49页 |
3.7.6 pH对发酵的影响 | 第49-50页 |
3.8 碳源对辅酶Q10的影响 | 第50-51页 |
3.8.1 不同浓度葡萄糖对发酵的影响 | 第50-51页 |
3.9 氮源对辅酶Q10的影响 | 第51-52页 |
3.9.1 硫酸铵不同浓度对发酵的影响 | 第51页 |
3.9.2 不同浓度酵母提取物对发酵的影响 | 第51-52页 |
3.10 无机盐的影响 | 第52-56页 |
3.10.1 不同浓度硫酸镁对发酵的影响 | 第52-53页 |
3.10.2 不同浓度硫酸亚铁对发酵的影响 | 第53-54页 |
3.10.3 不同浓度氯化钠对发酵的影响 | 第54-55页 |
3.10.4 不同浓度磷酸二氢钾对发酵的影响 | 第55-56页 |
3.11 本章小结 | 第56-57页 |
第四章 辅酶Q10发酵工艺的优化与放大 | 第57-76页 |
4.1 引言 | 第57页 |
4.2 材料与方法 | 第57-58页 |
4.2.1 菌种 | 第57页 |
4.2.2 试剂与材料 | 第57页 |
4.2.3 仪器和设备 | 第57-58页 |
4.2.4 培养基 | 第58页 |
4.3 实验方法 | 第58-61页 |
4.3.1 发酵液OD660的检测 | 第58页 |
4.3.2 pH控制 | 第58页 |
4.3.3 发酵样品中还原糖浓度测定 | 第58-60页 |
4.3.4 发酵液氨基氮的测定 | 第60页 |
4.3.5 发酵样品磷浓度测定 | 第60-61页 |
4.4 结果与讨论 | 第61-70页 |
4.4.1 辅酶Q10分批发酵 | 第61-63页 |
4.4.2 发酵罐通气比优化 | 第63-64页 |
4.4.3 搅拌速度优化 | 第64页 |
4.4.4 补加葡萄糖对辅酶Q10效价的影响 | 第64-66页 |
4.4.5 补加新鲜培养基对辅酶Q10的影响 | 第66-68页 |
4.4.6 发酵培养基流加磷酸二氢钾浓度对辅酶Q10产量的影响 | 第68-70页 |
4.5 工艺操作优化 | 第70-75页 |
4.5.1 传统火焰接种法与压差接种法对辅酶Q10生产的影响 | 第70-72页 |
4.5.2 消毒方法的优化 | 第72-75页 |
4.7 本章小结 | 第75-76页 |
第五章 结论与展望 | 第76-78页 |
5.1 结论 | 第76-77页 |
5.2 展望 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-85页 |
致谢 | 第85页 |