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辅酶Q10产生菌沼泽红假单胞菌的诱变筛选及发酵工艺优化

摘要第4-6页
abstract第6-8页
第一章 绪论第15-25页
    1.1 引言第15页
    1.2 辅酶Q10的理化性质第15-16页
    1.3 辅酶Q10各种的应用第16-17页
        1.3.1 医学领域中的应用第16-17页
        1.3.2 化妆品中的应用第17页
        1.3.3 食品中的应用第17页
    1.4 辅酶Q10的研究进展第17-23页
        1.4.1 辅酶Q10的生产方法及生产概况第17-19页
            1.4.1.1 生物提取法第17-18页
            1.4.1.2 化学合成法第18页
            1.4.1.3 微生物发酵法第18-19页
        1.4.2 辅酶Q10产生菌的诱变育种第19-20页
            1.4.2.1 紫外诱变与和LiCl诱变第19页
            1.4.2.2 耐前体突变株选育第19-20页
            1.4.2.3 利用细胞毒性物质筛选高性能菌株第20页
        1.4.3 发酵过程中的影响因素第20-23页
            1.4.3.1 碳氮源第20-21页
            1.4.3.2 无机盐类及微量元素第21页
            1.4.3.3 前体物质第21页
            1.4.3.4 灭菌方式第21-22页
            1.4.3.5 pH第22页
            1.4.3.6 发酵温度第22页
            1.4.3.7 溶氧水平第22-23页
            1.4.3.8 补料分批发酵技术第23页
    1.5 论文研究内容及意义第23-25页
第二章 辅酶Q10产生菌的诱变筛选第25-40页
    2.1 引言第25页
    2.2 材料与方法第25-27页
        2.2.1 材料第25页
        2.2.2 主要仪器与设备第25-26页
        2.2.3 主要试剂第26页
        2.2.4 培养基第26-27页
    2.3 实验方法第27-30页
        2.3.1 培养方法第27页
            2.3.1.1 菌种保藏方法第27页
            2.3.1.2 斜面培养第27页
            2.3.1.3 种子培养第27页
            2.3.1.4 发酵培养第27页
        2.3.2 检测方法第27-28页
            2.3.2.1 辅酶Q10提取方法第27-28页
            2.3.2.2 辅酶Q10分析方法第28页
            2.3.2.3 菌浓的测定第28页
        2.3.3 诱变选育第28-29页
            2.3.3.1 诱变选育流程第28页
            2.3.3.2 悬浮液的制备第28页
            2.3.3.3 紫外诱变(UV)第28-29页
            2.3.3.4 LiCl诱变第29页
            2.3.3.5 对羟基苯甲酸(PHB)和罗红霉素对菌株最小抑制浓度的确定第29页
        2.3.4 突变株筛选方法第29页
            2.3.4.1 诱变菌株的初筛第29页
            2.3.4.2 辅酶Q10高产菌株的复筛第29页
        2.3.5 突变株的稳定性研究第29-30页
    2.4 结果与讨论第30-38页
        2.4.1 出发菌种的生长特性第30-31页
        2.4.2 菌株诱变选育第31-35页
            2.4.2.1 紫外诱变时间对存活率的影响第31-32页
            2.4.2.2 氯化锂(LiCl)诱变第32-34页
            2.4.2.3 ULC-8的分离纯化第34页
            2.4.2.4 对羟基苯甲酸(PHB)临界浓度的选定第34-35页
            2.4.2.5 罗红霉素对出发菌株临界浓度的选定第35页
        2.4.3 ULC-36菌株抗性筛选第35-38页
            2.4.3.1 PHB抗性筛选第35-36页
            2.4.3.2 ULP-52的分离纯化第36-37页
            2.4.3.3 ULP-175菌株的抗罗红霉素筛选第37页
            2.4.3.4 ULR-68的分离纯化第37-38页
        2.4.4 菌株的传代稳定性第38页
    2.5 本章小结第38-40页
第三章 辅酶Q10发酵培养基的优化第40-57页
    3.1 引言第40-41页
    3.2 实验材料第41页
        3.2.1 出发菌株第41页
        3.2.2 仪器与设备第41页
        3.2.3 主要药品与试剂第41页
        3.2.4 培养基第41页
    3.3 实验方法第41-44页
        3.3.1 培养方法第41页
            3.3.1.1 菌种保藏方法第41页
            3.3.1.2 斜面培养第41页
            3.3.1.3 种子培养第41页
            3.3.1.4 发酵培养第41页
        3.3.2 分析方法第41页
            3.3.2.1 辅酶Q10的分析方法第41页
        3.3.3 种子母瓶培养时间的优化第41-42页
        3.3.4 发酵摇瓶实验第42页
            3.3.4.1 摇瓶装量对发酵结果的影响第42页
            3.3.4.2 培养温度对发酵结果的影响第42页
            3.3.4.3 摇床转速对发酵结果的影响第42页
            3.3.4.4 接种量对发酵结果的影响第42页
            3.3.4.5 pH对发酵结果的影响第42页
        3.3.5 碳源最佳浓度的确定第42-43页
        3.3.6 氮源最佳浓度确定第43页
            3.3.6.1 硫酸铵的优化第43页
            3.3.6.2 酵母抽提物的优化第43页
        3.3.7 无机盐优化第43-44页
            3.3.7.1 硫酸镁的优化第43页
            3.3.7.2 氯化钠的优化第43-44页
            3.3.7.3 硫酸亚铁的优化第44页
            3.3.7.4 磷酸二氢钾的优化第44页
    3.7 结果与讨论第44-50页
        3.7.1 种龄优化第44-45页
        3.7.2 装量对发酵的影响第45-46页
        3.7.3 温度对发酵的影响第46-47页
        3.7.4 转速对发酵的影响第47-48页
        3.7.5 接种量对发酵的影响第48-49页
        3.7.6 pH对发酵的影响第49-50页
    3.8 碳源对辅酶Q10的影响第50-51页
        3.8.1 不同浓度葡萄糖对发酵的影响第50-51页
    3.9 氮源对辅酶Q10的影响第51-52页
        3.9.1 硫酸铵不同浓度对发酵的影响第51页
        3.9.2 不同浓度酵母提取物对发酵的影响第51-52页
    3.10 无机盐的影响第52-56页
        3.10.1 不同浓度硫酸镁对发酵的影响第52-53页
        3.10.2 不同浓度硫酸亚铁对发酵的影响第53-54页
        3.10.3 不同浓度氯化钠对发酵的影响第54-55页
        3.10.4 不同浓度磷酸二氢钾对发酵的影响第55-56页
    3.11 本章小结第56-57页
第四章 辅酶Q10发酵工艺的优化与放大第57-76页
    4.1 引言第57页
    4.2 材料与方法第57-58页
        4.2.1 菌种第57页
        4.2.2 试剂与材料第57页
        4.2.3 仪器和设备第57-58页
        4.2.4 培养基第58页
    4.3 实验方法第58-61页
        4.3.1 发酵液OD660的检测第58页
        4.3.2 pH控制第58页
        4.3.3 发酵样品中还原糖浓度测定第58-60页
        4.3.4 发酵液氨基氮的测定第60页
        4.3.5 发酵样品磷浓度测定第60-61页
    4.4 结果与讨论第61-70页
        4.4.1 辅酶Q10分批发酵第61-63页
        4.4.2 发酵罐通气比优化第63-64页
        4.4.3 搅拌速度优化第64页
        4.4.4 补加葡萄糖对辅酶Q10效价的影响第64-66页
        4.4.5 补加新鲜培养基对辅酶Q10的影响第66-68页
        4.4.6 发酵培养基流加磷酸二氢钾浓度对辅酶Q10产量的影响第68-70页
    4.5 工艺操作优化第70-75页
        4.5.1 传统火焰接种法与压差接种法对辅酶Q10生产的影响第70-72页
        4.5.2 消毒方法的优化第72-75页
    4.7 本章小结第75-76页
第五章 结论与展望第76-78页
    5.1 结论第76-77页
    5.2 展望第77-78页
参考文献第78-85页
致谢第85页

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