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头孢喹肟特异性核酸适配体的筛选及其在食品检测中的应用

学位论文数据集第3-4页
摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 绪论第13-29页
    1.1 头孢喹肟及其残留危害第13-15页
        1.1.1 头孢喹肟概述第13-14页
        1.1.2 头孢喹肟残留的危害第14-15页
    1.2 核酸适配体及其性质第15-20页
        1.2.1 核酸适配体简介第15-18页
        1.2.2 核酸适配体的性质第18-20页
    1.3 抗生素残留的检测方法第20-21页
        1.3.1 微生物检测法第20页
        1.3.2 酶联免疫分析法第20页
        1.3.3 仪器分析法第20-21页
    1.4 核酸适配体传感器及其检测应用第21-26页
        1.4.1 基于电化学信号的核酸适配体传感器第21-23页
        1.4.2 基于荧光信号的核酸适配体传感器第23-24页
        1.4.3 基于化学发光的核酸适配体传感器第24-25页
        1.4.4 基于核酸适配体的比色法检测第25-26页
    1.5 本课题研究的内容及意义第26-29页
第二章 头孢喹肟特异性核酸适配体的筛选第29-41页
    2.1 实验试剂与仪器第29-31页
        2.1.1 随机ssDNA文库与引物第29页
        2.1.2 实验试剂第29-30页
        2.1.3 实验仪器第30-31页
    2.2 实验方法第31-35页
        2.2.1 CFQ与羧基磁珠的偶联第31-32页
        2.2.2 SELEX体外筛选第32-34页
        2.2.3 克隆、测序及序列分析第34页
        2.2.4 解离常数(Kd)的测定第34-35页
        2.2.5 头孢喹肟特异性分析第35页
    2.3 实验结果分析第35-40页
        2.3.1 CAP-base与羧基磁珠的偶联第35-36页
        2.3.2 SELEX体外筛选结果第36-38页
        2.3.3 克隆测序和二级结构分析结果第38页
        2.3.4 解离常数(Kd)的测定结果第38-40页
        2.3.5 特异性实验结果第40页
    2.4 本章小结第40-41页
第三章 荧光核酸适配体传感器的构建及其在头孢喹肟残留检测中的应用第41-53页
    3.1 实验材料与设备第41-43页
        3.1.1 设计的探针序列第41-42页
        3.1.2 实验试剂第42页
        3.1.3 仪器设备第42页
        3.1.4 主要缓冲液的配制第42-43页
    3.2 实验步骤第43-45页
        3.2.1 荧光核酸适配体传感器的构建第43页
        3.2.2 探针序列长度的优化第43-44页
        3.2.3 核酸适配体用量的优化第44页
        3.2.4 DNA和链霉亲和素磁珠结合时间的优化第44页
        3.2.5 检测反应时间的优化第44页
        3.2.6 模拟样品中头孢喹肟残留检测第44-45页
        3.2.7 核酸适配体传感器的特异性分析第45页
        3.2.8 牛奶中头孢喹肟残留的检测第45页
    3.3 实验结果与分析第45-52页
        3.3.1 荧光核酸适配体传感器的检测原理第45-46页
        3.3.2 探针长度的优化结果第46-47页
        3.3.3 核酸适配体浓度的优化结果第47-48页
        3.3.4 链霉亲和素磁珠与生物素DNA结合时间的优化结果第48-49页
        3.3.5 检测反应时间的优化结果第49页
        3.3.6 标准曲线的制定第49-50页
        3.3.7 检测限的确定第50页
        3.3.8 特异性分析第50-51页
        3.3.9 牛奶样品中头孢喹肟残留的检测第51-52页
    3.4 本章小结第52-53页
第四章 总结与展望第53-55页
    4.1 总结第53页
    4.2 展望第53-55页
参考文献第55-63页
附录第63-65页
致谢第65-67页
作者和导师简介第67-70页
专业学位硕士研究生学位论文答辩委员会决议书第70-71页

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