学位论文数据集 | 第3-4页 |
摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第13-29页 |
1.1 头孢喹肟及其残留危害 | 第13-15页 |
1.1.1 头孢喹肟概述 | 第13-14页 |
1.1.2 头孢喹肟残留的危害 | 第14-15页 |
1.2 核酸适配体及其性质 | 第15-20页 |
1.2.1 核酸适配体简介 | 第15-18页 |
1.2.2 核酸适配体的性质 | 第18-20页 |
1.3 抗生素残留的检测方法 | 第20-21页 |
1.3.1 微生物检测法 | 第20页 |
1.3.2 酶联免疫分析法 | 第20页 |
1.3.3 仪器分析法 | 第20-21页 |
1.4 核酸适配体传感器及其检测应用 | 第21-26页 |
1.4.1 基于电化学信号的核酸适配体传感器 | 第21-23页 |
1.4.2 基于荧光信号的核酸适配体传感器 | 第23-24页 |
1.4.3 基于化学发光的核酸适配体传感器 | 第24-25页 |
1.4.4 基于核酸适配体的比色法检测 | 第25-26页 |
1.5 本课题研究的内容及意义 | 第26-29页 |
第二章 头孢喹肟特异性核酸适配体的筛选 | 第29-41页 |
2.1 实验试剂与仪器 | 第29-31页 |
2.1.1 随机ssDNA文库与引物 | 第29页 |
2.1.2 实验试剂 | 第29-30页 |
2.1.3 实验仪器 | 第30-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-35页 |
2.2.1 CFQ与羧基磁珠的偶联 | 第31-32页 |
2.2.2 SELEX体外筛选 | 第32-34页 |
2.2.3 克隆、测序及序列分析 | 第34页 |
2.2.4 解离常数(Kd)的测定 | 第34-35页 |
2.2.5 头孢喹肟特异性分析 | 第35页 |
2.3 实验结果分析 | 第35-40页 |
2.3.1 CAP-base与羧基磁珠的偶联 | 第35-36页 |
2.3.2 SELEX体外筛选结果 | 第36-38页 |
2.3.3 克隆测序和二级结构分析结果 | 第38页 |
2.3.4 解离常数(Kd)的测定结果 | 第38-40页 |
2.3.5 特异性实验结果 | 第40页 |
2.4 本章小结 | 第40-41页 |
第三章 荧光核酸适配体传感器的构建及其在头孢喹肟残留检测中的应用 | 第41-53页 |
3.1 实验材料与设备 | 第41-43页 |
3.1.1 设计的探针序列 | 第41-42页 |
3.1.2 实验试剂 | 第42页 |
3.1.3 仪器设备 | 第42页 |
3.1.4 主要缓冲液的配制 | 第42-43页 |
3.2 实验步骤 | 第43-45页 |
3.2.1 荧光核酸适配体传感器的构建 | 第43页 |
3.2.2 探针序列长度的优化 | 第43-44页 |
3.2.3 核酸适配体用量的优化 | 第44页 |
3.2.4 DNA和链霉亲和素磁珠结合时间的优化 | 第44页 |
3.2.5 检测反应时间的优化 | 第44页 |
3.2.6 模拟样品中头孢喹肟残留检测 | 第44-45页 |
3.2.7 核酸适配体传感器的特异性分析 | 第45页 |
3.2.8 牛奶中头孢喹肟残留的检测 | 第45页 |
3.3 实验结果与分析 | 第45-52页 |
3.3.1 荧光核酸适配体传感器的检测原理 | 第45-46页 |
3.3.2 探针长度的优化结果 | 第46-47页 |
3.3.3 核酸适配体浓度的优化结果 | 第47-48页 |
3.3.4 链霉亲和素磁珠与生物素DNA结合时间的优化结果 | 第48-49页 |
3.3.5 检测反应时间的优化结果 | 第49页 |
3.3.6 标准曲线的制定 | 第49-50页 |
3.3.7 检测限的确定 | 第50页 |
3.3.8 特异性分析 | 第50-51页 |
3.3.9 牛奶样品中头孢喹肟残留的检测 | 第51-52页 |
3.4 本章小结 | 第52-53页 |
第四章 总结与展望 | 第53-55页 |
4.1 总结 | 第53页 |
4.2 展望 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
附录 | 第63-65页 |
致谢 | 第65-67页 |
作者和导师简介 | 第67-70页 |
专业学位硕士研究生学位论文答辩委员会决议书 | 第70-71页 |