附件 | 第3-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
目录 | 第12-15页 |
英文缩略语索引 | 第15-17页 |
第一章 绪论 | 第17-33页 |
1.1 副溶血性弧菌 | 第17-18页 |
1.1.1 形态特征 | 第17页 |
1.1.2 培养特性 | 第17-18页 |
1.2 副溶血性弧菌引起食物中毒的临床症状 | 第18-19页 |
1.3 副溶血性弧菌在食品中的分布 | 第19页 |
1.4 牡蛎与副溶血性弧菌 | 第19-20页 |
1.5 副溶血性弧菌检测方法 | 第20-24页 |
1.5.1 国家标准方法 | 第20-22页 |
1.5.2 选择性培养基 | 第22页 |
1.5.3 PCR 方法 | 第22-23页 |
1.5.4 环介导等温扩增技术 | 第23页 |
1.5.5 免疫磁珠法 | 第23-24页 |
1.6 副溶血性弧菌的致病因子 | 第24-26页 |
1.6.1 溶血素 | 第24-25页 |
1.6.2 尿素酶 | 第25页 |
1.6.3 脂多糖 | 第25-26页 |
1.6.4 三型分泌系统 | 第26页 |
1.7 细菌分型方法及其研究进展 | 第26-30页 |
1.7.1 血清型分型方法 | 第27页 |
1.7.2 多基因位点分型技术(MLST) | 第27-28页 |
1.7.3 凝胶脉冲电泳技术(PFGE) | 第28页 |
1.7.4 肠道菌重复性基因内一致性序列(ERIC-PCR) | 第28-29页 |
1.7.5 核糖体分型(RT) | 第29页 |
1.7.6 随机扩增多态性分析 | 第29-30页 |
1.8 副溶血性弧菌与食品安全 | 第30-31页 |
1.9 本研究课题的目的与意义 | 第31-33页 |
第二章 副溶血性弧菌的分离和计数 | 第33-41页 |
2.1 材料 | 第33-36页 |
2.1.1 食品样品 | 第33-34页 |
2.1.2 主要培养基 | 第34-35页 |
2.1.3 主要试剂 | 第35页 |
2.1.4 主要仪器和设备 | 第35-36页 |
2.2 实验方法 | 第36-38页 |
2.2.1 副溶血性弧菌的分离 | 第36页 |
2.2.2 稀释平板菌落计数法 | 第36-37页 |
2.2.3 菌株保藏 | 第37-38页 |
2.2.4 数据分析软件 Origin.8.0 作图 | 第38页 |
2.3 实验结果 | 第38-39页 |
2.4 分析与讨论 | 第39-41页 |
第三章 疑似副溶血性弧菌分离株的鉴定 | 第41-54页 |
3.1 材料 | 第41-43页 |
3.1.1 菌株 | 第41页 |
3.1.2 主要培养基 | 第41-42页 |
3.1.3 主要试剂 | 第42页 |
3.1.4 主要仪器和设备 | 第42-43页 |
3.2 实验方法 | 第43-48页 |
3.2.1 疑似菌株的活化 | 第43页 |
3.2.2 TCBS、CV 选择性培养基鉴定 | 第43页 |
3.2.3 生化鉴定 | 第43-46页 |
3.2.4 PCR 方法鉴定 | 第46-48页 |
3.3 实验结果 | 第48-52页 |
3.3.1 选择性培养基 | 第48-49页 |
3.3.2 生化试验鉴定 | 第49-50页 |
3.3.3 PCR 方法鉴定 | 第50页 |
3.3.4 105 株副溶血性弧菌在食品样品中的分布 | 第50-52页 |
3.4 分析与讨论 | 第52-54页 |
第四章 副溶血性弧菌分离株溶血毒素基因 tdh、trh 筛查 | 第54-60页 |
4.1 材料 | 第54-55页 |
4.1.1 菌株 | 第54页 |
4.1.2 主要培养基 | 第54页 |
4.1.3 主要试剂 | 第54-55页 |
4.1.4 主要仪器和设备 | 第55页 |
4.2 实验方法 | 第55-57页 |
4.2.1 待测菌株的活化 | 第55页 |
4.2.2 副溶血性弧菌模板 DNA 的提取及质量检测 | 第55-56页 |
4.2.3 副溶血性弧菌溶血毒素基因 tdh、trh 的 PCR 检测 | 第56-57页 |
4.3 实验结果 | 第57-58页 |
4.3.1 tdh 基因在 105 株副溶血性弧菌中的分布状况 | 第57-58页 |
4.3.2 trh 基因在 105 株副溶血性弧菌中的分布状况 | 第58页 |
4.4 分析与讨论 | 第58-60页 |
第五章 食源性副溶血性弧菌的 ERIC-PCR 分型 | 第60-67页 |
5.1 材料 | 第60-61页 |
5.1.1 菌株 | 第60页 |
5.1.2 主要培养基 | 第60页 |
5.1.3 主要试剂 | 第60-61页 |
5.1.4 主要仪器和设备 | 第61页 |
5.2 实验方法 | 第61-63页 |
5.2.1 目的菌株的活化 | 第61页 |
5.2.2 副溶血性弧菌模板 DNA 的提取及质量检测 | 第61页 |
5.2.3 副溶血性弧菌 ERIC-PCR 条件 | 第61-63页 |
5.2.4 ERIC-PCR 琼脂凝胶电泳图的拍照和分析 | 第63页 |
5.2.5 ERIC-PCR 分型方法分辨指数的计算 | 第63页 |
5.3 实验结果 | 第63-66页 |
5.3.1 部分样品的 ERIC-PCR 电泳图谱 | 第63-64页 |
5.3.2 105 株食源性副溶血性弧菌的进化关系图谱 | 第64-66页 |
5.4 分析与讨论 | 第66-67页 |
第六章 总结与展望 | 第67-69页 |
6.1 总结 | 第67-68页 |
6.2 展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-85页 |
致谢 | 第85-87页 |
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第87页 |