| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 单增李斯特菌概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 分类 | 第12页 |
| 1.1.2 流行病学及危害 | 第12-13页 |
| 1.1.3 单增李斯特菌的生物学特性 | 第13页 |
| 1.1.4 单增李斯特菌的抗原结构与血清型 | 第13-14页 |
| 1.2 单增李斯特菌检测方法研究进展 | 第14-19页 |
| 1.2.1 传统分离培养与鉴定方法 | 第14-15页 |
| 1.2.2 免疫学方法 | 第15-18页 |
| 1.2.3 分子生物学方法 | 第18-19页 |
| 1.3 研究的技术原理 | 第19-21页 |
| 1.3.1 免疫磁性分离技术 | 第19-20页 |
| 1.3.2 荧光定量免疫层析技术 | 第20-21页 |
| 1.4 研究的目的、意义和内容 | 第21-24页 |
| 1.4.1 本研究的目的及意义 | 第21-22页 |
| 1.4.2 研究的内容 | 第22-23页 |
| 1.4.3 技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 单增李斯特菌多克隆抗体的制备与鉴定 | 第24-39页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第24-29页 |
| 2.2.1 实验菌种与动物 | 第24-25页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第25页 |
| 2.2.3 主要仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.2.4 主要溶液及培养基的配制 | 第26-29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-33页 |
| 2.3.1 抗血清的制备 | 第29-31页 |
| 2.3.2 抗血清的纯化 | 第31-32页 |
| 2.3.3 SDS-PAGE 鉴定抗体纯度 | 第32页 |
| 2.3.4 Western-blots 分析 | 第32-33页 |
| 2.3.5 ELISA 测定抗体效价及特异性分析 | 第33页 |
| 2.4 结果与分析 | 第33-38页 |
| 2.4.1 单增李斯特菌在 PALCAM 培养基上的菌落形态观察 | 第33-34页 |
| 2.4.2 抗体产生进程 | 第34-35页 |
| 2.4.3 抗血清效价测定 | 第35页 |
| 2.4.4 纯化后多抗 SDS-PAGE 分析 | 第35-36页 |
| 2.4.5 多抗 Western-blots 分析 | 第36-37页 |
| 2.4.6 纯化抗体效价及特异性分析 | 第37-38页 |
| 2.5 本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 利用免疫磁珠技术富集单增李斯特菌 | 第39-53页 |
| 3.1 引言 | 第39页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第39-41页 |
| 3.2.1 实验菌种 | 第39页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第39-40页 |
| 3.2.3 主要仪器设备 | 第40-41页 |
| 3.2.4 主要溶液的配制 | 第41页 |
| 3.3 实验方法 | 第41-45页 |
| 3.3.1 BCA 法测定蛋白质浓度 | 第41-42页 |
| 3.3.2 磁珠性状分析 | 第42页 |
| 3.3.3 免疫磁珠的制备 | 第42-43页 |
| 3.3.4 磁珠与抗体蛋白反应条件的确定 | 第43-44页 |
| 3.3.5 免疫磁珠富集单增李斯特菌方法的建立 | 第44-45页 |
| 3.4 结果与分析 | 第45-52页 |
| 3.4.1 BCA 法测定标准曲线 | 第45页 |
| 3.4.2 磁珠性状分布 | 第45-46页 |
| 3.4.3 磁珠与抗体蛋白反应条件的确定 | 第46-50页 |
| 3.4.4 免疫磁珠富集单增李斯特菌方法的建立 | 第50-52页 |
| 3.5 本章小结 | 第52-53页 |
| 第四章 单增李斯特菌荧光免疫层析试纸条的制备及应用 | 第53-72页 |
| 4.1 引言 | 第53页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第53-55页 |
| 4.2.1 实验菌种 | 第53-54页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第54-55页 |
| 4.2.3 主要仪器设备 | 第55页 |
| 4.2.4 主要溶液 | 第55页 |
| 4.3 实验方法 | 第55-60页 |
| 4.3.1 电镜分析 | 第55-56页 |
| 4.3.2 荧光定量免疫层析试纸条的制备 | 第56-57页 |
| 4.3.3 荧光免疫层析平台抗体配对 | 第57页 |
| 4.3.4 荧光免疫层析试纸条工艺条件优化 | 第57-58页 |
| 4.3.5 荧光免疫层析试纸条性能测试 | 第58-59页 |
| 4.3.6 人工污染样本检测 | 第59-60页 |
| 4.4 结果与分析 | 第60-70页 |
| 4.4.1 荧光胶乳微球透射电镜图谱 | 第60页 |
| 4.4.2 荧光免疫层析平台抗体配对 | 第60-61页 |
| 4.4.3 荧光免疫层析试纸条工艺条件优化结果 | 第61-65页 |
| 4.4.4 荧光免疫层析试纸条性能分析 | 第65-70页 |
| 4.4.5 人工污染样本检测 | 第70页 |
| 4.5 本章小结 | 第70-72页 |
| 第五章 免疫磁珠与荧光免疫层析联合检测方法的建立 | 第72-81页 |
| 5.1 引言 | 第72页 |
| 5.2 实验材料与仪器 | 第72-74页 |
| 5.2.1 实验菌种 | 第72-73页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第73页 |
| 5.2.3 主要仪器设备 | 第73-74页 |
| 5.3 实验方法 | 第74-76页 |
| 5.3.1 免疫磁珠洗脱方式筛选 | 第74页 |
| 5.3.2 不同免疫磁珠洗脱效率比较 | 第74-75页 |
| 5.3.3 IMS- FICA 联合检测方法灵敏度分析 | 第75页 |
| 5.3.4 IMS- FICA 联合检测方法特异性分析 | 第75页 |
| 5.3.5 人工污染样本检测 | 第75-76页 |
| 5.4 结果与分析 | 第76-80页 |
| 5.4.1 免疫磁珠洗脱方式筛选 | 第76-77页 |
| 5.4.2 不同免疫磁珠洗脱效率比较 | 第77-78页 |
| 5.4.3 IMS- FICA 联合检测方法灵敏度分析 | 第78页 |
| 5.4.4 IMS- FICA 联合检测方法特异性分析 | 第78-79页 |
| 5.4.5 人工污染样本检测 | 第79-80页 |
| 5.5 本章小结 | 第80-81页 |
| 结论与展望 | 第81-84页 |
| 一、结论 | 第81-82页 |
| 二、本论文的主要创新点 | 第82页 |
| 三、展望 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 附件 | 第96页 |
