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钙调节聚谷氨酸合成通路中α-酮戊二酸代谢节点和聚谷氨酸合成酶的机制及Bacillus subtilis HSF1410基因组信息

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第一章 绪论第11-23页
    1.1 聚谷氨酸的理化性质第11-12页
    1.2 聚谷氨酸的应用第12页
    1.3 聚谷氨酸的合成第12-14页
        1.3.1 化学合成法第12-13页
        1.3.2 提取法制备γ-PGA第13页
        1.3.3 微生物提取法第13-14页
    1.4 聚谷氨酸的合成机制第14-17页
        1.4.1 聚谷氨酸产生菌的分类第14页
        1.4.2. 合成机理第14-17页
    1.5 聚谷氨酸的发酵调控第17-18页
    1.6 钙离子对于生物体的调控第18-19页
        1.6.1 钙离子在生理活动中的作用第18页
        1.6.2 钙离子对于聚谷氨酸发酵的调控作用第18-19页
    1.7 枯草芽孢杆菌(B.subtilis)基因组研究第19-21页
    1.8 本实验立题依据、研究内容及研究意义第21-23页
第二章 纳豆芽孢杆菌中α-酮戊二酸脱氢酶与聚谷氨酸合成酶的钙调节机制第23-49页
    2.1 引言第23-24页
    2.2 实验材料第24-27页
        2.2.1 菌株第24页
        2.2.2 培养基第24-25页
        2.2.3 主要实验试剂第25-26页
        2.2.4 储备液的配制第26-27页
        2.2.5 主要试验仪器与设备第27页
    2.3 实验方法第27-35页
        2.3.1 发酵条件与方法第27-28页
        2.3.2 粗酶液制备第28页
        2.3.3 总蛋白浓度测定第28-29页
        2.3.4 a-酮戊二酸脱氢酶(OGDH)活性测定第29-30页
        2.3.5 琼脂糖凝胶电泳第30-31页
        2.3.6 纳豆芽孢杆菌总RNA的提取第31-33页
        2.3.7 实时定量引物设计第33页
        2.3.8 实时定量PCR反应第33-34页
        2.3.9 生物量的测定第34页
        2.3.10 γ-PGA产量及NH_4Cl消耗量测定第34-35页
    2.4 实验结果第35-47页
        2.4.1 钙离子对α-酮戊二酸脱氢酶的体外调节作用第35-37页
        2.4.2 钙离子对α-酮戊二酸脱氢酶和聚谷氨酸合成酶的体内调节作用第37-44页
        2.4.3 钙离子在纳豆芽孢杆菌发酵γ-PGA过程中的影响第44-47页
            1. 钙离子对菌体生长的影响第44-45页
            2. 钙离子对γ-PGA产量的影响第45-46页
            3. 钙离子对发酵液中NH_4Cl消耗量影响第46-47页
    2.5 本章小结第47-49页
第三章 B.subtilis HSF1410全基因组信息第49-63页
    3.1 引言第49页
    3.2 实验材料第49页
    3.3 实验方法第49-51页
        3.3.1 细菌总DNA提取第49-50页
        3.3.2 全基因组测序第50页
        3.3.3 系统发育树的构建第50-51页
    3.4 实验结果第51-62页
        3.4.1 B.subtilis HSF1410的全基因组信息分析第51-59页
        3.4.2 聚谷氨酸产生菌分类研究第59-62页
    3.5 本章小结第62-63页
第四章 结论与展望第63-65页
参考文献第65-71页
附录第71-81页
致谢第81-83页
攻读硕士学位期间科研成果第83页

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