| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-24页 |
| 1.1 柠檬酸简介 | 第10-12页 |
| 1.1.1 柠檬酸的性质 | 第10-11页 |
| 1.1.2 柠檬酸的作用 | 第11-12页 |
| 1.2 黑曲霉发酵生产柠檬酸 | 第12-16页 |
| 1.2.1 黑曲霉生物合成柠檬酸的途径 | 第12-13页 |
| 1.2.2 黑曲霉发酵生产柠檬酸的研究现状 | 第13-16页 |
| 1.3 丝状真菌的形态控制 | 第16-21页 |
| 1.3.1 概述 | 第16-17页 |
| 1.3.2 培养环境 | 第17-19页 |
| 1.3.3 形态基因 | 第19-20页 |
| 1.3.4 RNA干扰(RNAi)在丝状真菌中的应用 | 第20-21页 |
| 1.4 本论文研究的背景与内容 | 第21-24页 |
| 第二章 几丁质合成酶基因的扩增与干扰载体的构建 | 第24-33页 |
| 2.1 材料与方法 | 第24-29页 |
| 2.1.1 材料 | 第24-27页 |
| 2.1.2 方法 | 第27-29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-32页 |
| 2.2.1 目的几丁质合成酶基因的确定 | 第29-30页 |
| 2.2.2 chsC基因片段的扩增 | 第30页 |
| 2.2.3 质粒载体的提取和酶切 | 第30-31页 |
| 2.2.4 干扰载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.3 小结 | 第32-33页 |
| 第三章 原生质体的制备、再生和转化体系的构建 | 第33-43页 |
| 3.1 材料与方法 | 第33-37页 |
| 3.1.1 材料 | 第33-35页 |
| 3.1.2 方法 | 第35-37页 |
| 3.2 结果与分析 | 第37-42页 |
| 3.2.1 不同酶组合对原生质体形成的影响 | 第37-38页 |
| 3.2.2 不同菌龄和酶解条件对原生质体形成的影响 | 第38-39页 |
| 3.2.3 酶解时间对原生质体制备和再生的影响 | 第39-40页 |
| 3.2.4 不同种类再生培养基对原生质体再生的影响 | 第40-41页 |
| 3.2.5 原生质体形成过程的形态观察 | 第41页 |
| 3.2.6 转化菌株的菌落形态观察 | 第41-42页 |
| 3.3 小结 | 第42-43页 |
| 第四章 chsC基因沉默对深层发酵过程中菌丝体形态和柠檬酸产量的影响 | 第43-56页 |
| 4.1 材料与方法 | 第43-50页 |
| 4.1.1 材料 | 第43-45页 |
| 4.1.2 方法 | 第45-50页 |
| 4.2 结果与分析 | 第50-54页 |
| 4.2.1 chsC基因沉默程度检测 | 第50-51页 |
| 4.2.2 chsC基因沉默对细胞壁几丁质含量的影响 | 第51-53页 |
| 4.2.3 chsC基因对菌株的柠檬酸产量的影响 | 第53页 |
| 4.2.4 菌株深层发酵的菌丝体形态观察 | 第53-54页 |
| 4.3 小结 | 第54-56页 |
| 第五章 柠檬酸高产菌株chsC-3发酵工艺优化的初步探究 | 第56-67页 |
| 5.1 材料与方法 | 第56-59页 |
| 5.1.1 材料 | 第56-57页 |
| 5.1.2 方法 | 第57-59页 |
| 5.2 结果与分析 | 第59-66页 |
| 5.2.1 不同装液量对产柠檬酸的影响 | 第59页 |
| 5.2.2 不同接种量对产柠檬酸的影响 | 第59-62页 |
| 5.2.3 不同摇床转速对产柠檬酸的影响 | 第62页 |
| 5.2.4 不同培养温度对产柠檬酸的影响 | 第62-63页 |
| 5.2.5 发酵过程产酸的变化 | 第63-64页 |
| 5.2.6 菌株的传代稳定性 | 第64页 |
| 5.2.7 发酵罐培养对菌体形态和柠檬酸产量的影响 | 第64-66页 |
| 5.3 小结 | 第66-67页 |
| 第六章 总结与展望 | 第67-69页 |
| 6.1 总结 | 第67-68页 |
| 6.2 展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第80页 |
