| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-24页 |
| 1.1 课题背景及研究目的和意义 | 第11-12页 |
| 1.2 LF 概述 | 第12-16页 |
| 1.2.1 LF 的含量及分布 | 第12-13页 |
| 1.2.2 LF 的分离纯化 | 第13-14页 |
| 1.2.3 LF 结构 | 第14-15页 |
| 1.2.4 LF 的理化特点 | 第15-16页 |
| 1.3 MAPK 信号转导通路 | 第16-18页 |
| 1.3.1 ERK1/2 亚通路 | 第16-17页 |
| 1.3.2 JNK/SAPK 亚通路 | 第17页 |
| 1.3.3 p38 MAPK 亚通路 | 第17-18页 |
| 1.3.4 ERK5 亚通路 | 第18页 |
| 1.4 LF 成骨作用研究进展 | 第18-21页 |
| 1.4.1 LF 对骨生长的作用 | 第18-19页 |
| 1.4.2 LF 对成骨细胞的作用 | 第19-20页 |
| 1.4.3 LF 对破骨细胞的作用 | 第20-21页 |
| 1.5 本课题主要研究内容 | 第21-24页 |
| 1.5.1 实验方案与技术路线 | 第21-22页 |
| 1.5.2 主要研究内容 | 第22-24页 |
| 第2章 材料和方法 | 第24-34页 |
| 2.1 材料及仪器 | 第24-26页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 牛乳中 LF 分离纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.1 牛乳 LF 粗品制备 | 第26页 |
| 2.2.2 LF 粗品纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.3 LF 分离纯化过程中纯化倍数及纯度测定 | 第27页 |
| 2.3 LF 成骨活性研究及热处理对其影响 | 第27-29页 |
| 2.3.1 成骨细胞提取与鉴定 | 第27-29页 |
| 2.3.2 LF 热处理参数确定 | 第29页 |
| 2.3.3 LF 对成骨细胞增殖作用影响及热处理对其影响研究 | 第29页 |
| 2.4 LF 对成骨细胞 MAPK 信号通路影响及热处理对其影响研究 | 第29-30页 |
| 2.5 测定方法 | 第30-33页 |
| 2.5.1 蛋白质浓度测定 | 第30-31页 |
| 2.5.2 SDS-PAGE | 第31-32页 |
| 2.5.3 MTT 实验 | 第32页 |
| 2.5.4 示差扫描量热法研究蛋白热变性 | 第32-33页 |
| 2.6 数据统计与分析 | 第33-34页 |
| 第3章 牛乳中 LF 分离纯化 | 第34-43页 |
| 3.1 牛乳 LF 粗品制备 | 第34-35页 |
| 3.2 LF 粗品纯化 | 第35-40页 |
| 3.2.1 超滤纯化 LF | 第35-36页 |
| 3.2.2 Superdex 200 层析纯化 LF | 第36-40页 |
| 3.3 LF 纯度测定 | 第40-41页 |
| 3.3.1 SDS-PAGE 检测 LF 样品 | 第40页 |
| 3.3.2 LF 样品蛋白浓度测定 | 第40-41页 |
| 3.4 本章小结 | 第41-43页 |
| 第4章 LF 成骨活性研究及热处理对其影响 | 第43-54页 |
| 4.1 成骨细胞的提取及鉴定 | 第43-46页 |
| 4.1.1 成骨细胞形态观察 | 第43-44页 |
| 4.1.2 HE 染色 | 第44页 |
| 4.1.3 成骨细胞碱性磷酸酶染色 | 第44-45页 |
| 4.1.4 成骨细胞矿化结节染色 | 第45-46页 |
| 4.2 LF 热处理参数确定 | 第46-47页 |
| 4.3 LF 对体外培养成骨细胞的影响及热处理对其影响研究 | 第47-52页 |
| 4.3.1 LF 对成骨细胞增殖作用影响 | 第47-49页 |
| 4.3.2 不同加热处理 LF 对成骨细胞增殖作用影响 | 第49-52页 |
| 4.3.3 不同加热处理 LF 对成骨细胞增殖作用比较 | 第52页 |
| 4.4 本章小结 | 第52-54页 |
| 第5章 LF 对成骨细胞 MAPK 信号通路影响及热处理对其影响研究 | 第54-68页 |
| 5.1 LF 对 ERK1/2 亚通路影响及热处理对其影响研究 | 第54-58页 |
| 5.2 LF 对P38 MAPK亚通路影响及热处理对其影响研究 | 第58-63页 |
| 5.3 LF 对 JNK 亚通路影响及热处理对其影响研究 | 第63-67页 |
| 5.4 本章小结 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
