摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-13页 |
1.1 细菌荚膜多糖 | 第8-9页 |
1.1.1 荚膜多糖的主要成分及结构特征 | 第8页 |
1.1.2 细菌荚膜多糖的合成途径 | 第8页 |
1.1.3 细菌荚膜多糖的性质 | 第8页 |
1.1.4 外界环境对荚膜多糖合成的影响 | 第8-9页 |
1.2 克雷伯氏菌荚膜多糖的研究 | 第9-11页 |
1.2.1 克雷伯氏菌荚膜多糖的合成途径 | 第9-10页 |
1.2.2 克雷伯氏菌荚膜多糖的转录调节 | 第10-11页 |
1.2.3 克雷伯氏菌荚膜多糖合成及其毒力的研究进展 | 第11页 |
1.3 本课题的立题意义与研究内容 | 第11-13页 |
1.3.1 立题意义 | 第11-12页 |
1.3.2 主要研究内容 | 第12-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-22页 |
2.1 实验材料 | 第13-14页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第13页 |
2.1.2 主要试剂 | 第13-14页 |
2.1.3 培养基 | 第14页 |
2.1.4 实验仪器 | 第14页 |
2.2 实验方法 | 第14-22页 |
2.2.1 培养方法 | 第14-15页 |
2.2.2 提取克雷伯氏菌基因组的方法 | 第15页 |
2.2.3 引物设计及PCR扩增 | 第15-17页 |
2.2.4 PCR产物胶回收及pMD19-T载体连接 | 第17页 |
2.2.5 酶切与表达载体连接的体系 | 第17页 |
2.2.6 制备克雷伯氏菌电转感受态的方法 | 第17页 |
2.2.7 克雷伯氏菌电转化的方法 | 第17-18页 |
2.2.8 缺失菌的构建方法 | 第18页 |
2.2.9 菌株荚膜多糖的提取方法 | 第18页 |
2.2.10 菌株荚膜多糖的测定方法 | 第18-19页 |
2.2.11 菌株形态观察 | 第19页 |
2.2.12 间接测定发酵液粘度的方法 | 第19页 |
2.2.13 生物量的测定 | 第19页 |
2.2.14 代谢产物的测定 | 第19页 |
2.2.15 克雷伯氏菌总RNA的提取 | 第19-20页 |
2.2.16 目的基因和内参基因的qRT-PCR引物设计 | 第20页 |
2.2.17 去基因组DNA | 第20页 |
2.2.18 逆转录获得cDNA | 第20-21页 |
2.2.19 qRT-PCR方法 | 第21-22页 |
第三章 结果与讨论 | 第22-40页 |
3.1 过表达转录抑制因子lon基因对菌株表型及合成 1,3-丙二醇的影响 | 第22-26页 |
3.1.1 转录抑制因子lon基因过表达菌株的构建 | 第22-24页 |
3.1.2 转录抑制因子lon基因过表达对菌株表型的影响 | 第24页 |
3.1.3 lon基因过表达对菌体代谢的影响 | 第24-26页 |
3.2 荚膜多糖缺失菌构建及表型和 1,3-丙二醇发酵性能评价 | 第26-36页 |
3.2.1 单基因缺失菌构建及表型和 1,3-丙二醇发酵性能影响 | 第26-31页 |
3.2.2 双基因缺失菌构建及表型和 1,3-丙二醇发酵性能分析 | 第31-36页 |
3.3 lon基因过表达对缺失菌 1,3-丙二醇合成及表型分析 | 第36-40页 |
3.3.1 缺失菌过表达lon基因的表型分析 | 第36-37页 |
3.3.2 lon基因过表达对缺失菌合成 1,3-丙二醇的影响 | 第37-40页 |
主要结论与展望 | 第40-41页 |
主要结论 | 第40页 |
展望 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
附录:作者在攻读硕士期间发表的论文 | 第46页 |