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产1,3-丙二醇克雷伯氏菌荚膜多糖合成弱化研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第8-13页
    1.1 细菌荚膜多糖第8-9页
        1.1.1 荚膜多糖的主要成分及结构特征第8页
        1.1.2 细菌荚膜多糖的合成途径第8页
        1.1.3 细菌荚膜多糖的性质第8页
        1.1.4 外界环境对荚膜多糖合成的影响第8-9页
    1.2 克雷伯氏菌荚膜多糖的研究第9-11页
        1.2.1 克雷伯氏菌荚膜多糖的合成途径第9-10页
        1.2.2 克雷伯氏菌荚膜多糖的转录调节第10-11页
        1.2.3 克雷伯氏菌荚膜多糖合成及其毒力的研究进展第11页
    1.3 本课题的立题意义与研究内容第11-13页
        1.3.1 立题意义第11-12页
        1.3.2 主要研究内容第12-13页
第二章 材料与方法第13-22页
    2.1 实验材料第13-14页
        2.1.1 菌株与质粒第13页
        2.1.2 主要试剂第13-14页
        2.1.3 培养基第14页
        2.1.4 实验仪器第14页
    2.2 实验方法第14-22页
        2.2.1 培养方法第14-15页
        2.2.2 提取克雷伯氏菌基因组的方法第15页
        2.2.3 引物设计及PCR扩增第15-17页
        2.2.4 PCR产物胶回收及pMD19-T载体连接第17页
        2.2.5 酶切与表达载体连接的体系第17页
        2.2.6 制备克雷伯氏菌电转感受态的方法第17页
        2.2.7 克雷伯氏菌电转化的方法第17-18页
        2.2.8 缺失菌的构建方法第18页
        2.2.9 菌株荚膜多糖的提取方法第18页
        2.2.10 菌株荚膜多糖的测定方法第18-19页
        2.2.11 菌株形态观察第19页
        2.2.12 间接测定发酵液粘度的方法第19页
        2.2.13 生物量的测定第19页
        2.2.14 代谢产物的测定第19页
        2.2.15 克雷伯氏菌总RNA的提取第19-20页
        2.2.16 目的基因和内参基因的qRT-PCR引物设计第20页
        2.2.17 去基因组DNA第20页
        2.2.18 逆转录获得cDNA第20-21页
        2.2.19 qRT-PCR方法第21-22页
第三章 结果与讨论第22-40页
    3.1 过表达转录抑制因子lon基因对菌株表型及合成 1,3-丙二醇的影响第22-26页
        3.1.1 转录抑制因子lon基因过表达菌株的构建第22-24页
        3.1.2 转录抑制因子lon基因过表达对菌株表型的影响第24页
        3.1.3 lon基因过表达对菌体代谢的影响第24-26页
    3.2 荚膜多糖缺失菌构建及表型和 1,3-丙二醇发酵性能评价第26-36页
        3.2.1 单基因缺失菌构建及表型和 1,3-丙二醇发酵性能影响第26-31页
        3.2.2 双基因缺失菌构建及表型和 1,3-丙二醇发酵性能分析第31-36页
    3.3 lon基因过表达对缺失菌 1,3-丙二醇合成及表型分析第36-40页
        3.3.1 缺失菌过表达lon基因的表型分析第36-37页
        3.3.2 lon基因过表达对缺失菌合成 1,3-丙二醇的影响第37-40页
主要结论与展望第40-41页
    主要结论第40页
    展望第40-41页
致谢第41-42页
参考文献第42-46页
附录:作者在攻读硕士期间发表的论文第46页

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