| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-13页 |
| 1.1 甘油的应用可行性及优势 | 第8页 |
| 1.2 甘油分解代谢的研究 | 第8-10页 |
| 1.2.1 微生物利用甘油 | 第8-9页 |
| 1.2.2 酵母细胞中甘油的分解代谢途径 | 第9-10页 |
| 1.3 木糖醇的应用及生产现状 | 第10-11页 |
| 1.3.1 木糖醇的应用价值 | 第10页 |
| 1.3.2 木糖醇的生产方法 | 第10-11页 |
| 1.3.3 木糖醇的研究现状 | 第11页 |
| 1.4 本课题的研究意义和研究内容 | 第11-13页 |
| 1.4.1 研究意义 | 第11页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第11-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-21页 |
| 2.1 材料 | 第13-15页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第13-14页 |
| 2.1.2 主要试剂及药品 | 第14页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第14页 |
| 2.1.4 培养基 | 第14-15页 |
| 2.2 方法 | 第15-21页 |
| 2.2.1 酵母基因组DNA的提取 | 第15页 |
| 2.2.2 引物的设计 | 第15-17页 |
| 2.2.3 重组质粒的构建 | 第17页 |
| 2.2.4 酵母感受态细胞的制备与转化 | 第17页 |
| 2.2.5 缺失菌C. g dak?对DHA的敏感性实验 | 第17页 |
| 2.2.6 酵母细胞总RNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.2.7 酵母总RNA去除基因组DNA | 第18页 |
| 2.2.8 逆转录反应 | 第18-19页 |
| 2.2.9 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第19页 |
| 2.2.10 酶活测定 | 第19-20页 |
| 2.2.11 培养方法 | 第20页 |
| 2.2.12 生物量测定 | 第20页 |
| 2.2.13 代谢物测定 | 第20-21页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第21-42页 |
| 3.1 C. glycerinogenes利用甘油的性能及中心代谢途径偏转分析 | 第21-26页 |
| 3.1.1 C. glycerinogenes以甘油为唯一碳源的发酵性能 | 第21页 |
| 3.1.2 C. glycerinogenes以甘油为共底物的发酵性能 | 第21-22页 |
| 3.1.3 甘油分解代谢途径预测基因CgGCY1、CgGCY2、CgDAK的获得与分析 | 第22-25页 |
| 3.1.4 C. glycerinogenes以甘油为唯一碳源中心代谢途径解析 | 第25-26页 |
| 3.2 C. glycerinogenes甘油分解代谢途径解析 | 第26-35页 |
| 3.2.1 甘油分解代谢关键基因敲除盒及表达载体的构建 | 第26-29页 |
| 3.2.2 同源重组敲除C. glycerinogenes甘油分解代谢关键基因 | 第29-33页 |
| 3.2.3 关键代谢基因CgGCY1、CgGCY2、CgDAK的功能分析 | 第33-35页 |
| 3.3 基于甘油分解代谢途径的木糖醇合成途径改造 | 第35-42页 |
| 3.3.1 基因CgGCY1、CgGCY2和CgDAK在C. glycerinogenes中过表达 | 第35-38页 |
| 3.3.2 同源重组敲除C. glycerinogenes CgXYL2基因 | 第38-39页 |
| 3.3.3 基因CgGCY1、CgGCY2和CgDAK在C. g xyl2?中过表达 | 第39-40页 |
| 3.3.4 重组菌的发酵性能 | 第40-42页 |
| 主要结论与展望 | 第42-43页 |
| 主要结论 | 第42页 |
| 展望 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录：作者在攻读硕士期间发表的论文 | 第49页 |
