| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| 1.1 1,3-丙二醇概况 | 第8-9页 |
| 1.1.1 1,3-丙二醇性质及应用 | 第8页 |
| 1.1.2 化学法生产 1,3-丙二醇 | 第8页 |
| 1.1.3 生物法生产 1,3-丙二醇 | 第8-9页 |
| 1.2 K. pneumoniae工程改造提高 1,3-丙二醇合成 | 第9-12页 |
| 1.2.1 K. pneumoniae中甘油代谢途径 | 第9-10页 |
| 1.2.2 副产物合成途径弱化研究 | 第10-11页 |
| 1.2.3 K. pneumoniae中还原力再生研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3 中心代谢的溶氧调控机制研究 | 第12-13页 |
| 1.3.1 细胞对环境溶氧变化的感知方式 | 第12页 |
| 1.3.2 基于溶氧调控系统的TCA循环改造及应用 | 第12-13页 |
| 1.4 PTS系统概况 | 第13-16页 |
| 1.4.1 PTS系统糖转运机制 | 第13-14页 |
| 1.4.2 PTS系统碳代谢调控机制 | 第14-15页 |
| 1.4.3 PTS系统在代谢工程中的应用 | 第15-16页 |
| 1.5 论文研究意义和内容 | 第16-17页 |
| 1.5.1 研究意义 | 第16页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-24页 |
| 2.1 材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 试剂与酶 | 第17-18页 |
| 2.1.3 培养基 | 第18页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第18页 |
| 2.2 方法 | 第18-24页 |
| 2.2.1 培养方法 | 第18-19页 |
| 2.2.2 检测方法 | 第19页 |
| 2.2.3 基因克隆及质粒构建 | 第19页 |
| 2.2.4 基因敲除引物设计 | 第19-20页 |
| 2.2.5 K. pneumoniae基因敲除 | 第20-21页 |
| 2.2.6 qRT-PCR引物的设计与合成 | 第21-22页 |
| 2.2.7 细菌总RNA的提取 | 第22页 |
| 2.2.8 去除基因组DNA | 第22页 |
| 2.2.9 逆转录合成cDNA | 第22-23页 |
| 2.2.10 qRT-PCR方法 | 第23-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-44页 |
| 3.1 副产物合成途径弱化提高 1,3-丙二醇合成 | 第24-33页 |
| 3.1.1 K. pneumoniae基因敲除系统优化 | 第24-25页 |
| 3.1.2 乙酸合成途径弱化提高 1,3-丙二醇发酵性能 | 第25-28页 |
| 3.1.3 乳酸合成途径基因敲除提高 1,3-丙二醇转化 | 第28-29页 |
| 3.1.4 2,3-丁二醇合成途径基因敲除对 1,3-丙二醇合成的影响 | 第29-31页 |
| 3.1.5 乙酸和乳酸合成途径基因共敲除提高 1,3-丙二醇的合成 | 第31-33页 |
| 3.2 基于微氧下TCA途径NADH合成强化 1,3-丙二醇合成 | 第33-38页 |
| 3.2.1 arcA缺失株构建 | 第33-35页 |
| 3.2.2 arcA基因敲除提高微氧下TCA循环及细胞呼吸活力 | 第35-36页 |
| 3.2.3 arcA基因敲除对细胞生长的影响 | 第36-37页 |
| 3.2.4 arcA缺失株发酵性能评价 | 第37-38页 |
| 3.3 PTS系统改造促进 1,3-丙二醇合成 | 第38-44页 |
| 3.3.1 PTS系统中ptsG、crr基因敲除 | 第38-39页 |
| 3.3.2 ptsG和crr基因敲除对细胞生长的影响 | 第39页 |
| 3.3.3 ptsG和crr基因敲除对 1,3-丙二醇合成的影响 | 第39-41页 |
| 3.3.4 K. pneumoniae ΔldhAΔpoxBΔpta-ackΔarcAΔcrr的构建及发酵性能分析 | 第41-44页 |
| 主要结论与展望 | 第44-45页 |
| 主要结论 | 第44页 |
| 展望 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录一：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51-52页 |
| 附录二：研究所用菌株 | 第52页 |
