| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-16页 |
| 0 前言 | 第16-30页 |
| ·过敏原标准化研究进展 | 第16-22页 |
| ·标准化提取物的历史回顾及流行病学 | 第16-17页 |
| ·材料的收集 | 第17-18页 |
| ·虾过敏原的表征 | 第18-20页 |
| ·过敏原量化的研究进展 | 第20-22页 |
| ·过敏原标准化存在的问题及展望 | 第22-23页 |
| ·研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| ·研究目标、内容、技术路线 | 第24-25页 |
| ·研究目标 | 第24页 |
| ·研究内容 | 第24-25页 |
| ·技术路线 | 第25页 |
| 参考文献 | 第25-30页 |
| 第一部分 过敏原提取物规范化提取程序的建立 | 第30-60页 |
| 1 虾过敏原提取物抽提方法的研究 | 第30-48页 |
| ·引言 | 第30页 |
| ·实验材料和方法 | 第30-39页 |
| ·材料与试剂 | 第30-31页 |
| ·仪器 | 第31-32页 |
| ·溶液体系 | 第32-34页 |
| ·实验方法 | 第34-39页 |
| ·虾的丙酮粉的制备 | 第34页 |
| ·过敏原蛋白质的抽提 | 第34-35页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第35-36页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳检测蛋白质组成 | 第36-37页 |
| ·间接ELISA检测蛋白中原肌球蛋白的过敏原性 | 第37-38页 |
| ·免疫印迹法检测过敏原成分 | 第38-39页 |
| ·统计学处理 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-45页 |
| ·不同提取液抽提的过敏原提取物的蛋白浓度 | 第39-40页 |
| ·不同提取液抽提的过敏原提取物蛋白的组成 | 第40-42页 |
| ·间接ELISA对抽提蛋白中原肌球蛋白过敏原性的分析 | 第42-43页 |
| ·加入DTT的提取液抽提蛋白的免疫印迹 | 第43-45页 |
| ·结论和讨论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
| 2 不同品种虾类过敏原提取物免疫原性的研究 | 第48-60页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·实验材料和方法 | 第48-51页 |
| ·材料与试剂 | 第48页 |
| ·仪器 | 第48-49页 |
| ·溶液体系 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·丙酮粉的制备 | 第49页 |
| ·过敏原蛋白质的抽提 | 第49页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第49-50页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳检测蛋白质组成 | 第50页 |
| ·间接ELISA检测蛋白中原肌球蛋白的过敏原性 | 第50页 |
| ·免疫印迹法检测过敏原成分 | 第50-51页 |
| ·数据处理 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-56页 |
| ·不同虾类抽提蛋白的组成 | 第51-52页 |
| ·不同虾类抽提蛋白的免疫活性 | 第52-54页 |
| ·不同虾类原肌球蛋白的免疫活性 | 第54-56页 |
| ·结论与讨论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 第二部分 过敏原提取物活性影响因素的研究 | 第60-93页 |
| 3 储存温度对虾过敏原提取物过敏性的影响 | 第60-68页 |
| ·引言 | 第60页 |
| ·实验材料和方法 | 第60-62页 |
| ·材料与试剂 | 第60页 |
| ·仪器 | 第60页 |
| ·溶液体系 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-62页 |
| ·虾过敏原丙酮粉的制备 | 第60页 |
| ·过敏原蛋白质的抽提 | 第60页 |
| ·二喹啉甲酸法(BCA法)测定蛋白浓度 | 第60-61页 |
| ·还原不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第61页 |
| ·间接酶联免疫吸附法（ELISA） | 第61-62页 |
| ·数据处理 | 第62页 |
| ·结果 | 第62-65页 |
| ·虾过敏原提取物的蛋白浓度变化 | 第62-63页 |
| ·虾过敏原提取物组成的变化 | 第63-64页 |
| ·虾过敏原提取物与IgG的结合能力的变化 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 4 冻融循环过程中虾过敏原提取物的免疫原性变化 | 第68-76页 |
| ·引言 | 第68页 |
| ·实验材料和方法 | 第68-70页 |
| ·材料与试剂 | 第68页 |
| ·实验仪器 | 第68页 |
| ·溶液体系 | 第68页 |
| ·实验方法 | 第68-70页 |
| ·虾过敏原丙酮粉的制备 | 第68页 |
| ·过敏原蛋白质的抽提 | 第68页 |
| ·虾过敏原提取物的冻融处理 | 第68-69页 |
| ·二喹啉甲酸法（BCA法）测定蛋白浓度 | 第69页 |
| ·还原不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第69页 |
| ·间接酶联免疫吸附法（Indirect ELISA） | 第69-70页 |
| ·免疫印迹（Western-blotting） | 第70页 |
| ·数据处理 | 第70页 |
| ·结果与分析 | 第70-74页 |
| ·冻融过程中虾过敏原提取物浓度的变化 | 第70-71页 |
| ·冻融循环过程中虾过敏原提取物组成的变化 | 第71-72页 |
| ·冻融循环过程中虾过敏原提取物与IgG结合能力的变化 | 第72-74页 |
| ·结论与讨论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-76页 |
| 5 抗冻剂的使用对虾过敏原提取物耐储性的影响 | 第76-93页 |
| ·引言 | 第76-77页 |
| ·实验材料和方法 | 第77-79页 |
| ·材料与试剂 | 第77页 |
| ·实验仪器 | 第77页 |
| ·溶液体系 | 第77页 |
| ·实验方法 | 第77-79页 |
| ·虾过敏原丙酮粉的制备 | 第77-78页 |
| ·过敏原蛋白质的抽提 | 第78页 |
| ·虾过敏原提取物的处理方法 | 第78页 |
| ·二喹啉甲酸法（BCA法）测定蛋白浓度 | 第78-79页 |
| ·还原不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第79页 |
| ·间接酶联免疫吸附法（Indirect ELISA） | 第79页 |
| ·数据处理 | 第79页 |
| ·结果与分析 | 第79-90页 |
| ·虾过敏原提取物蛋白浓度的变化 | 第79-84页 |
| ·加入抗冻剂的虾过敏原提取物在储藏过程中的组成变化 | 第84-87页 |
| ·加入抗冻剂的虾过敏原提取物在储藏过程中的间ELISA | 第87-90页 |
| ·结论与讨论 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-93页 |
| 第三部分 虾过敏原提取物表征方法的确立 | 第93-120页 |
| 6 抗酶解能力表征虾过敏原提取物的研究 | 第93-105页 |
| ·引言 | 第93页 |
| ·实验材料和方法 | 第93-96页 |
| ·材料与试剂 | 第93-94页 |
| ·仪器 | 第94页 |
| ·溶液体系 | 第94页 |
| ·实验方法 | 第94-96页 |
| ·胃蛋白酶活力的测定 | 第94-95页 |
| ·体外模拟虾蛋白抽提物酶解实验 | 第95页 |
| ·还原不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第95-96页 |
| ·免疫印迹法检测过敏原活性 | 第96页 |
| ·结果与分析 | 第96-102页 |
| ·SGF消化不同虾品种过敏原提取物的SDS-PAGE凝胶电泳 | 第96-98页 |
| ·SGF消化不同提取液抽提虾蛋白的SDS-PAGE凝胶电泳 | 第98-100页 |
| ·SGF消化不同虾品种过敏原提取物后的免疫印迹 | 第100-101页 |
| ·SGF消化不同提取液抽提的虾蛋白提取物的免疫印迹 | 第101-102页 |
| ·结论与讨论 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-105页 |
| 7 RBL-2H3 细胞释放β-己糖胺酶表征虾过敏原提取物的研究 | 第105-120页 |
| ·引言 | 第105页 |
| ·实验材料和方法 | 第105-112页 |
| ·材料与试剂 | 第105-106页 |
| ·仪器 | 第106-107页 |
| ·溶液体系 | 第107-108页 |
| ·实验方法 | 第108-112页 |
| ·RBL-2H3 细胞的传代培养 | 第108-109页 |
| ·细胞的冻存 | 第109页 |
| ·细胞处理与培养 | 第109-110页 |
| ·β-己糖胺酶标准曲线的测定 | 第110-111页 |
| ·虾蛋白抽提物浓度对RBL-2H3 释放β-己糖胺酶的影响规律96 | 第111页 |
| ·不同虾类过敏原提取物激发RBL-2H3 释放β-己糖胺酶 | 第111页 |
| ·以β-己糖胺酶表征虾过敏原抽提物过敏原性的验证 | 第111-112页 |
| ·统计学处理 | 第112页 |
| ·结果与分析 | 第112-117页 |
| ·虾过敏原抽提物浓度对RBL-2H3 释放β-己糖胺酶的影响规律 | 第112-114页 |
| ·不同虾类过敏原提取激发RBL-2H3 释放β-己糖胺酶 | 第114-116页 |
| ·过敏原提取物激发RBL-2H3 释放β-己糖胺酶表示过敏原活性的方法 101 | 第116-117页 |
| ·结论与讨论 | 第117-118页 |
| 参考文献 | 第118-120页 |
| 本研究的主要成果 | 第120-122页 |
| 论文的创新性及展望 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 个人简历 | 第124页 |
| 发表的学术论文 | 第124页 |
