| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 1 绪论 | 第9-27页 |
| 1.1 木质纤维素生物转化及纤维素酶 | 第9-13页 |
| 1.1.1 木质纤维素生物转化及纤维素酶 | 第9-12页 |
| 1.1.2 纤维素酶的组成、分类及功能 | 第12-13页 |
| 1.2 异源蛋白在酿酒酵母中的表达和分泌 | 第13-22页 |
| 1.2.1 酿酒酵母蛋白分泌途径 | 第13-18页 |
| 1.2.2 异源蛋白在酿酒酵母中的表达研究及其优化策略 | 第18-22页 |
| 1.3 本课题研究涉及的靶点基因 | 第22-25页 |
| 1.3.1 MDG1基因功能相关研究 | 第24-25页 |
| 1.3.2 MHF1基因功能相关研究 | 第25页 |
| 1.4 本研究的目的意义和技术路线 | 第25-27页 |
| 2 MDG1基因过表达对重组酵母分泌纤维素酶的影响 | 第27-51页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 实验材料 | 第27-29页 |
| 2.2.1 实验相关仪器设备 | 第27页 |
| 2.2.2 实验菌株 | 第27-28页 |
| 2.2.3 实验相关试剂 | 第28-29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-37页 |
| 2.3.1 过表达载体的构建 | 第29-33页 |
| 2.3.2 过表达菌株的构建与活化 | 第33-35页 |
| 2.3.3 菌株酶活评价 | 第35页 |
| 2.3.4 RNA提取及实时定量分析 | 第35页 |
| 2.3.5 细胞膜透性评价方法 | 第35-36页 |
| 2.3.6 细胞壁完整性评价方法 | 第36页 |
| 2.3.7 细胞形态观察 | 第36页 |
| 2.3.8 总麦角甾醇含量的测定 | 第36页 |
| 2.3.9 SDS-PAGE分析 | 第36-37页 |
| 2.3.10 耐性平板比较实验 | 第37页 |
| 2.4 实验结果 | 第37-49页 |
| 2.4.1 MDG1过表达菌株构建 | 第37-39页 |
| 2.4.2 MDG1过表达提高了酿酒酵母中纤维素酶的产量 | 第39-43页 |
| 2.4.3 MDG1过表达影响参与分泌途径相关基因的表达 | 第43-45页 |
| 2.4.4 MDG1过表达改变了宿主细胞的形态 | 第45-46页 |
| 2.4.5 MDG1过表达改变了质膜和细胞壁的特性 | 第46-48页 |
| 2.4.6 MDG1过表达菌株内质网胁迫应答表征 | 第48-49页 |
| 2.5 讨论 | 第49-50页 |
| 2.6 本章小结 | 第50-51页 |
| 3 MHF1基因过表达对重组酵母分泌纤维素酶的影响 | 第51-62页 |
| 3.1 引言 | 第51页 |
| 3.2 实验材料 | 第51-52页 |
| 3.2.1 实验相关仪器设备 | 第51页 |
| 3.2.2 实验菌株 | 第51-52页 |
| 3.2.3 实验相关试剂 | 第52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52页 |
| 3.3.1 菌株构建与活化 | 第52页 |
| 3.3.2 菌株酶活评价 | 第52页 |
| 3.3.3 RNA提取及实时定量分析 | 第52页 |
| 3.3.4 SDS-PAGE分析 | 第52页 |
| 3.3.5 胞内活性氧水平检测 | 第52页 |
| 3.4 实验结果 | 第52-60页 |
| 3.4.1 MHF1过表达菌株构建 | 第52-54页 |
| 3.4.2 MHF1过表达对重组酵母菌株酶活的影响 | 第54-57页 |
| 3.4.3 MHF1过表达对重组酵母胞内活性氧水平的影响 | 第57-58页 |
| 3.4.4 MHF1过表达对重组酵母关键基因转录的影响 | 第58页 |
| 3.4.5 MHF1过表达菌株内质网胁迫应答表征 | 第58-60页 |
| 3.5 讨论 | 第60-61页 |
| 3.6 本章小结 | 第61-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 创新点 | 第63-64页 |
| 展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-76页 |
| 附录A 本论文涉及的基因序列 | 第76-77页 |
| 附表：本文使用主要引物序列 | 第77-79页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
