摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 绪论 | 第12-18页 |
1.1 T-2 毒素概况 | 第12-13页 |
1.2 水产饲料中T-2 毒素的污染状况 | 第13页 |
1.3 T-2 毒素对凡纳滨对虾的毒害作用 | 第13-14页 |
1.4 氧化应激 | 第14-15页 |
1.5 抗氧化系统 | 第15-17页 |
1.5.1 酶类抗氧化物质 | 第15-16页 |
1.5.2 非酶类抗氧化物质 | 第16-17页 |
1.6 研究内容与创新意义 | 第17-18页 |
1.6.1 研究内容 | 第17页 |
1.6.2 创新意义 | 第17-18页 |
2 实验对象的分子鉴定 | 第18-24页 |
2.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.1 实验对象 | 第18页 |
2.1.2 引物的合成 | 第18-19页 |
2.1.3 主要试剂 | 第19页 |
2.1.4 仪器与设备 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-21页 |
2.2.1 DNA的提取和纯化 | 第19页 |
2.2.2 PCR | 第19-20页 |
2.2.3 PCR products clean up ( ExoSAP-IT method ) | 第20页 |
2.2.4 标记(Big Dye) | 第20-21页 |
2.2.5 Ethenol-EDTA Precipitation | 第21页 |
2.2.6 DNA测序 | 第21页 |
2.2.7 分析测序结果 | 第21页 |
2.3 结果与分析 | 第21-23页 |
2.3.1 16S rRNA的引物 | 第21页 |
2.3.2 16S rRNA PCR电泳 | 第21-22页 |
2.3.3 16S rRNA基因序列结果 | 第22-23页 |
2.4 讨论 | 第23页 |
2.5 小结 | 第23-24页 |
3 T-2 毒素对凡纳滨对虾总抗氧化能力和抗氧化酶活性的影响 | 第24-40页 |
3.1 材料与仪器 | 第24-25页 |
3.1.1 样品 | 第24页 |
3.1.2 材料与试剂 | 第24-25页 |
3.1.3 仪器与设备 | 第25页 |
3.2 实验方法 | 第25-27页 |
3.2.1 饲料的配制 | 第25页 |
3.2.2 对虾染毒 | 第25页 |
3.2.3 样品前处理 | 第25页 |
3.2.4 检测指标与方法 | 第25-27页 |
3.2.5 测定方法 | 第27页 |
3.2.6 数据处理 | 第27页 |
3.3 结果与分析 | 第27-37页 |
3.3.1 总氧化能力的变化 | 第27-29页 |
3.3.2 MDA的变化 | 第29-31页 |
3.3.3 CAT的变化 | 第31-33页 |
3.3.4 SOD的变化 | 第33-35页 |
3.3.5 GSH-PX的变化 | 第35-37页 |
3.4 讨论 | 第37-39页 |
3.5 小结 | 第39-40页 |
4 T-2 毒素对凡纳滨对虾体内抗氧化酶(SOD和CAT)基因表达的影响 | 第40-48页 |
4.1 材料与仪器 | 第40-41页 |
4.1.1 样品 | 第40页 |
4.1.2 主要试剂 | 第40-41页 |
4.1.3 仪器与设备 | 第41页 |
4.1.4 引物设计及其序列 | 第41页 |
4.2 实验方法 | 第41-44页 |
4.2.1 饲料的配制 | 第41页 |
4.2.2 凡纳滨对虾的染毒 | 第41页 |
4.2.3 提取总RNA | 第41-42页 |
4.2.4 RNA变性电泳 | 第42页 |
4.2.5 cDNA的合成 | 第42-43页 |
4.2.6 反转录合成的First-strand cDNA的质量检测 | 第43页 |
4.2.7 实时荧光定量PCR | 第43页 |
4.2.8 数据处理 | 第43-44页 |
4.3 结果与分析 | 第44-46页 |
4.3.1 总RNA提取结果检测 | 第44页 |
4.3.2 退火温度的选择 | 第44-45页 |
4.3.3 实时荧光PCR的基因表达分析 | 第45-46页 |
4.4 讨论 | 第46-47页 |
4.5 小结 | 第47-48页 |
5 T-2 毒素对凡纳滨对虾体内非酶抗氧化成分的影响 | 第48-63页 |
5.1 材料与仪器 | 第48-49页 |
5.1.1 材料和试剂 | 第48-49页 |
5.1.2 仪器与设备 | 第49页 |
5.2 实验方法 | 第49-50页 |
5.2.1 饲料的配制 | 第49页 |
5.2.2 对虾的养殖 | 第49页 |
5.2.3 三种脂溶性维生素含量的测定 | 第49-50页 |
5.2.4 谷胱甘肽含量的测定 | 第50页 |
5.2.5 数据处理 | 第50页 |
5.3 结果与分析 | 第50-59页 |
5.3.1 色谱条件的确定 | 第50-51页 |
5.3.2 线性关系 | 第51页 |
5.3.3 精密度 | 第51页 |
5.3.4 加样回收率实验 | 第51页 |
5.3.5 检测限的测定 | 第51-53页 |
5.3.6 VA、VD3、VE含量的变化 | 第53-55页 |
5.3.7 谷胱甘肽含量的变化 | 第55-57页 |
5.3.8 T-2 毒素诱导不同暴露剂量下各指标的变化规律 | 第57-59页 |
5.4 讨论 | 第59-61页 |
5.5 小结 | 第61-63页 |
6 结论 | 第63-66页 |
6.1 主要结论 | 第63-64页 |
6.2 展望与不足 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
作者简介 | 第77-78页 |
导师简介 | 第78页 |