摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
1 前言 | 第10-20页 |
1.1 中式菜肴的研究背景 | 第10页 |
1.2 大肠杆菌O157: H7的研究背景 | 第10-12页 |
1.2.1 大肠杆O157:H7的生物学特性 | 第10页 |
1.2.2 大肠杆菌O157:H7的危害及致病性 | 第10-11页 |
1.2.3 大肠杆菌O157:H7的检测方法 | 第11-12页 |
1.3 单增李斯特菌的研究背景 | 第12-16页 |
1.3.1 单增李斯特菌的生物学特性 | 第12页 |
1.3.2 单增李斯特菌的危害及致病性 | 第12页 |
1.3.3 单增李斯特菌的检测方法 | 第12-13页 |
1.3.4 单增李斯特菌的分型方法 | 第13-14页 |
1.3.5 单增李斯特菌的耐药性研究 | 第14-16页 |
1.4 有关细菌蛋白的研究 | 第16页 |
1.5 常用的蛋白分离分析技术 | 第16-17页 |
1.5.1 二维凝胶电泳(2-DE) | 第16-17页 |
1.5.2 差异凝胶电泳(DIGE) | 第17页 |
1.5.3 多维液相色谱(MDLC) | 第17页 |
1.6 质谱分析技术 | 第17-18页 |
1.7 免疫蛋白组学的研究进展 | 第18页 |
1.8 研究的目的和意义 | 第18-19页 |
1.9 研究内容 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-36页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第20-26页 |
2.1.1 样品来源 | 第20页 |
2.1.2 实验菌株 | 第20页 |
2.1.3 主要试剂及培养基 | 第20-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-36页 |
2.2.1 样品处理及细菌检测 | 第26-28页 |
2.2.2 单增李斯特菌MLST分型 | 第28页 |
2.2.3 常规抗生素药敏检测 | 第28-29页 |
2.2.4 单增李斯特菌的毒力因子检测 | 第29页 |
2.2.5 菌株的活化培养 | 第29-30页 |
2.2.6 大肠杆菌O157:H7和单增李斯特菌多克隆抗体的制备 | 第30-31页 |
2.2.7 大肠杆菌O157:H7和单增李斯特菌蛋白样品的制备 | 第31-32页 |
2.2.8 一维蛋白质电泳 | 第32页 |
2.2.9 二维双向电泳 | 第32-34页 |
2.2.10 免疫印迹 | 第34-35页 |
2.2.11 质谱鉴定 | 第35-36页 |
3 结果与讨论 | 第36-60页 |
3.1 样品中致病菌污染情况 | 第36-38页 |
3.1.1 大肠杆菌O157:H7的污染情况 | 第36页 |
3.1.2 单增李斯特菌的污染情况 | 第36-38页 |
3.2 单增李斯特菌的MLST分型 | 第38-39页 |
3.3 单增李斯特菌的药敏分析 | 第39-46页 |
3.3.1 常规抗生素检测参考标准 | 第39-40页 |
3.3.2 质控菌株检测结果 | 第40-41页 |
3.3.3 单增李斯特菌对头孢类抗生素药敏试验结果 | 第41-42页 |
3.3.4 单增李斯特菌对四环素类抗生素药敏试验结果 | 第42-43页 |
3.3.5 单增李斯特菌对青霉素类抗生素药敏试验结果 | 第43页 |
3.3.6 单增李斯特菌对喹诺酮类抗菌药物药敏试验结果 | 第43-44页 |
3.3.7 单增李斯特菌对磺胺类抗菌药物药敏试验结果 | 第44页 |
3.3.8 单增李斯特菌对氯霉素类抗生素药敏试验结果 | 第44页 |
3.3.9 单增李斯特菌对硝基呋喃类抗菌药物药敏试验结果 | 第44页 |
3.3.10 单增李斯特菌对多肽类抗生素药敏试验结果 | 第44页 |
3.3.11 单增李斯特菌对林可酰胺类抗生素药敏试验结果 | 第44-45页 |
3.3.12 单增李斯特菌的多重耐药性 | 第45-46页 |
3.4 单增李斯特菌的毒力因子检测 | 第46-47页 |
3.5 大肠杆菌O157:H7和单增李斯特菌多克隆抗体的制备 | 第47-48页 |
3.5.1 间接ELISA法检测抗血清效价 | 第47-48页 |
3.5.2 抗体的浓度 | 第48页 |
3.6 一维电泳和免疫印迹 | 第48-50页 |
3.6.1 大肠杆菌O157:H7全菌蛋白的一维电泳和免疫印迹 | 第48-49页 |
3.6.2 单增李斯特菌全菌蛋白的一维电泳和免疫印迹 | 第49-50页 |
3.7 二维双向电泳和免疫印迹 | 第50-52页 |
3.7.1 大肠杆菌O157:H7菌株全菌蛋白的双向电泳和免疫印迹 | 第50-51页 |
3.7.2 单增李斯特菌的全菌蛋白的双向电泳和免疫印迹 | 第51-52页 |
3.8 质谱分析 | 第52-55页 |
3.8.1 大肠杆菌O157:H7菌株的质谱分析结果 | 第53-54页 |
3.8.2 单增李斯特菌株的质谱分析结果 | 第54-55页 |
3.9 蛋白性质与功能分析 | 第55-60页 |
3.9.1 大肠杆菌O157:H7蛋白质的细胞定位 | 第55页 |
3.9.2 单增李斯特菌蛋白质的细胞定位 | 第55-56页 |
3.9.3 蛋白质的功能分析 | 第56-60页 |
4 结论 | 第60-61页 |
5 展望 | 第61-62页 |
6 参考文献 | 第62-69页 |
7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第69-70页 |
8 致谢 | 第70页 |