縮略语 | 第3-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 引言 | 第12-25页 |
1.1 氯霉素及其研究进展 | 第12-18页 |
1.1.1 CAP的化学结构及理化性质 | 第12页 |
1.1.2 CAP的作用及机理 | 第12-13页 |
1.1.3 CAP的危害及其限量标准 | 第13-14页 |
1.1.4 CAP检测方法的研究 | 第14-18页 |
1.2 免疫PCR检测方法及其应用 | 第18-23页 |
1.2.1 IPCR的原理 | 第18-20页 |
1.2.2 IPCR的类型 | 第20-22页 |
1.2.3 IPCR的应用 | 第22-23页 |
1.3 主要研究内容和意义 | 第23-25页 |
1.3.1 主要研究内容 | 第23-24页 |
1.3.2 研究意义 | 第24-25页 |
第二章 氯霉素人工抗原的合成与多克隆抗体的制备 | 第25-38页 |
2.1 实验试剂与仪器 | 第25-26页 |
2.1.1 实验试剂 | 第25-26页 |
2.1.2 实验仪器 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-30页 |
2.2.1 透析袋的预处理 | 第26页 |
2.2.2 CAP人工抗原的合成 | 第26-29页 |
2.2.3 CAP人工抗原的紫外扫描鉴定 | 第29页 |
2.2.4 CAP鼠多克隆抗体的制备 | 第29页 |
2.2.5 免疫学鉴定 | 第29-30页 |
2.3 实验结果 | 第30-35页 |
2.3.1 紫外扫描鉴定 | 第30-33页 |
2.3.2 免疫学鉴定 | 第33-35页 |
2.4 讨论 | 第35-36页 |
2.4.1 人工抗原合成方法的选择 | 第35-36页 |
2.4.2 不同标准品稀释液对抗原抗体结合作用的影响 | 第36页 |
2.5 小结 | 第36-38页 |
第三章 抗氯霉素单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立 | 第38-53页 |
3.1 实验试剂与仪器 | 第38-40页 |
3.1.1 实验试剂 | 第38-39页 |
3.1.2 实验仪器 | 第39-40页 |
3.2 实验方法 | 第40-44页 |
3.2.1 抗CAP单克隆抗体的制备 | 第40-43页 |
3.2.2 抗CAP单克隆抗体的鉴定 | 第43页 |
3.2.3 ELISA检测方法的建立 | 第43-44页 |
3.3 实验结果 | 第44-51页 |
3.3.1 细胞融合 | 第44页 |
3.3.2 杂交癌细胞的筛选与克隆 | 第44-46页 |
3.3.3 抗CAP单克隆抗体腹水的生产 | 第46-47页 |
3.3.4 抗CAP单克隆抗体的鉴定 | 第47-48页 |
3.3.5 ELISA检测方法的建立 | 第48-51页 |
3.4 讨论 | 第51页 |
3.5 小结 | 第51-53页 |
3.5.1 制备抗CAP单克隆抗体 | 第51-52页 |
3.5.2 建立ELISA方法检测CAP | 第52-53页 |
第四章 基于抗CAP单克隆抗体的免疫PCR检测法的建立 | 第53-79页 |
4.1 实验试剂与仪器 | 第53-54页 |
4.1.1 实验试剂 | 第53-54页 |
4.1.2 实验仪器 | 第54页 |
4.1.3 引物 | 第54页 |
4.2 实验方法 | 第54-59页 |
4.2.1 酶标亲和素的制备 | 第54-55页 |
4.2.2 Bio-mAbs的制备及鉴定 | 第55-56页 |
4.2.3 制备生物素标记的DNA | 第56-57页 |
4.2.4 免疫PCR检测条件的优化 | 第57-59页 |
4.2.5 免疫PCR标准曲线的建立 | 第59页 |
4.2.6 免疫PCR方法重复性实验 | 第59页 |
4.3 实验结果 | 第59-77页 |
4.3.1 Bio-mAbs效价的测定 | 第59-61页 |
4.3.2 生物素标记DNA的制备 | 第61-62页 |
4.3.3 免疫PCR检测条件的优化 | 第62-75页 |
4.3.4 免疫PCR标准曲线的建立 | 第75-76页 |
4.3.5 免疫PCR方法重复性实验 | 第76-77页 |
4.4 讨论 | 第77-78页 |
4.4.1 Bio-mAbs的制备 | 第77页 |
4.4.2 免疫PCR方法的建立 | 第77-78页 |
4.5 小结 | 第78-79页 |
第五章 基于抗CAP单克隆抗体的免疫PCR检测法的初步应用 | 第79-86页 |
5.1 实验试剂与仪器 | 第79页 |
5.1.1 样品与试剂 | 第79页 |
5.1.2 实验仪器 | 第79页 |
5.2 实验方法 | 第79-81页 |
5.2.1 市售ELISA试剂盒检测CAP | 第79-80页 |
5.2.2 免疫PCR检测CAP | 第80-81页 |
5.3 实验结果 | 第81-84页 |
5.3.1 市售ELISA试剂盒检测CAP标准曲线的建立 | 第81-82页 |
5.3.2 IPCR和市售ELISA试剂盒检测牛奶中的CAP | 第82-83页 |
5.3.3 市售ELISA试剂盒检测CAP回收率的测定 | 第83页 |
5.3.4 IPCR检测CAP回收率的测定 | 第83-84页 |
5.4 讨论 | 第84-85页 |
5.4.1 IPCR分析样品的影响因素 | 第84页 |
5.4.2 20份牛奶样品中CAP含量的检测 | 第84-85页 |
5.5 小结 | 第85-86页 |
第六章 结论与展望 | 第86-88页 |
6.1 结论 | 第86页 |
6.2 进一步工作方向 | 第86-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-95页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第95页 |