| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-16页 |
| ·腈水解酶的应用及研究进展 | 第7-11页 |
| ·酶催化腈水解反应的作用机理 | 第7-8页 |
| ·酶催化腈水解反应的特性 | 第8-9页 |
| ·腈水解酶的工业应用 | 第9-11页 |
| ·巴氯芬和普瑞巴林的研究背景 | 第11-13页 |
| ·巴氯芬和普瑞巴林简介 | 第11页 |
| ·巴氯芬和普瑞巴林的市场前景 | 第11-12页 |
| ·国内外研究进展 | 第12-13页 |
| ·本课题的研究意义 | 第13-14页 |
| ·本课题的研究思路和内容 | 第14-16页 |
| 第二章 以 3-(4-氯苯基)-戊二腈为底物的高产菌株筛选、鉴定及条件优化 | 第16-35页 |
| ·实验材料 | 第16-19页 |
| ·培养基 | 第16页 |
| ·试剂 | 第16-18页 |
| ·仪器 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-25页 |
| ·菌种筛选和保存 | 第19-20页 |
| ·酶活测定 | 第20-21页 |
| ·产物分析与鉴定 | 第21-22页 |
| ·菌株鉴定 | 第22-24页 |
| ·发酵产酶条件优化 | 第24页 |
| ·转化条件优化 | 第24-25页 |
| ·底物耐受 | 第25页 |
| ·底物谱 | 第25页 |
| ·发酵产酶曲线 | 第25页 |
| ·结果与讨论 | 第25-34页 |
| ·底物 3-(4-氯苯基)-戊二腈核磁鉴定数据 | 第25页 |
| ·产物 4-氰基-3-(4-氯苯基)-丁酸核磁鉴定数据 | 第25-26页 |
| ·产物的 TLC 及 HPLC 检测 | 第26-27页 |
| ·菌种鉴定 | 第27-30页 |
| ·发酵产酶条件优化 | 第30-32页 |
| ·转化条件优化 | 第32-33页 |
| ·底物耐受性实验 | 第33页 |
| ·底物特异性 | 第33-34页 |
| ·发酵产酶曲线 | 第34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 巴氯芬/普瑞巴林的合成及检测 | 第35-45页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·实验试剂 | 第35页 |
| ·实验仪器 | 第35页 |
| ·蛋白电泳所用主要溶液 | 第35-36页 |
| ·AKTA 纯化缓冲液 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-39页 |
| ·巴氯芬的合成 | 第36-37页 |
| ·巴氯芬 ee 值检测 | 第37页 |
| ·普瑞巴林的合成 | 第37页 |
| ·普瑞巴林 ee 值检测 | 第37-38页 |
| ·不同来源腈水解酶化学-酶法合成巴氯芬的性能初步比较 | 第38-39页 |
| ·实验结果 | 第39-43页 |
| ·巴氯芬的 ee 值测定 | 第39-40页 |
| ·普瑞巴林的 ee 值测定 | 第40-41页 |
| ·工程菌构建 | 第41-42页 |
| ·工程菌 E. coli BL21(DE3)/pET28a(+)-Nit 酶分离纯化 | 第42-43页 |
| ·工程菌 E. coli BL21(DE3)/pET28a(+)-Nit 与野生菌 WX12 催化效率比较 | 第43页 |
| ·本章小结 | 第43-45页 |
| 主要结论与展望 | 第45-46页 |
| ·主要结论 | 第45页 |
| ·展望 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 附录 1：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50-51页 |
| 附录 2：缩略词 | 第51-52页 |
| 附录 3：附图 | 第52-54页 |
