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基于磁性纳米材料的病原微生物PCR和ELISA检测方法研究

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
一 前言第7-13页
   ·食源性病原微生物概论第7页
   ·本文涉及的四种病原微生物第7-8页
     ·沙门氏菌第7页
     ·金黄色葡萄球菌第7页
     ·志贺氏菌第7-8页
     ·肠出血性大肠杆菌 O157:H7第8页
   ·食品中病原微生物的检测方法第8-11页
     ·常规生化检测方法第8页
     ·PCR 检测技术第8-9页
     ·基因芯片检测方法第9页
     ·ELISA 检测方法第9-10页
     ·胶乳凝集快速检测方法第10页
     ·胶体金免疫层析检测第10页
     ·磁性纳米材料在病原微生物检测中的应用第10-11页
     ·各种检测技术的比较第11页
   ·研究内容和目的第11-13页
     ·研究内容第11-12页
     ·研究目的第12-13页
二 实验材料与方法第13-23页
   ·实验材料第13-14页
     ·药品与试剂第13页
     ·溶液系统第13-14页
     ·仪器与设备第14页
   ·病原微生物的培养第14页
   ·磁性纳米粒子提取细菌基因组DNA第14-16页
     ·羧基包裹磁粒子合成不同表面修饰基团磁性纳米粒子合成第14-15页
     ·羟基包裹磁粒子合成第15页
     ·氨基包裹磁粒子合成第15页
     ·磁性纳米粒子提取基因组DNA 的方法第15-16页
     ·提取DNA 产物的表征第16页
   ·PCR 检测方法的建立第16-18页
     ·PCR 体系的确定第16-17页
     ·特异性的测定第17页
     ·多重PCR 体系优化第17-18页
     ·检测限的测定第18页
     ·牛奶样品的检测第18页
   ·免疫磁珠吸附 E. coli O157:H7 方法的建立第18-21页
     ·抗原的制备第18页
     ·免疫程序第18-19页
     ·间接ELISA 方法的建立第19页
     ·E. coli 0157:H7 单克隆抗体的制备第19-20页
     ·单克隆抗体标记HRP第20页
     ·E. coli 0157:H7 免疫磁珠的制备第20页
     ·免疫磁珠偶联抗体浓度的表征第20页
     ·免疫磁珠吸附E. coli 0157:H7 效率的测定第20-21页
   ·E. coli 0157:H7 双抗夹心ELISA 方法的建立第21-23页
     ·单克隆抗体配对筛选第21页
     ·双抗夹心ELISA 方法的优化第21页
     ·双抗夹心ELISA 的检测限第21-22页
     ·双抗夹心ELISA 的特异性第22页
     ·绿茶样品的检测第22-23页
三 结果与讨论第23-36页
   ·基于PCR 检测实验方法结果第23-30页
     ·磁性纳米粒子表征结果第23-24页
     ·提取细菌基因组DNA 表征结果第24-25页
     ·单重PCR 的琼脂糖凝胶电泳图第25-26页
     ·三重PCR 优化结果第26-27页
     ·三重PCR-DHPLC 检测结果的测定第27-28页
     ·检测限测定第28-30页
     ·牛奶样品检测结果第30页
   ·基于免疫方法检测实验方法结果第30-36页
     ·E. coli 0157:H7 抗血清的效价测定结果第30-31页
     ·E. coli 0157:H7 单克隆抗体偶联HRP 后的测定结果第31页
     ·免疫磁珠偶联抗体测定结果第31-32页
     ·免疫磁珠吸附E. coli 0157:H7 效率测定结果第32页
     ·单克隆抗体配对筛选结果第32页
     ·双抗夹心ELISA 各参数的优化第32-33页
     ·双抗夹心法ELISA 检测限测定第33-34页
     ·交叉反应的测定第34页
     ·绿茶样品检测结果第34-36页
四 主要结论第36-37页
致谢第37-38页
参考文献第38-42页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第42页

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