| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 一 前言 | 第7-13页 |
| ·食源性病原微生物概论 | 第7页 |
| ·本文涉及的四种病原微生物 | 第7-8页 |
| ·沙门氏菌 | 第7页 |
| ·金黄色葡萄球菌 | 第7页 |
| ·志贺氏菌 | 第7-8页 |
| ·肠出血性大肠杆菌 O157:H7 | 第8页 |
| ·食品中病原微生物的检测方法 | 第8-11页 |
| ·常规生化检测方法 | 第8页 |
| ·PCR 检测技术 | 第8-9页 |
| ·基因芯片检测方法 | 第9页 |
| ·ELISA 检测方法 | 第9-10页 |
| ·胶乳凝集快速检测方法 | 第10页 |
| ·胶体金免疫层析检测 | 第10页 |
| ·磁性纳米材料在病原微生物检测中的应用 | 第10-11页 |
| ·各种检测技术的比较 | 第11页 |
| ·研究内容和目的 | 第11-13页 |
| ·研究内容 | 第11-12页 |
| ·研究目的 | 第12-13页 |
| 二 实验材料与方法 | 第13-23页 |
| ·实验材料 | 第13-14页 |
| ·药品与试剂 | 第13页 |
| ·溶液系统 | 第13-14页 |
| ·仪器与设备 | 第14页 |
| ·病原微生物的培养 | 第14页 |
| ·磁性纳米粒子提取细菌基因组DNA | 第14-16页 |
| ·羧基包裹磁粒子合成不同表面修饰基团磁性纳米粒子合成 | 第14-15页 |
| ·羟基包裹磁粒子合成 | 第15页 |
| ·氨基包裹磁粒子合成 | 第15页 |
| ·磁性纳米粒子提取基因组DNA 的方法 | 第15-16页 |
| ·提取DNA 产物的表征 | 第16页 |
| ·PCR 检测方法的建立 | 第16-18页 |
| ·PCR 体系的确定 | 第16-17页 |
| ·特异性的测定 | 第17页 |
| ·多重PCR 体系优化 | 第17-18页 |
| ·检测限的测定 | 第18页 |
| ·牛奶样品的检测 | 第18页 |
| ·免疫磁珠吸附 E. coli O157:H7 方法的建立 | 第18-21页 |
| ·抗原的制备 | 第18页 |
| ·免疫程序 | 第18-19页 |
| ·间接ELISA 方法的建立 | 第19页 |
| ·E. coli 0157:H7 单克隆抗体的制备 | 第19-20页 |
| ·单克隆抗体标记HRP | 第20页 |
| ·E. coli 0157:H7 免疫磁珠的制备 | 第20页 |
| ·免疫磁珠偶联抗体浓度的表征 | 第20页 |
| ·免疫磁珠吸附E. coli 0157:H7 效率的测定 | 第20-21页 |
| ·E. coli 0157:H7 双抗夹心ELISA 方法的建立 | 第21-23页 |
| ·单克隆抗体配对筛选 | 第21页 |
| ·双抗夹心ELISA 方法的优化 | 第21页 |
| ·双抗夹心ELISA 的检测限 | 第21-22页 |
| ·双抗夹心ELISA 的特异性 | 第22页 |
| ·绿茶样品的检测 | 第22-23页 |
| 三 结果与讨论 | 第23-36页 |
| ·基于PCR 检测实验方法结果 | 第23-30页 |
| ·磁性纳米粒子表征结果 | 第23-24页 |
| ·提取细菌基因组DNA 表征结果 | 第24-25页 |
| ·单重PCR 的琼脂糖凝胶电泳图 | 第25-26页 |
| ·三重PCR 优化结果 | 第26-27页 |
| ·三重PCR-DHPLC 检测结果的测定 | 第27-28页 |
| ·检测限测定 | 第28-30页 |
| ·牛奶样品检测结果 | 第30页 |
| ·基于免疫方法检测实验方法结果 | 第30-36页 |
| ·E. coli 0157:H7 抗血清的效价测定结果 | 第30-31页 |
| ·E. coli 0157:H7 单克隆抗体偶联HRP 后的测定结果 | 第31页 |
| ·免疫磁珠偶联抗体测定结果 | 第31-32页 |
| ·免疫磁珠吸附E. coli 0157:H7 效率测定结果 | 第32页 |
| ·单克隆抗体配对筛选结果 | 第32页 |
| ·双抗夹心ELISA 各参数的优化 | 第32-33页 |
| ·双抗夹心法ELISA 检测限测定 | 第33-34页 |
| ·交叉反应的测定 | 第34页 |
| ·绿茶样品检测结果 | 第34-36页 |
| 四 主要结论 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第42页 |