| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第16-43页 |
| 1.1 二硫键与蛋白质折叠酶 | 第17-26页 |
| 1.1.1 PDI的分布与生理作用 | 第19页 |
| 1.1.2 PDI的生化特性 | 第19-22页 |
| 1.1.3 PDI酶学活性的测定方法 | 第22-24页 |
| 1.1.4 PDI的分子伴侣活性 | 第24-26页 |
| 1.1.5 PDI的抗分子伴侣活性 | 第26页 |
| 1.2 内质网氧化还原酶 | 第26-33页 |
| 1.2.1 巯基氧化酶家族 | 第26-27页 |
| 1.2.2 Ero1的分布与生理作用 | 第27-29页 |
| 1.2.3 Ero1的催化二硫键氧化机制 | 第29-33页 |
| 1.3 小麦蛋白质与面粉加工品质关系 | 第33-36页 |
| 1.3.1 小麦蛋白质的组成 | 第33-34页 |
| 1.3.2 醇溶蛋白 | 第34页 |
| 1.3.3 麦谷蛋白 | 第34-36页 |
| 1.4 酶与面粉加工品质的关系 | 第36-40页 |
| 1.4.1 催化二硫键交换酶类 | 第37-38页 |
| 1.4.2 其它酶类 | 第38-40页 |
| 1.5 本课题的研究意义及内容 | 第40-43页 |
| 1.5.1 研究背景和意义 | 第40-41页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第41-43页 |
| 第二章 wPDI对面粉加工品质的影响 | 第43-66页 |
| 2.1 引言 | 第43页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第43-44页 |
| 2.2.1 菌株与质粒 | 第43-44页 |
| 2.2.2 实验材料 | 第44页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第44页 |
| 2.3 实验方法 | 第44-52页 |
| 2.3.1 wPDI的分离纯化 | 第44-46页 |
| 2.3.2 wPDI活性的测定 | 第46-47页 |
| 2.3.3 蛋白质电泳 | 第47-48页 |
| 2.3.4 wPDI对面粉粉质特性的影响 | 第48页 |
| 2.3.5 面团和面筋蛋白制备 | 第48-49页 |
| 2.3.6 wPDI对面团流变的影响 | 第49页 |
| 2.3.7 wPDI对面筋蛋白自由巯基含量的影响 | 第49-50页 |
| 2.3.8 wPDI对面团微观结构的影响 | 第50页 |
| 2.3.9 wPDI对面筋蛋白二级结构的影响 | 第50-51页 |
| 2.3.10 wPDI对面包焙烤品质的影响 | 第51页 |
| 2.3.11 统计学分析 | 第51-52页 |
| 2.4 结果与分析 | 第52-65页 |
| 2.4.1 wPDI的分离纯化及活性测定 | 第52-54页 |
| 2.4.2 wPDI对面粉粉质特性的影响 | 第54-56页 |
| 2.4.3 wPDI对面团流变特性的影响 | 第56-57页 |
| 2.4.4 wPDI对面团微观结构的影响 | 第57-59页 |
| 2.4.5 wPDI对面筋蛋白自由巯基的影响 | 第59-60页 |
| 2.4.6 wPDI对面筋蛋白二级结构的影响 | 第60-62页 |
| 2.4.7 wPDI对面包焙烤品质的影响 | 第62-65页 |
| 2.5 本章小结 | 第65-66页 |
| 第三章 wPDI截短蛋白及其活性位点改造蛋白的制备 | 第66-88页 |
| 3.1 前言 | 第66-67页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第67-68页 |
| 3.2.1 菌株与质粒 | 第67页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第67页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第67-68页 |
| 3.3 实验方法 | 第68-74页 |
| 3.3.1 wPDI截短蛋白的制备 | 第68-70页 |
| 3.3.2 wPDI突变体蛋白的制备 | 第70-71页 |
| 3.3.3 wPDI活性位点半胱氨酸的化学修饰 | 第71-72页 |
| 3.3.4 酶学活性和伴侣活性测定 | 第72-73页 |
| 3.3.5 wPDI改造前后构象变化分析 | 第73页 |
| 3.3.6 蛋白质电泳 | 第73-74页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第74-87页 |
| 3.4.1 wPDI截短蛋白的分离纯化 | 第74-76页 |
| 3.4.2 wPDI截短蛋白的活性测定 | 第76-81页 |
| 3.4.3 aPDI和mPDI的制备 | 第81-82页 |
| 3.4.4 aPDI和mPDI的活性测定 | 第82-85页 |
| 3.4.5 aPDI和mPDI的构象分析 | 第85-87页 |
| 3.5 本章小结 | 第87-88页 |
| 第四章 aPDI和mPDI改善面粉加工品质的研究 | 第88-105页 |
| 4.1 前言 | 第88页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第88-90页 |
| 4.2.1 菌株与质粒 | 第88页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第88-89页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第89-90页 |
| 4.3 实验方法 | 第90-93页 |
| 4.3.1 蛋白质的分离纯化 | 第90页 |
| 4.3.2 蛋白质电泳 | 第90页 |
| 4.3.3 面粉粉质特性的测定 | 第90页 |
| 4.3.4 冻干面团的制备 | 第90页 |
| 4.3.5 小麦蛋白质组分的提取及浓度测定 | 第90-91页 |
| 4.3.6 SDS-可溶蛋面筋白的分子排阻分析 | 第91-92页 |
| 4.3.7 面团的扫描电镜分析 | 第92页 |
| 4.3.8 面包品质分析 | 第92页 |
| 4.3.9 面粉水提物对wPDI活性的影响 | 第92-93页 |
| 4.3.10 统计学分析 | 第93页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第93-104页 |
| 4.4.1 截短蛋白AB对面粉加工品质研究 | 第93-95页 |
| 4.4.2 mPDI和aPDI对面粉粉质特性的影响 | 第95-96页 |
| 4.4.3 添加mPDI和aPDI后面团中蛋白质组分的变化 | 第96-101页 |
| 4.4.4 mPDI和aPDI对面团微观结构的影响 | 第101-102页 |
| 4.4.5 mPDI和aPDI对面包品质的影响 | 第102-103页 |
| 4.4.6 讨论 | 第103-104页 |
| 4.5 本章小结 | 第104-105页 |
| 第五章 wEro1的克隆、表达及其酶学性质研究 | 第105-124页 |
| 5.1 引言 | 第105页 |
| 5.2 材料与仪器 | 第105-107页 |
| 5.2.1 菌株与质粒 | 第105页 |
| 5.2.2 实验材料 | 第105-106页 |
| 5.2.3 实验仪器 | 第106-107页 |
| 5.3 实验方法 | 第107-112页 |
| 5.3.1 重组wEro1的亚克隆 | 第107页 |
| 5.3.2 重组wEro1表达载体构建和鉴定 | 第107页 |
| 5.3.3 重组wEro1的诱导表达 | 第107-108页 |
| 5.3.4 重组wEro1的分离纯化 | 第108-110页 |
| 5.3.5 wEro1的活性测定 | 第110-112页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第112-123页 |
| 5.4.1 wEro1的生物信息学分析 | 第112-114页 |
| 5.4.2 wero1基因表达载体构建 | 第114页 |
| 5.4.3 wEro1的重组表达及可溶性分析 | 第114-115页 |
| 5.4.4 wEro1的纯化 | 第115-118页 |
| 5.4.5 wEro1催化FAD还原活性 | 第118-120页 |
| 5.4.6 wEro1催化溶液氧消耗活性 | 第120-123页 |
| 5.5 本章小结 | 第123-124页 |
| 第六章 wEro1及其协同wPDI对面粉加工品质的影响 | 第124-144页 |
| 6.1 引言 | 第124页 |
| 6.2 材料与仪器 | 第124-125页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第124-125页 |
| 6.2.2 实验试剂 | 第125页 |
| 6.2.3 实验仪器 | 第125页 |
| 6.3 实验方法 | 第125-129页 |
| 6.3.1 面粉粉质测定 | 第125-126页 |
| 6.3.2 面团和面筋蛋白的制备 | 第126-127页 |
| 6.3.3 面团流变测定 | 第127页 |
| 6.3.4 面筋蛋白自由巯基定量 | 第127页 |
| 6.3.5 小麦蛋白质的提取及浓度测定 | 第127页 |
| 6.3.6 蛋白质电泳 | 第127页 |
| 6.3.7 SDS-不可溶蛋面筋白的分子排阻分析 | 第127-128页 |
| 6.3.8 面团的扫描电镜分析 | 第128页 |
| 6.3.9 面筋蛋白二级结构测定 | 第128页 |
| 6.3.10 面团中过氧化氢浓度测定 | 第128页 |
| 6.3.11 面包的焙烤以及品质评价 | 第128-129页 |
| 6.3.12 统计学分析 | 第129页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第129-143页 |
| 6.4.1 wEro1及其协同wPDI对粉质特性的影响 | 第129-131页 |
| 6.4.2 wEro1及其协同wPDI对面团流变的影响 | 第131-133页 |
| 6.4.3 wEro1对面包焙烤品质的影响 | 第133-134页 |
| 6.4.4 添加wEro1后面团中蛋白质组成的变化 | 第134-139页 |
| 6.4.5 wEro1对面团微观结构的影响 | 第139页 |
| 6.4.6 wEro1对面筋蛋白二级结构的影响 | 第139-141页 |
| 6.4.7 wEro1强化面筋机制 | 第141-143页 |
| 6.5 本章小结 | 第143-144页 |
| 结论与展望 | 第144-146页 |
| 一、结论 | 第144-145页 |
| 二、研究创新点 | 第145页 |
| 三、展望 | 第145-146页 |
| 参考文献 | 第146-164页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第164-166页 |
| 致谢 | 第166-167页 |
| 附件 | 第167页 |
