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黑胡椒中霉菌拮抗菌的筛选及其抑制作用研究

摘要第2-3页
Abstract第3-4页
符号说明第8-9页
第一章 绪论第9-17页
    1.1 黑胡椒第9页
    1.2 黑胡椒性质及应用第9页
    1.3 胡椒产品开发第9-11页
        1.3.1 胡椒碱第10页
        1.3.2 胡椒精油第10-11页
        1.3.3 胡椒油树脂第11页
    1.4 黑胡椒表面微生物及真菌毒素污染概况第11-12页
        1.4.1 表面微生物污染第11-12页
        1.4.2 真菌毒素污染第12页
    1.5 黑胡椒除菌去毒及保藏方法第12-14页
        1.5.1 辐照法第12-13页
        1.5.2 蒸汽法第13页
        1.5.3 化学法第13页
        1.5.4 保藏第13-14页
    1.6 生防菌控制黄曲霉生长及产毒第14-15页
        1.6.1 乳酸细菌第14-15页
        1.6.2 芽孢杆菌第15页
    1.7 本课题研究意义与内容第15-17页
第二章 黑胡椒中霉菌拮抗菌的分离筛选与鉴定第17-31页
    2.1 材料与方法第17-24页
        2.1.1 试验材料第17页
        2.1.2 指示霉菌菌株第17-18页
        2.1.3 主要试剂第18页
        2.1.4 主要仪器第18-19页
        2.1.5 试剂及培养基配制第19-20页
        2.1.6 样品中细菌的分离与纯化第20-21页
            2.1.6.1 香辛料中细菌的分离与纯化第20页
            2.1.6.2 乳酸细菌的分离与纯化第20-21页
        2.1.7 霉菌拮抗菌的筛选第21-22页
            2.1.7.1 霉菌培养及孢子悬液制作第21页
            2.1.7.2 霉菌拮抗菌的初筛第21页
            2.1.7.3 霉菌拮抗菌的复筛第21-22页
        2.1.8 拮抗菌菌株的鉴定第22-24页
            2.1.8.1 拮抗菌菌株形态及生理生化鉴定第22页
            2.1.8.2 菌株基因组DNA的提取第22-23页
            2.1.8.3 16S rDNA序列PCR扩增及测序分析第23-24页
    2.2 结果与分析第24-29页
        2.2.1 样品中细菌的分离与纯化第24页
        2.2.2 黄曲霉拮抗菌初筛结果第24-25页
        2.2.3 黄曲霉拮抗菌复筛结果第25-26页
        2.2.4 鉴定结果第26-29页
            2.2.4.1 形态特征鉴定第26页
            2.2.4.2 生理生化特征鉴定第26-27页
            2.2.4.3 芽孢杆菌F1基因组DNA的提取结果第27页
            2.2.4.4 菌株16S rDNA序列PCR扩增结果第27-28页
            2.2.4.5 菌株16S rDNA序列PCR扩增产物序列分析第28-29页
    2.3 讨论第29-30页
    2.4 本章小结第30-31页
第三章 B.amyloliquefaciens F1抗菌培养条件优化及发酵液抗菌特性研究第31-44页
    3.1 材料与方法第31-35页
        3.1.1 试验材料第31页
        3.1.2 主要试剂第31-32页
        3.1.3 仪器与设备第32页
        3.1.4 主要试剂与培养基的配制第32页
        3.1.5 试验方法第32-35页
            3.1.5.1 B.amyloliquefaciens F1生长曲线测定第32-33页
            3.1.5.2 B.amyloliquefaciens F1抗菌培养条件单因素优化第33页
            3.1.5.3 B.amyloliquefaciens F1抗菌培养基成分优化第33-34页
            3.1.5.4 优化后B.amyloliquefaciens F1发酵上清液对其他霉菌的抑制作用第34页
            3.1.5.5 发酵上清液膜分离第34页
            3.1.5.6 抗菌超滤液稳定性第34-35页
            3.1.5.7 抗菌超滤液总蛋白浓度测定第35页
    3.2 结果与分析第35-42页
        3.2.1 B.amyloliquefaciens F1生长曲线第35-36页
        3.2.2 B.amyloliquefaciens F1抗菌培养条件单因素优化第36-37页
            3.2.2.1 培养温度对F1发酵液抑菌活性的影响第36页
            3.2.2.2 初始pH值对F1发酵液抑菌活性的影响第36-37页
            3.2.2.3 培养时间对F1发酵液抑菌活性的影响第37页
        3.2.3 B.amyloliquefaciens F1抗菌培养基优化第37-39页
            3.2.3.1 碳源第37-38页
            3.2.3.2 氮源第38页
            3.2.3.3 微量元素第38-39页
            3.2.3.4 培养基成分单因素第39页
        3.2.4 优化后B.amyloliquefaciens F1对黑胡椒中其他霉菌的抑制作用第39-40页
        3.2.5 B.amyloliquefaciens F1发酵上清液膜分离第40-41页
        3.2.6 抗菌超滤液稳定性第41-42页
            3.2.6.1 抗菌超滤液对热的稳定性第41页
            3.2.6.2 抗菌超滤液对pH的稳定性第41-42页
            3.2.6.3 抗菌超滤液对蛋白酶敏感性第42页
    3.3 讨论第42-43页
    3.4 本章小结第43-44页
第四章 B.amyloliquefaciens F1对黄曲霉生长、产毒的影响及其在黑胡椒中的应用第44-59页
    4.1 材料与方法第44-48页
        4.1.1 试验材料第44页
        4.1.2 主要试剂第44页
        4.1.3 仪器与设备第44-45页
        4.1.4 主要试剂与培养基的配制第45页
        4.1.5 试验方法第45-48页
            4.1.5.1 黄曲霉孢子悬液制作及液体培养第45页
            4.1.5.2 菌丝干重测定第45-46页
            4.1.5.3 培养液中黄曲霉毒素含量HPLC测定第46-47页
            4.1.5.4 霉菌侵染黑胡椒第47页
            4.1.5.5 霉菌含量测定第47页
            4.1.5.6 胡椒碱含量测定第47-48页
            4.1.5.7 黑胡椒精油含量测定第48页
            4.1.5.8 失重第48页
            4.1.5.9 黑胡椒挥发性成分检测第48页
    4.2 结果与分析第48-57页
        4.2.1 菌丝干重第48-49页
        4.2.2 黄曲霉毒素含量第49-51页
            4.2.2.1 AFB1标准品色谱图第49-50页
            4.2.2.2 发酵液样品色谱图第50页
            4.2.2.3 AFB1标准曲线的制定第50-51页
            4.2.2.4 发酵液加标回收率、方法精密度及最低检出限第51页
            4.2.2.5 培养液中黄曲霉毒素含量第51页
        4.2.3 F1抗菌超滤液在黑胡椒储藏中的应用第51-57页
            4.2.3.1 胡椒碱标准曲线第51-52页
            4.2.3.2 黑胡椒主要品质变化第52-53页
            4.2.3.3 黑胡椒挥发性成分分析第53-57页
    4.3 讨论第57-58页
    4.4 本章小结第58-59页
全文总结第59-60页
展望第60页
参考文献第60-65页
致谢第65-66页

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