摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
缩略语索引 | 第7-11页 |
第一章 前言 | 第11-20页 |
1.1 蜡样芽孢杆菌的概述 | 第11-13页 |
1.1.1 蜡样芽孢杆菌的生化特征 | 第11页 |
1.1.2 蜡样芽孢杆菌在食品中的分布 | 第11-12页 |
1.1.3 蜡样芽孢杆菌产生毒素的类型 | 第12-13页 |
1.2 蜡样芽孢杆菌的检测研究进展 | 第13-14页 |
1.2.1 传统培养法 | 第13页 |
1.2.2 分子生物学方法 | 第13-14页 |
1.3 aPCR技术研究进展 | 第14-19页 |
1.3.1 aPCR技术的原理 | 第14-15页 |
1.3.2 aPCR在食源性致病菌检测中的研究进展 | 第15-19页 |
1.4 研究的内容及意义 | 第19-20页 |
第二章 食源性蜡样芽孢杆菌毒力基因调研 | 第20-35页 |
2.1 前言 | 第20-21页 |
2.2 材料与仪器 | 第21-23页 |
2.2.1 实验菌株 | 第21-22页 |
2.2.2 主要试剂和仪器设备 | 第22-23页 |
2.2.3 实验试剂的配制 | 第23页 |
2.3 实验方法 | 第23-27页 |
2.3.1 菌株的培养 | 第23页 |
2.3.2 细菌DNA的提取 | 第23页 |
2.3.3 毒力基因的检测 | 第23-25页 |
2.3.4 肠毒素基因相对转录水平的测定 | 第25-27页 |
2.4 结果与讨论 | 第27-32页 |
2.4.1 毒力基因的电泳检测结果 | 第27-28页 |
2.4.2 毒力基因的分布情况 | 第28页 |
2.4.3 肠毒素基因相对转录水平的测定 | 第28-32页 |
2.5 分析与讨论 | 第32-34页 |
2.6 本章小结 | 第34-35页 |
第三章 产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌活菌的PMA-aPCR-AuNPs检测体系的建立 | 第35-53页 |
3.1 前言 | 第35-37页 |
3.2 材料与仪器 | 第37-38页 |
3.2.1 实验菌株 | 第37页 |
3.2.2 主要试剂和仪器设备 | 第37-38页 |
3.2.3 实验试剂的配制 | 第38页 |
3.3 实验方法 | 第38-43页 |
3.3.1 引物和ssDNA的设计与合成 | 第38-39页 |
3.3.2 合成13nm纳米金粒子 | 第39页 |
3.3.3 ssDNA的检测 | 第39页 |
3.3.4 菌株的培养 | 第39页 |
3.3.5 PMA对细菌的处理 | 第39-40页 |
3.3.6 细菌DNA的提取 | 第40页 |
3.3.7 aPCR条件的优化 | 第40-42页 |
3.3.8 ssDNA与dsDNA效果的比较 | 第42页 |
3.3.9 DNA片段长度的优化 | 第42页 |
3.3.10 PMA抑制死菌DNA的PCR扩增能力的评价 | 第42-43页 |
3.3.11 产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌的检测 | 第43页 |
3.3.12 牛奶加标样本中产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌的检测 | 第43页 |
3.4 结果与讨论 | 第43-51页 |
3.4.1 纳米金的表征 | 第43-44页 |
3.4.2 ssDNA的检测 | 第44-46页 |
3.4.3 aPCR条件优化结果 | 第46-47页 |
3.4.4 ssDNA与dsDNA效果的比较 | 第47-48页 |
3.4.5 DNA片段长度的优化 | 第48页 |
3.4.6 PMA抑制死菌DNA的PCR扩增能力的确定 | 第48-49页 |
3.4.7 产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌的检测 | 第49-50页 |
3.4.8 牛奶加标样本中方法检测限的确定 | 第50-51页 |
3.5 分析与讨论 | 第51-52页 |
3.6 本章小结 | 第52-53页 |
第四章 结论与展望 | 第53-55页 |
4.1 结论 | 第53页 |
4.2 展望 | 第53-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录A 试剂 | 第62-63页 |
附录B 实验仪器设备 | 第63-64页 |
附录C 彩图 | 第64-67页 |
个人介绍 | 第67页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第67-68页 |
获奖情况 | 第68页 |