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固定化的β-半乳糖苷酶合成低聚半乳糖的研究

第一章 绪论第1-21页
 1 低聚半乳糖第9-12页
   ·功能性低聚糖第9-10页
   ·GOS的生理功能第10-11页
     ·调节肠道菌群平衡第10页
     ·防止便秘第10页
     ·改善脂质代谢第10-11页
     ·改善矿物质的吸收第11页
     ·难消化和低能量性第11页
     ·低龋齿性第11页
     ·抑制肠道癌第11页
   ·GOS的安全性第11页
   ·GOS的物理化学性质第11页
   ·GOS在食品等行业的应用第11-12页
   ·低聚半乳糖的商业生产第12页
 2 GOS的酶法合成第12-14页
   ·游离酶法合成GOS第12-13页
     ·水溶液中的反应第12-13页
     ·有机相中的反应第13页
   ·固定化酶法合成低聚糖第13-14页
     ·固定化酶水解乳清中的乳糖第13页
     ·固定化酶合成GOS第13-14页
   ·固定化细胞合成GOS第14页
 3 β-半乳糖苷酶第14-17页
   ·β-半乳糖苷酶的来源第14页
   ·酶本身特性第14-15页
   ·β-半乳糖苷酶的改造第15页
   ·催化反应特性及GOS合成机理第15-16页
   ·β-半乳糖苷酶的应用第16-17页
 4 固定化酶第17-18页
   ·固定化酶的优缺点第17页
   ·酶的固定化方法第17-18页
 5 β-半乳糖苷酶的固定化第18-20页
   ·壳聚糖作载体第19页
   ·海藻酸钠作载体第19-20页
 6 课题的提出第20-21页
第二章 壳聚糖-戊二醛吸附交联法固定化β-半乳糖苷酶第21-27页
 1 材料与方法第21-23页
   ·试验材料与试剂第21页
   ·仪器与设备第21页
   ·试验方法第21-23页
     ·邻硝基苯酚标准曲线的绘制第21页
     ·游离酶活力的测定第21-22页
     ·固定化酶活力的测定第22页
     ·茚三酮显色检测蛋白质第22页
     ·壳聚糖珠的制备第22页
     ·壳聚糖-戊二醛吸附交联法固定化β-半乳糖苷酶优化第22-23页
 2 结果与讨论第23-25页
   ·固定化和交联顺序的确定第23页
   ·戊二醛pH值的确定第23-24页
   ·戊二醛浓度对活力回收率的影响第24页
   ·固定化时间对活力回收率的影响第24页
   ·交联时间对活力回收率的影响第24-25页
   ·加酶量对活力回收率的影响第25页
   ·操作稳定性实验第25页
 3 小结第25-27页
第三章 海藻酸钙凝胶包埋法固定化β-半乳糖苷酶第27-38页
 1 前言第27页
 2 材料与方法第27-29页
   ·试验材料与试剂第27页
   ·仪器与设备第27页
   ·试验方法第27-29页
     ·ONP标准曲线的绘制第27页
     ·游离酶活力的测定第27页
     ·固定化酶活力的测定第27页
     ·海藻酸钙凝胶包埋法固定化β-半乳糖苷酶条件优化第27-28页
     ·固定化酶的特性表征第28-29页
     ·用Box-Behnken设计提高机械操作稳定性第29页
     ·新配方中加酶量对酶活力回收率的影响第29页
     ·机械操作稳定性实验第29页
     ·戊二醛交联防止酶泄漏第29页
 3 结果与讨论第29-37页
   ·海藻酸钙凝胶包埋法固定化β-半乳糖苷酶条件优化第29-31页
     ·海藻酸钠浓度的特性第29-30页
     ·氯化钙浓度对活力回收率的影响第30页
     ·加酶量对活力回收率的影响第30-31页
   ·固定化酶的特性表征第31-33页
     ·游离酶与固定化酶的最适温度第31-32页
     ·游离酶与固定化酶的耐热稳定性第32页
     ·游离酶与固定化酶的最适pH值第32页
     ·酸碱稳定性第32-33页
     ·酶的机械操作稳定性第33页
   ·用Box-Behnken设计提高操作稳定性第33-35页
   ·新配方中加酶量对酶活力回收率的影响第35页
   ·操作稳定性实验第35-36页
   ·戊二醛交联防止酶泄漏第36-37页
 4 小结第37-38页
第四章 固定化酶合成低聚半乳糖第38-52页
 1 前言第38页
 2 材料与方法第38-40页
   ·实验材料与试剂第38页
   ·仪器与设备第38页
   ·试验方法第38-40页
     ·苯酚-浓硫酸法第38页
     ·半微量凯氏定氮法第38页
     ·检测指标及检测方法第38-39页
     ·优化GOS合成条件第39-40页
     ·验证实验第40页
     ·放大试验第40页
 3 结果与讨论第40-51页
   ·HPLC法与TLC-苯酚浓硫酸法测定结果的比较第40-41页
   ·固定化酶法合成GOS的条件优化第41-45页
     ·反应时间对GOS合成的影响第41-42页
     ·乳糖浓度对GOS合成的影响第42-43页
     ·反应温度对合成GOS的影响第43-44页
     ·反应体系pH对合成GOS的影响第44页
     ·酶浓度对合成GOS的影响第44-45页
   ·用响应面法设计优化合成GOS的条件第45-51页
     ·以乳糖为底物合成GOS的条件优化第45-48页
     ·以乳清为底物合成GOS的条件优化第48-51页
   ·验证实验第51页
   ·放大试验第51页
 4 小结第51-52页
结论第52-53页
展望第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-60页

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