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鲢鱼卵中高分子CPIs的纯化鉴定及其对Ishikawa细胞影响的初探研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
缩略词第9-12页
1 文献综述与立题依据第12-25页
    1.1 立题依据第12页
    1.2 半胱氨酸蛋白酶第12-13页
    1.3 半胱氨酸蛋白酶抑制因子概述第13-17页
        1.3.1 Stefin(家族Ⅰ)第13-14页
        1.3.2 Cystatin(家族Ⅱ)第14页
        1.3.3 Kininogen(家族Ⅲ)第14-17页
    1.4 鱼类高分子CPIs的研究现状第17-19页
        1.4.1 鱼类高分子CPIs纯化鉴定的研究现状第17-18页
        1.4.2 鱼类高分子CPIs基因克隆的研究现状第18-19页
    1.5 其他动物源高分子CPIs的纯化鉴定第19-20页
    1.6 鱼类高分子CPIs的糖基化结构第20页
    1.7 Kininogen的活性及生理功能第20-24页
        1.7.1 Kininogen的抑制活性及应用第20-22页
        1.7.2 Kininogen的生理功能第22-24页
    1.8 研究目的意义及主要研究内容第24-25页
2 材料与方法第25-44页
    2.1 材料第25-30页
        2.1.1 实验材料第25-26页
        2.1.2 主要仪器设备第26-28页
        2.1.3 主要实验试剂第28-30页
    2.2 方法第30-44页
        2.2.1 CPIs抑制活性的测定第30-32页
        2.2.2 蛋白浓度的测定第32页
        2.2.3 鲢鱼卵中高分子CPIs粗提液的制备第32-33页
        2.2.4 鲢鱼卵中高分子CPIs的纯化第33-35页
        2.2.5 鲢鱼卵中高分子CPIs的鉴定第35-38页
        2.2.6 鲢鱼卵高分子CPIs基本理化性质的鉴定第38-40页
        2.2.7 鲢鱼卵高分子CPI对Ishikawa细胞的影响第40-43页
        2.2.8 数据处理和统计分析第43-44页
3 结果与分析第44-75页
    3.1 鲢鱼卵中高分子CPIs的粗提制备第44-45页
    3.2 鲢鱼卵中高分子CPIs的纯化与鉴定第45-62页
        3.2.1 鲢鱼卵高分子CPIs的SP Sepharose Fast Flow阳离子交换层析第45-46页
        3.2.2 鲢鱼卵高分子CPIs Blue Sepharose 6 Fast Flow染料亲和层析第46-48页
        3.2.3 鲢鱼卵高分子CPIs的Octyl-Sepharose 4 Fast Flow疏水层析第48-53页
        3.2.4 鲢鱼卵高分子CPIs的ConA Sepharose 4B亲和层析第53-62页
    3.3 鲢鱼卵中高分子CPIs的纯化表第62-64页
    3.4 鲢鱼卵中高分子CPIs理化性质的的测定第64-69页
        3.4.1 鲢鱼卵中高分子CPIs的质谱分析第64-65页
        3.4.2 鲢鱼卵中高分子CPIs热稳定性的测定第65-66页
        3.4.3 鲢鱼卵中高分子CPIs pH稳定性的测定第66-67页
        3.4.4 鲢鱼卵中高分子CPIs的抑制常数Ki的测定第67-69页
        3.4.5 鲢鱼卵中高分子CPIs抑制活性类型的测定第69页
    3.5 鲢鱼卵高分子CPI对Ishikawa细胞的影响第69-75页
        3.5.1 鲢鱼卵高分子CPI对Ishikawa细胞增殖能力的影响第69-72页
        3.5.4 鲢鱼卵高分子CPI对Ishikawa细胞基质粘附能力的影响第72页
        3.5.5 Hoechest 33342染色观察高分子CPI对Ishikawa细胞形态的影响第72-73页
        3.5.6 ELISA检测高分子CPI对Ishikawa细胞VEGF-A分泌的影响第73-75页
4 讨论第75-81页
    4.1 关于鲢鱼卵高分子CPIs的纯化鉴定的讨论第75-76页
    4.2 关于鲢鱼卵高分子CPIs家族归属的讨论第76页
    4.3 关于鲢鱼卵高分子CPIs稳定性和活性特征的讨论第76-77页
    4.4 关于鲢鱼卵高分子CPIs抑制常数Ki的讨论第77页
    4.5 关于鲢鱼卵高分子CPIs降解的讨论第77-79页
    4.6 关于鲢鱼卵高分子CPIs的对Ishikawa细胞影响的讨论第79-81页
5 结论第81-82页
参考文献第82-94页
致谢第94-96页
附录第96-101页
攻读硕士期间发表的学术论文第101页

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