摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略词 | 第9-12页 |
1 文献综述与立题依据 | 第12-25页 |
1.1 立题依据 | 第12页 |
1.2 半胱氨酸蛋白酶 | 第12-13页 |
1.3 半胱氨酸蛋白酶抑制因子概述 | 第13-17页 |
1.3.1 Stefin(家族Ⅰ) | 第13-14页 |
1.3.2 Cystatin(家族Ⅱ) | 第14页 |
1.3.3 Kininogen(家族Ⅲ) | 第14-17页 |
1.4 鱼类高分子CPIs的研究现状 | 第17-19页 |
1.4.1 鱼类高分子CPIs纯化鉴定的研究现状 | 第17-18页 |
1.4.2 鱼类高分子CPIs基因克隆的研究现状 | 第18-19页 |
1.5 其他动物源高分子CPIs的纯化鉴定 | 第19-20页 |
1.6 鱼类高分子CPIs的糖基化结构 | 第20页 |
1.7 Kininogen的活性及生理功能 | 第20-24页 |
1.7.1 Kininogen的抑制活性及应用 | 第20-22页 |
1.7.2 Kininogen的生理功能 | 第22-24页 |
1.8 研究目的意义及主要研究内容 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-44页 |
2.1 材料 | 第25-30页 |
2.1.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第26-28页 |
2.1.3 主要实验试剂 | 第28-30页 |
2.2 方法 | 第30-44页 |
2.2.1 CPIs抑制活性的测定 | 第30-32页 |
2.2.2 蛋白浓度的测定 | 第32页 |
2.2.3 鲢鱼卵中高分子CPIs粗提液的制备 | 第32-33页 |
2.2.4 鲢鱼卵中高分子CPIs的纯化 | 第33-35页 |
2.2.5 鲢鱼卵中高分子CPIs的鉴定 | 第35-38页 |
2.2.6 鲢鱼卵高分子CPIs基本理化性质的鉴定 | 第38-40页 |
2.2.7 鲢鱼卵高分子CPI对Ishikawa细胞的影响 | 第40-43页 |
2.2.8 数据处理和统计分析 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-75页 |
3.1 鲢鱼卵中高分子CPIs的粗提制备 | 第44-45页 |
3.2 鲢鱼卵中高分子CPIs的纯化与鉴定 | 第45-62页 |
3.2.1 鲢鱼卵高分子CPIs的SP Sepharose Fast Flow阳离子交换层析 | 第45-46页 |
3.2.2 鲢鱼卵高分子CPIs Blue Sepharose 6 Fast Flow染料亲和层析 | 第46-48页 |
3.2.3 鲢鱼卵高分子CPIs的Octyl-Sepharose 4 Fast Flow疏水层析 | 第48-53页 |
3.2.4 鲢鱼卵高分子CPIs的ConA Sepharose 4B亲和层析 | 第53-62页 |
3.3 鲢鱼卵中高分子CPIs的纯化表 | 第62-64页 |
3.4 鲢鱼卵中高分子CPIs理化性质的的测定 | 第64-69页 |
3.4.1 鲢鱼卵中高分子CPIs的质谱分析 | 第64-65页 |
3.4.2 鲢鱼卵中高分子CPIs热稳定性的测定 | 第65-66页 |
3.4.3 鲢鱼卵中高分子CPIs pH稳定性的测定 | 第66-67页 |
3.4.4 鲢鱼卵中高分子CPIs的抑制常数Ki的测定 | 第67-69页 |
3.4.5 鲢鱼卵中高分子CPIs抑制活性类型的测定 | 第69页 |
3.5 鲢鱼卵高分子CPI对Ishikawa细胞的影响 | 第69-75页 |
3.5.1 鲢鱼卵高分子CPI对Ishikawa细胞增殖能力的影响 | 第69-72页 |
3.5.4 鲢鱼卵高分子CPI对Ishikawa细胞基质粘附能力的影响 | 第72页 |
3.5.5 Hoechest 33342染色观察高分子CPI对Ishikawa细胞形态的影响 | 第72-73页 |
3.5.6 ELISA检测高分子CPI对Ishikawa细胞VEGF-A分泌的影响 | 第73-75页 |
4 讨论 | 第75-81页 |
4.1 关于鲢鱼卵高分子CPIs的纯化鉴定的讨论 | 第75-76页 |
4.2 关于鲢鱼卵高分子CPIs家族归属的讨论 | 第76页 |
4.3 关于鲢鱼卵高分子CPIs稳定性和活性特征的讨论 | 第76-77页 |
4.4 关于鲢鱼卵高分子CPIs抑制常数Ki的讨论 | 第77页 |
4.5 关于鲢鱼卵高分子CPIs降解的讨论 | 第77-79页 |
4.6 关于鲢鱼卵高分子CPIs的对Ishikawa细胞影响的讨论 | 第79-81页 |
5 结论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-94页 |
致谢 | 第94-96页 |
附录 | 第96-101页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第101页 |