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泸州老窖不同窖龄窖泥中细菌及古菌种群多样性和系统发育研究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
第一章 文献综述第11-22页
    1.1 引言第11-12页
    1.2 浓香型白酒窖池微生态研究进展第12-16页
        1.2.1 泸州老窖窖泥中功能菌研究进展第12-14页
        1.2.2 酒曲中微生物的研究进展第14-15页
        1.2.3 糟醅微生物研究进展第15-16页
    1.3 分子生物学技术在微生物多样性研究中的应用第16-21页
        1.3.1 DGGE/TGGE技术第17-18页
        1.3.2 16S rDNA文库构建第18-19页
        1.3.3 ARDRA技术的应用第19页
        1.3.4 宏基因组学技术(Metagenomics)第19-21页
    1.4 本论文的研究目的、意义和主要内容第21-22页
第二章 不同窖龄窖泥细菌种群多样性第22-55页
    2.1 材料和方法第22-27页
        2.1.1 窖泥样品第22-23页
        2.1.2 DNA提取第23-24页
        2.1.3 不同窖龄窖泥中细菌的PCR-DGGE分析第24-25页
        2.1.4 不同窖龄窖泥中细菌16S rDNA基因文库的构建第25-27页
    2.2 结果与分析第27-50页
        2.2.1 DNA提取第27-28页
        2.2.2 不同窖龄窖泥中细菌的PCR-DGGE分析第28-33页
        2.2.3 不同窖龄窖泥中细菌16S rDNA基因文库的构建第33-50页
    2.3 讨论第50-55页
第三章 不同窖龄窖泥古菌16S rDNA基因文库构建第55-71页
    3.1 实验方法第55-56页
        3.1.1 古菌16S rDNA PCR扩增第55页
        3.1.2 16S rDNA PCR产物纯化第55页
        3.1.3 16S rDNA产物的连接反应第55页
        3.1.4 转化第55-56页
        3.1.5 克隆子检测第56页
        3.1.6 限制性内切酶酶切第56页
        3.1.7 克隆子文库的酶切分析第56页
        3.1.8 文库的评估及统计分析第56页
    3.2 结果与分析第56-69页
        3.2.1 古菌16S rDNA PCR扩增及纯化第56页
        3.2.2 古菌文库构建与酶切分析第56-58页
        3.2.3 古菌文库评价第58-59页
        3.2.4 古菌群落结构及其系统发育多样性第59-69页
    3.3 讨论第69-71页
第四章 不同窖龄窖泥中几种功能菌的PCR-DGGE分析第71-101页
    4.1 不同窖龄窖泥中产甲烷古菌的PCR-DGGE分析第71-72页
        4.1.1 产甲烷古菌PCR扩增第71-72页
        4.1.2 产甲烷古菌的DGGE分析第72页
        4.1.3 产甲烷古菌DGGE图谱分析第72页
    4.2 不同窖龄窖泥中乳酸菌的PCR-DGGE分析第72-73页
        4.2.1 窖泥中乳酸菌的PCR扩增第72-73页
        4.2.2 乳酸菌的DGGE分析第73页
        4.2.3 乳酸菌DGGE图谱分析第73页
    4.3 不同窖龄窖泥中己酸菌的PCR-DGGE分析第73-74页
        4.3.1 己酸菌PCR扩增第73-74页
        4.3.2 己酸菌DGGE分析和代表性菌株克隆测序第74页
        4.3.3 己酸菌DGGE图谱分析第74页
    4.4 不同窖龄窖泥中甲烷氧化菌的PCR-DGGE分析第74-76页
        4.4.1 Ⅰ型甲烷氧化菌第74-75页
        4.4.2 Ⅱ型甲烷氧化菌第75-76页
    4.5 结果与分析第76-97页
        4.5.1 不同窖龄窖泥中产甲烷古菌的PCR-DGGE分析第76-81页
        4.5.2 不同窖龄窖泥中乳酸菌的PCR-DGGE分析第81-85页
        4.5.3 不同窖龄窖泥中己酸菌的PCR-DGGE分析第85-90页
        4.5.4 不同窖龄窖泥中甲烷氧化菌的PCR-DGGE分析第90-97页
    4.6 讨论第97-101页
第五章 基于高通量测序的不同窖龄窖泥中细菌及古菌群落多样性分析第101-121页
    5.1 不同窖龄窖泥中细菌群落多样性分析第101-104页
        5.1.1 窖泥样品第101页
        5.1.2 Miseq测序流程第101-103页
        5.1.3 测序数据统计及优化第103页
        5.1.4 样品多样性及丰富度分析第103页
        5.1.5 细菌群落多样性分析第103-104页
    5.2 不同窖龄窖底泥中古菌群落多样性分析第104-106页
        5.2.1 窖底泥样品及编号第104页
        5.2.2 Roche 454高通量测序流程第104-105页
        5.2.3 测序数据统计及优化第105页
        5.2.4 样品多样性及丰富度分析第105-106页
        5.2.5 古菌群落多样性分析第106页
    5.3 结果及分析第106-118页
        5.3.1 细菌群落多样性分析第106-112页
        5.3.2 古菌群落多样性分析第112-118页
    5.4 讨论第118-121页
第六章 全文结论、创新及展望第121-124页
    6.1 全文结论第121-123页
    6.2 创新点第123页
    6.3 展望第123-124页
参考文献第124-143页
致谢第143-144页
附录第144-156页
攻读学位期间发表论文及专利情况第156页

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