| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-22页 |
| ·低醇啤酒的概念、研究意义、国内外概况 | 第10-14页 |
| ·低醇啤酒的概念及研究的意义 | 第10-11页 |
| ·低醇啤酒国内外研究概况 | 第11-14页 |
| ·乙醇脱氢酶的研究概况 | 第14-16页 |
| ·乙醇脱氢酶 | 第14页 |
| ·乙醇脱氢酶的应用 | 第14-16页 |
| ·基因敲除技术在菌株改造上的研究 | 第16-20页 |
| ·标记基因的应用及剔除 | 第16-18页 |
| ·酿酒酵母的遗传转化系统 | 第18-19页 |
| ·基因敲除 | 第19-20页 |
| ·本论文研究的目的及意义 | 第20-22页 |
| ·本论文研究的目的 | 第20-21页 |
| ·本论文的意义 | 第21-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-43页 |
| ·实验材料 | 第22-27页 |
| ·供试菌株 | 第22页 |
| ·质粒 | 第22-23页 |
| ·仪器设备 | 第23-24页 |
| ·实验药品及配制 | 第24-26页 |
| ·培养基及配制 | 第26页 |
| ·引物 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-43页 |
| ·枯草芽孢杆菌（B.sub）中BADHⅠ基因的克隆 | 第27-31页 |
| ·重组质粒DNA pYC6/CT- BADHⅠ的构建 | 第31-34页 |
| ·ΔADHⅠ酿酒酵母菌株的获得 | 第34-37页 |
| ·恢复突变酵母的获得 | 第37-38页 |
| ·HDY-01酵母、ΔADHⅠ酵母、BADHⅠ-ΔADHⅠ酵母酶活力测定 | 第38-39页 |
| ·遗传稳定性试验 | 第39页 |
| ·HDY-01酵母、ΔADHⅠ酵母、BADHⅠ-ΔADHⅠ酵母发酵实验 | 第39-43页 |
| 第3章 结果与分析 | 第43-73页 |
| ·BADHⅠ基因的获得结果 | 第43-46页 |
| ·枯草芽孢杆菌 DNA 提取结果 | 第43-44页 |
| ·PCR 扩增 B.sub 基因组中的 BADHⅠ基因结果 | 第44页 |
| ·BADHⅠ基因片段纯化结果 | 第44-45页 |
| ·连接产物pGMT-BADHⅠ转化大肠杆菌感受态细胞 DH5α结果 | 第45页 |
| ·pGMT-BADHⅠ质粒提取结果 | 第45-46页 |
| ·PCR 验证pGMT-BADHⅠ质粒转化 DH5α结果 | 第46页 |
| ·表达载体pYC6/CT- BADHⅠ的构建结果 | 第46-49页 |
| ·pGMT-BADHⅠ的 XbaⅠ酶切结果 | 第47页 |
| ·pYC6/CT 的 XbaⅠ酶切结果 | 第47-48页 |
| ·pYC6/CT-BADHⅠ转化 E.coli DH5α结果 | 第48页 |
| ·pYC6/CT-BADHⅠ质粒提取及 XbaⅠ酶切验证结果 | 第48-49页 |
| ·ΔADHⅠ酵母菌株的获得结果 | 第49-52页 |
| ·pCAMBIA 质粒的获得结果 | 第49页 |
| ·带有潮霉素筛选标记的同源重组片段的获得 | 第49-50页 |
| ·潮霉素杀伤曲线结果 | 第50-51页 |
| ·PCR 产物直接转化酵母菌结果 | 第51-52页 |
| ·Blasticidin 抑菌浓度的测定结果 | 第52-54页 |
| ·Blasticidin 抑菌浓度的测定结果 | 第52页 |
| ·pYC6/CT-BADHⅠ质粒转化ΔADHⅠ酵母菌结果 | 第52-53页 |
| ·重组子 PCR 验证结果 | 第53-54页 |
| ·HDY-01 酵母、ΔADHⅠ酵母、BADHⅠ-ΔADHⅠ酵母酶活力测定结果 | 第54页 |
| ·遗传稳定性试验结果 | 第54-56页 |
| ·传代菌株抗性检测结果 | 第54-55页 |
| ·传代菌株 ADHⅠ酶活力测定结果 | 第55-56页 |
| ·发酵参数测定 | 第56-73页 |
| ·乙醛测定结果 | 第56-57页 |
| ·乙醇测定结果 | 第57-59页 |
| ·残糖测定结果 | 第59-60页 |
| ·悬浮酵母数测定结果 | 第60-61页 |
| ·双乙酰含量测定结果 | 第61-62页 |
| ·二甲基硫测定结果 | 第62-63页 |
| ·甲酸乙酯测定结果 | 第63-65页 |
| ·乙酸乙酯测定结果 | 第65-66页 |
| ·正丙醇测含量定结果 | 第66-67页 |
| ·异丁醇测定结果 | 第67-68页 |
| ·乙酸异戊酯测定结果 | 第68-70页 |
| ·异戊醇测定结果 | 第70-73页 |
| 第4章 讨论 | 第73-79页 |
| ·ADH 基因的克隆及重组质粒的构建 | 第73-74页 |
| ·实验所用的表达系统 | 第74-76页 |
| ·宿主细胞的选择 | 第74页 |
| ·表达载体的选择 | 第74-75页 |
| ·关于基因敲除技术在菌株改造上的讨论 | 第75-76页 |
| ·实验方法的讨论 | 第76页 |
| ·关于 ADH 基因的克隆 | 第76页 |
| ·关于表达宿主的构建 | 第76页 |
| ·关于基因敲除 | 第76页 |
| ·关于结果的讨论 | 第76-79页 |
| ·酶活力测定结果 | 第76-77页 |
| ·乙醇测定结果 | 第77页 |
| ·乙醛测定结果 | 第77页 |
| ·双乙酰测定结果 | 第77-79页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
