摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
1 引言 | 第10-26页 |
·立体背景及意义 | 第10-11页 |
·沙门氏菌菌简介 | 第11-14页 |
·沙门氏菌生物学性状 | 第11-12页 |
·沙门氏菌的抗原结构与分类 | 第12页 |
·沙门氏菌的致病因子 | 第12-13页 |
·沙门氏菌致病性及临床表现 | 第13-14页 |
·沙门氏菌的检测方法及研究现状 | 第14-17页 |
·沙门氏菌传统检测方法 | 第14-16页 |
·以免疫学为基础的检测方法 | 第16页 |
·以分子生物学为基础的方法 | 第16-17页 |
·环介导等温扩增(LAMP)技术 | 第17-25页 |
·LAMP 法的概述 | 第17页 |
·LAMP 法的特点 | 第17-18页 |
·LAMP 法的引物设计 | 第18-19页 |
·LAMP 法的基本原理 | 第19-22页 |
·LAMP 法产物的检测方法 | 第22-23页 |
·LAMP 法的应用 | 第23-25页 |
·研究内容 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-35页 |
·试验材料 | 第26-27页 |
·试验菌株 | 第26页 |
·主要培养基 | 第26页 |
·仪器与设备 | 第26-27页 |
·样品与生化试剂 | 第27页 |
·试验方法 | 第27-28页 |
·沙门氏菌培养 | 第27-28页 |
·沙门氏菌基因组DNA 的提取 | 第28页 |
·LAMP 引物设计及主要操作程序 | 第28-30页 |
·引物设计 | 第28-29页 |
·LAMP 和PCR 反应体系 | 第29页 |
·LAMP 和PCR 操作程序 | 第29-30页 |
·LAMP 反应条件优化 | 第30-31页 |
·适宜 M92+浓度选择 | 第30页 |
·dNTPs 浓度的优化 | 第30页 |
·反应温度的优化 | 第30页 |
·反应时间的优化 | 第30页 |
·BST 酶的优化 | 第30页 |
·甜菜碱对 LAMP 反应的影响 | 第30-31页 |
·引物特异性的研究 | 第31页 |
·沙门氏菌的灵敏度检测 | 第31页 |
·LAMP 反应灵敏度 | 第31页 |
·PCR 反应灵敏度 | 第31页 |
·LAMP 扩增产物的分析 | 第31-32页 |
·LAMP 产物的可视结果分析 | 第31页 |
·LAMP 产物的凝胶成像分析 | 第31页 |
·LAMP 产物的荧光分析 | 第31-32页 |
·LAMP 检测人工污染的沙门氏菌DNA 提取方法比较 | 第32-34页 |
·苯酚-氯仿抽提法 | 第32页 |
·普通热裂解法 | 第32页 |
·FTA 滤膜法 | 第32-33页 |
·试剂盒法 | 第33页 |
·蛋白酶K 法 | 第33页 |
·FDA 提取DNA 法 | 第33-34页 |
·沙门氏菌人工污染鲜肉的检出限 | 第34-35页 |
·人工污染鲜肉及模板DNA 的制备 | 第34页 |
·LAMP 法检测人工污染沙门氏菌样品的检出限 | 第34页 |
·PCR 法检测人工污染样品的检出限 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-45页 |
·LAMP 反应条件的优化 | 第35-39页 |
·Mg~(2+)浓度的优化 | 第35页 |
·dNTPs 浓度的优化 | 第35-36页 |
·反应温度的优化 | 第36页 |
·反应时间的优化 | 第36-37页 |
·BST 酶的优化 | 第37-38页 |
·甜菜碱对LAMP 反应的影响 | 第38-39页 |
·引物特异性的研究 | 第39页 |
·沙门氏菌的灵敏度检测结果 | 第39-40页 |
·LAMP 检测沙门氏菌的灵敏度 | 第39-40页 |
·PCR 检测沙门氏菌的灵敏度 | 第40页 |
·LAMP 扩增产物的分析 | 第40-42页 |
·LAMP 产物的可视结果分析 | 第40-41页 |
·LAMP 扩增产物的电泳分析 | 第41页 |
·LAMP 产物的荧光分析 | 第41-42页 |
·LAMP 检测人工污染的沙门氏菌DNA 提取方法比较 | 第42页 |
·LAMP 检测人工污染的沙门氏菌样品检出限的确定 | 第42-43页 |
·PCR 检测人工污染肉中沙门氏菌的检出限 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-48页 |
·环介导等温扩增(LAMP)方法检测沙门沙门氏菌方法学评价 | 第45页 |
·靶基因的选择 | 第45-46页 |
·LAMP 引物的确定 | 第46页 |
·LAMP 体系优化 | 第46-47页 |
·LAMP 检测的防污染措施 | 第47-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
硕士期间发表学术论文 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |