NO和冷信号对桃果实鞘脂代谢的调控作用
| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-21页 |
| 1.1 鞘脂概述 | 第13-17页 |
| 1.1.1 鞘脂的结构与分类 | 第13-14页 |
| 1.1.2 鞘脂的代谢途径 | 第14-15页 |
| 1.1.3 鞘脂代谢关键酶 | 第15-16页 |
| 1.1.4 鞘脂生物功能 | 第16-17页 |
| 1.1.5 磷脂酶D | 第17页 |
| 1.2 NO与冷信号 | 第17-20页 |
| 1.2.1 低温对植物的影响 | 第17-18页 |
| 1.2.2 NO在植物中的作用 | 第18-19页 |
| 1.2.3 NO和冷响应 | 第19-20页 |
| 1.3 研究内容及意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.2 试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 主要溶液、缓冲液及培养基的配置 | 第22-24页 |
| 2.1.4 实验菌株及质粒 | 第24页 |
| 2.1.5 实验材料 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-37页 |
| 2.2.1 桃果实PLDα基因的生物学分析 | 第24-25页 |
| 2.2.2 体外重组PLDα蛋白 | 第25-31页 |
| 2.2.3 NO和冷信号对PLDα基因表达的影响 | 第31-32页 |
| 2.2.4 NO和冷信号对鞘脂代谢关键酶的影响 | 第32-35页 |
| 2.2.5 NO和冷信号对鞘脂代谢中间产物的影响 | 第35-36页 |
| 2.2.6 数据处理 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-58页 |
| 3.1 PLDα生物学分析 | 第37-41页 |
| 3.1.1 PLDα蛋白二级结构预测 | 第37-38页 |
| 3.1.2 PLDα蛋白三级结构预测 | 第38页 |
| 3.1.3 PLDα蛋白修饰位点预测 | 第38-39页 |
| 3.1.4 蛋白质理化性质分析 | 第39页 |
| 3.1.5 PLDα蛋白序列和系统进化分析 | 第39-41页 |
| 3.2 体外重组PLDα蛋白 | 第41-45页 |
| 3.2.1 桃果实总RNA的提取及完整性检测 | 第41-42页 |
| 3.2.2 引物最佳淬火温度筛选 | 第42页 |
| 3.2.3 PLDα克隆载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.2.4 PLDα蛋白表达 | 第43-45页 |
| 3.3 NO和冷信号对PLDα基因表达量的影响 | 第45-46页 |
| 3.4 NO和冷信号对鞘脂代谢关键酶的影响 | 第46-53页 |
| 3.4.1 桃果实中PLA、PLC、PLD活性 | 第46-48页 |
| 3.4.2 桃果实中AP、ALP活性 | 第48-50页 |
| 3.4.3 桃果实中3KSR活性 | 第50页 |
| 3.4.4 桃果实中SPHK活性 | 第50-51页 |
| 3.4.5 桃果实中CERS活性 | 第51-52页 |
| 3.4.6 桃果实中CERK活性 | 第52页 |
| 3.4.7 桃果实中SMS活性 | 第52-53页 |
| 3.5 NO和冷信号对鞘脂含量的影响 | 第53-58页 |
| 3.5.1 桃果实中CER含量 | 第53-54页 |
| 3.5.2 桃果实中SPH含量 | 第54-55页 |
| 3.5.3 桃果实中SM含量 | 第55页 |
| 3.5.4 桃果实中S1P含量 | 第55-56页 |
| 3.5.5 桃果实中C1P含量 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-61页 |
| 4.1 桃果实PLDα蛋白表达及生物学分析 | 第58页 |
| 4.2 NO和冷信号对PLDα基因表达的调控作用 | 第58-59页 |
| 4.3 NO和冷信号对鞘脂信号分子的调控作用 | 第59-60页 |
| 4.4 NO和冷信号对鞘脂代谢水平的影响 | 第60-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 6 创新之处 | 第62-63页 |
| 7 参考文献 | 第63-73页 |
| 8 致谢 | 第73-74页 |
| 9 硕士期间论文发表情况 | 第74页 |
