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酶解制备贻贝抗血栓肽及其作用机制初探

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第1章 绪论第11-24页
    1.1 课题背景及研究的目的和意义第11-12页
    1.2 贻贝简介第12-15页
        1.2.1 贻贝的生长及分布第12-13页
        1.2.2 贻贝的化学成分及营养价值第13-14页
        1.2.3 贻贝的医学价值第14-15页
        1.2.4 贻贝的开发利用现状第15页
    1.3 抗血栓肽的研究第15-21页
        1.3.1 抗血栓肽的概念第16页
        1.3.2 血栓形成及抗血栓机制第16-19页
        1.3.3 抗血栓活性测定方法第19-20页
        1.3.4 抗血栓肽的研究进展第20-21页
    1.4 研究内容及技术路线第21-24页
        1.4.1 研究内容第21-23页
        1.4.2 技术路线第23-24页
第2章 材料与方法第24-36页
    2.1 实验材料及仪器第24-26页
        2.1.1 材料与试剂第24-25页
        2.1.2 实验仪器第25-26页
    2.2 实验方法第26-35页
        2.2.1 水解度测定第26-27页
        2.2.2 蛋白质浓度测定第27页
        2.2.3 酶解工艺优化第27-29页
        2.2.4 水解产物的分子量分布第29-30页
        2.2.5 凝血酶抑制率测定第30-31页
        2.2.6 凝血四项指标测定第31-32页
        2.2.7 UPLC-Q-TOF法鉴定多肽序列第32-33页
        2.2.8 分子对接第33-34页
        2.2.9 HPLC法对多肽的纯度鉴定第34页
        2.2.10 等温滴定量热法第34页
        2.2.11 傅里叶变换红外光谱分析第34页
        2.2.12 贻贝酶解多肽的生物信息学分析第34-35页
    2.3 统计学及绘图第35-36页
第3章 贻贝酶解条件优化及酶解产物活性分析第36-49页
    3.1 引言第36页
    3.2 酶种类及酶解时间的确定第36-39页
        3.2.1 酶解时间对贻贝蛋白水解度的影响第36-37页
        3.2.2 酶解时间对蛋白浓度的影响第37页
        3.2.3 酶种类对凝血酶抑制活性的影响第37-38页
        3.2.4 酶种类对蛋白分子量分布的影响第38-39页
    3.3 贻贝胰蛋白酶酶解工艺优化第39-43页
        3.3.1 单因素实验结果第39-42页
        3.3.2 正交实验结果第42-43页
    3.4 最佳正交酶解样品分析第43-47页
        3.4.1 分子量分布情况第43-45页
        3.4.2 Maldi-Tof图谱分析第45-46页
        3.4.3 凝血四项指标分析第46-47页
    3.5 本章小结第47-49页
第4章 贻贝多肽序列鉴定及抗血栓活性预测第49-60页
    4.1 引言第49页
    4.2 最佳酶解产物多肽序列鉴定第49-52页
    4.3 多肽的抗血栓活性预测第52-59页
        4.3.1 多肽与凝血酶的分子对接结合能第52-55页
        4.3.2 多肽的同源性比对第55页
        4.3.3 多肽与凝血酶的相互作用分析第55-58页
        4.3.4 多肽构效关系分析第58-59页
    4.4 本章小结第59-60页
第5章 贻贝抗血栓肽的活性及其作用机制初探第60-74页
    5.1 引言第60页
    5.2 抗血栓肽的合成鉴定第60-63页
        5.2.1 Peptide 26 (KNAENELGEVTVR)的鉴定第60-61页
        5.2.2 Peptide 36 (NAESLRK)的鉴定第61-63页
    5.3 抗血栓肽红外光谱分析第63-64页
    5.4 抗血栓肽凝血酶抑制活性分析第64-65页
    5.5 抗血栓肽抗血栓途径分析第65-69页
        5.5.1 活化部分凝血活酶时间测定第65-66页
        5.5.2 凝血酶原时间测定第66-67页
        5.5.3 凝血酶时间测定第67-68页
        5.5.4 纤维蛋白原含量测定第68-69页
    5.6 抗血栓肽与凝血酶的相互作用第69-72页
        5.6.1 Peptide 26 (KNAENELGEVTVR)滴定凝血酶第70-71页
        5.6.2 Peptide 36 (NAESLRK)滴定凝血酶第71-72页
    5.7 本章小结第72-74页
结论第74-76页
参考文献第76-84页
攻读硕士学位期间发表的论文及其他成果第84-87页
致谢第87页

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