| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-34页 |
| 1.1 糖蛋白研究概述 | 第12-13页 |
| 1.2 糖蛋白提取研究进展 | 第13-18页 |
| 1.2.1 糖蛋白的提取 | 第13-16页 |
| 1.2.2 糖蛋白的结构研究 | 第16-18页 |
| 1.3 糖蛋白活性功能研究进展 | 第18-21页 |
| 1.3.1 糖蛋白抗肿瘤活性研究 | 第18-20页 |
| 1.3.2 糖蛋白抗氧化活性研究 | 第20-21页 |
| 1.3.3 糖蛋白其他活性研究 | 第21页 |
| 1.4 油茶研究进展 | 第21-24页 |
| 1.4.1 油茶籽油的开发利用 | 第21-22页 |
| 1.4.2 油茶粕开发利用现状 | 第22-24页 |
| 1.5 本课题的立题背景和意义 | 第24-25页 |
| 1.6 本课题的主要研究内容 | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-34页 |
| 第二章 油茶籽粗糖蛋白的提取及其体外抗肿瘤、抗氧化活性 | 第34-50页 |
| 2.1 前言 | 第34-35页 |
| 2.2 材料与方法 | 第35-39页 |
| 2.2.1 主要材料与试剂 | 第35页 |
| 2.2.2 主要设备 | 第35页 |
| 2.2.3 缓冲溶液提取油茶籽糖蛋白工艺条件优化 | 第35-36页 |
| 2.2.4 水提醇沉法提取油茶籽糖蛋白工艺条件优化 | 第36页 |
| 2.2.5 糖和蛋白含量、得率的测定 | 第36-37页 |
| 2.2.6 油茶籽粗糖蛋白体外抗肿瘤活性测定 | 第37页 |
| 2.2.7 油茶籽粗糖蛋白体外抗氧化活性测定 | 第37-39页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第39-47页 |
| 2.3.1 响应面优化缓冲溶液提取法实验结果 | 第39-42页 |
| 2.3.2 响应面优化水提法实验结果 | 第42-44页 |
| 2.3.3 油茶籽粗糖蛋白的体外抗肿瘤活性 | 第44-46页 |
| 2.3.4 油茶籽粗糖蛋白的体外自由基清除能力 | 第46-47页 |
| 2.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-50页 |
| 第三章 油茶籽糖蛋白的分离纯化及其活性组分筛选 | 第50-64页 |
| 3.1 前言 | 第50页 |
| 3.2 材料与方法 | 第50-54页 |
| 3.2.1 主要材料与试剂 | 第50页 |
| 3.2.2 主要设备 | 第50-51页 |
| 3.2.3 DEAE Sepharose F.F.柱层析分离纯化油茶籽粗糖蛋白 | 第51页 |
| 3.2.4 Sephadex G-100 柱层析分离纯化油茶籽粗糖蛋白 | 第51页 |
| 3.2.5 AKTA 蛋白质分离纯化仪分离纯化油茶籽糖蛋白 | 第51页 |
| 3.2.6 分离纯化后各组分的抗肿瘤与抗氧化活性测定 | 第51-52页 |
| 3.2.7 COGP2a 系列定性检测 | 第52页 |
| 3.2.8 SDS-PAGE 电泳检测 | 第52-53页 |
| 3.2.9 COGP2a 纯度及分子量测定 | 第53页 |
| 3.2.10 COGP2a 的 DSC 测定 | 第53页 |
| 3.2.11 COGP2a 比旋度测定 | 第53页 |
| 3.2.12 统计处理 | 第53-54页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第54-62页 |
| 3.3.1 油茶籽粗糖蛋白离子交换柱层析分离纯化及活性组分筛选 | 第54-56页 |
| 3.3.2 油茶籽糖蛋白 COGY2 的凝胶柱分离纯化及其活性组分筛选 | 第56-58页 |
| 3.3.3 蛋白质分离纯化仪分离纯化 COGY2a | 第58-59页 |
| 3.3.4 油茶籽糖蛋白 COGP2a 系列定性检测 | 第59页 |
| 3.3.5 油茶籽糖蛋白 COGP2a 的 SDS-PAGE 电泳检测 | 第59-60页 |
| 3.3.6 油茶籽糖蛋白 COGP2a 纯度及分子量测定 | 第60-61页 |
| 3.3.7 油茶籽糖蛋白 COGP2a 的 DSC 测定 | 第61-62页 |
| 3.3.8 油茶籽糖蛋白 COGP2a 比旋度测定 | 第62页 |
| 3.4 本章结论 | 第62页 |
| 参考文献 | 第62-64页 |
| 第四章 油茶籽糖蛋白 COGP2a 的结构分析 | 第64-74页 |
| 4.1 前言 | 第64页 |
| 4.2 材料与方法 | 第64-66页 |
| 4.2.1 主要材料与试剂 | 第64页 |
| 4.2.2 主要设备 | 第64页 |
| 4.2.3 COGP2a 中蛋白含量及氨基酸组成分析 | 第64-65页 |
| 4.2.4 油茶籽糖蛋白 COGP2a 中糖含量及单糖组成分析 | 第65页 |
| 4.2.5 COGP2a 糖肽键特征分析 | 第65页 |
| 4.2.6 刚果红试验 | 第65页 |
| 4.2.7 COGP2a 红外光谱分析 | 第65-66页 |
| 4.2.8 COGP2a 圆二色谱分析 | 第66页 |
| 4.2.9 COGP2a 的 LC-Q-TOF-MS-MS 分析 | 第66页 |
| 4.3 结果与分析 | 第66-72页 |
| 4.3.1 COGP2a 中蛋白含量及氨基酸组成分析 | 第66-67页 |
| 4.3.2 油茶籽糖蛋白 COGP2a 中糖含量及单糖组成分析 | 第67页 |
| 4.3.3 油茶籽糖蛋白 COGP2a 糖肽键特征分析 | 第67-68页 |
| 4.3.4 刚果红试验 | 第68-69页 |
| 4.3.5 COGP2a 红外光谱分析 | 第69页 |
| 4.3.6 COGP2a 圆二色谱分析 | 第69-70页 |
| 4.3.7 COGP2a 的 LC-Q-TOF-MS-MS 分析 | 第70-72页 |
| 4.4 本章小结 | 第72页 |
| 参考文献 | 第72-74页 |
| 第五章 油茶籽糖蛋白 COGP2a 对 HepG2 肿瘤细胞的凋亡作用 | 第74-88页 |
| 5.1 前言 | 第74页 |
| 5.2 材料与方法 | 第74-78页 |
| 5.2.1 原料与试剂 | 第74-75页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第75页 |
| 5.2.3 MTT 法实验 | 第75页 |
| 5.2.4 Hoechst33258 染色检测细胞凋亡 | 第75-76页 |
| 5.2.5 电镜检测细胞形态 | 第76页 |
| 5.2.6 Annexin-V FITC/PI 双染法检测细胞凋亡 | 第76页 |
| 5.2.7 PI 单染法检测细胞周期 | 第76页 |
| 5.2.8 JC-1 染色法检测线粒体膜电位 | 第76-77页 |
| 5.2.10 Western blot 检测 Caspase-3 蛋白表达的变化 | 第77-78页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第78-86页 |
| 5.3.1 MTT 法检测 COGP2a 对 HepG2 肿瘤细胞的凋亡作用 | 第78-79页 |
| 5.3.2 Hoechst33258 染色检测 COGP2a 对 HepG2 细胞 DNA 作用 | 第79页 |
| 5.3.3 电镜观察 COGP2a 诱导 HepG2 肿瘤细胞微观形态变化 | 第79-80页 |
| 5.3.4 Annexin V-FITC/PI 双染法检测 HepG2 细胞的凋亡状态 | 第80-82页 |
| 5.3.5 PI 单染法检测 COGP2a 对 HepG2 细胞周期的影响 | 第82-83页 |
| 5.3.6 JC-1 染色法检测 HepG2 细胞线粒体膜电位的变化 | 第83-84页 |
| 5.3.7 COGP2 对 HepG2 细胞中 Caspase-3 表达的影响 | 第84-86页 |
| 5.4 本章小结 | 第86页 |
| 参考文献 | 第86-88页 |
| 第六章 油茶籽糖蛋白 COGP2a 对荷瘤小鼠的体内抗肿瘤作用 | 第88-98页 |
| 6.1 前言 | 第88页 |
| 6.2 材料与方法 | 第88-91页 |
| 6.2.1 材料与试剂 | 第88-89页 |
| 6.2.2 主要仪器 | 第89页 |
| 6.2.3 动物模型的建立 | 第89页 |
| 6.2.4 组别及给样方案 | 第89页 |
| 6.2.5 评价指标 | 第89-90页 |
| 6.2.6 统计处理 | 第90-91页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第91-96页 |
| 6.3.1 COGP2a 对 H22 肝癌 ICR 小鼠肿瘤生长的抑制作用 | 第91-92页 |
| 6.3.2 COGP2a 对荷瘤小鼠免疫器官的影响 | 第92页 |
| 6.3.3 COGP2a 对荷瘤小鼠外周围血白细胞数和淋巴细胞数的影响 | 第92-93页 |
| 6.3.4 COGP2a 对荷瘤小鼠 CD3\CD4\CD8 和干扰素-γ的影响 | 第93-94页 |
| 6.3.5 COGP2a 对荷瘤小鼠肿瘤组织中 Bcl-2 和 Bax 蛋白表达影响 | 第94-95页 |
| 6.3.6 H22 肝癌小鼠肿瘤组织病理学观察 | 第95-96页 |
| 6.4 本章小结 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-98页 |
| 第七章 油茶籽糖蛋白 COGP2a 体内抗氧化作用研究 | 第98-108页 |
| 7.1 前言 | 第98页 |
| 7.2 材料与方法 | 第98-101页 |
| 7.2.1 主要材料 | 第98-99页 |
| 7.2.2 主要试剂 | 第99页 |
| 7.2.3 主要仪器 | 第99页 |
| 7.2.4 动物模型的建立 | 第99页 |
| 7.2.5 组别及给样方案 | 第99页 |
| 7.2.6 评定指标 | 第99-101页 |
| 7.2.7 统计处理 | 第101页 |
| 7.3 结果与讨论 | 第101-106页 |
| 7.3.1 COGP2a 对小鼠体重、胸腺指数和脾脏指数的影响 | 第101-102页 |
| 7.3.2 COGP2a 对小鼠血液和肝脏组织中 MDA 含量的影响 | 第102-103页 |
| 7.3.3 COGP2a 对小鼠血液和肝脏组织中 GSH-PX 活性的影响 | 第103-104页 |
| 7.3.4 COGP2a 对小鼠血液和肝脏组织中 SOD 活性的影响 | 第104页 |
| 7.3.5 COGP2a 对小鼠血液和肝脏组织中总羰基含量的影响 | 第104-105页 |
| 7.3.6 COGP2a 体内抑瘤率与抗氧化作用相关性分析 | 第105-106页 |
| 7.4 本章小结 | 第106页 |
| 参考文献 | 第106-108页 |
| 主要结论与展望 | 第108-110页 |
| 主要结论 | 第108-109页 |
| 展望 | 第109-110页 |
| 论文主要创新点 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 附录：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第112页 |
