| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 微藻 | 第10-12页 |
| 1.1.1 小球藻简介 | 第11页 |
| 1.1.2 微藻的培养 | 第11-12页 |
| 1.2 微藻主要生物活性物质及应用 | 第12-13页 |
| 1.2.1 不饱和脂肪酸 | 第12页 |
| 1.2.2 其他生物活性物质及应用 | 第12-13页 |
| 1.3 真核微藻转基因工程研究进展 | 第13-16页 |
| 1.3.1 真核微藻的核基因组转化系统 | 第13-14页 |
| 1.3.2 真核微藻叶绿体转化系统 | 第14-16页 |
| 1.4 小球藻的基因工程研究进展 | 第16页 |
| 1.5 真核微藻SAD基因研究进展 | 第16页 |
| 1.6 选题意义与主要研究内容 | 第16-18页 |
| 1.6.1 选题意义 | 第16-17页 |
| 1.6.2 主要研究内容 | 第17-18页 |
| 2 蛋白核小球藻基因工程筛选标记的确定及同源片段chlL基因验证 | 第18-26页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-21页 |
| 2.1.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.2 方法 | 第20-21页 |
| 2.2 结果与分析 | 第21-24页 |
| 2.2.1 蛋白核小球藻在液体培养基中对6种抗生素的敏感性 | 第21-23页 |
| 2.2.2 同源片段chlL基因PCR鉴定 | 第23-24页 |
| 2.3 讨论 | 第24-25页 |
| 2.3.1 蛋白核小球藻对6种抗生素的敏感性 | 第24-25页 |
| 2.3.2 蛋白核小球藻同源片段chlL基因的PCR验证 | 第25页 |
| 2.4 本章小结 | 第25-26页 |
| 3 转化载体的构建 | 第26-33页 |
| 3.1 材料与方法 | 第26-29页 |
| 3.1.1 主要仪器设备 | 第26页 |
| 3.1.2 质粒 | 第26-27页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第27页 |
| 3.1.4 方法 | 第27-29页 |
| 3.2 结果与分析 | 第29-32页 |
| 3.2.1 SAD基因序列同源性分析 | 第29-30页 |
| 3.2.2 重组载体构建及外源基因验证 | 第30-32页 |
| 3.3 讨论 | 第32页 |
| 3.3.1 SAD基因同源性分析 | 第32页 |
| 3.3.2 重组质粒构建 | 第32页 |
| 3.4 本章小结 | 第32-33页 |
| 4 叶绿体转化与同质化 | 第33-39页 |
| 4.1 材料与方法 | 第33-36页 |
| 4.1.1 主要仪器与设备 | 第33页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第33页 |
| 4.1.3 方法 | 第33-36页 |
| 4.2 结果与分析 | 第36-38页 |
| 4.2.1 基因枪法对蛋白核小球藻进行叶绿体转化 | 第36页 |
| 4.2.2 转化藻的筛选 | 第36-38页 |
| 4.3 讨论 | 第38页 |
| 4.3.1 基因枪法转化蛋白核小球藻 | 第38页 |
| 4.3.2 转化藻的筛选和同质化 | 第38页 |
| 4.4 本章小结 | 第38-39页 |
| 5 转化藻的鉴定 | 第39-47页 |
| 5.1 材料与方法 | 第39-43页 |
| 5.1.1 主要设备与仪器 | 第39页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第39-43页 |
| 5.2 结果与分析 | 第43-45页 |
| 5.2.1 转化藻外源基因PCR鉴定 | 第43-44页 |
| 5.2.2 aadA基因RT-PCR鉴定 | 第44-45页 |
| 5.2.3 SAD基因荧光定量PCR鉴定 | 第45页 |
| 5.3 讨论 | 第45-46页 |
| 5.4 本章小结 | 第46-47页 |
| 6 蛋白核小球藻脂肪酸组成分析 | 第47-52页 |
| 6.1 材料与方法 | 第47页 |
| 6.1.1 材料 | 第47页 |
| 6.1.2 主要仪器与设备 | 第47页 |
| 6.1.3 主要试剂 | 第47页 |
| 6.2 方法 | 第47-49页 |
| 6.2.1 野生蛋白核小球藻和转化藻的培养 | 第47-48页 |
| 6.2.2 缺氮胁迫 | 第48页 |
| 6.2.3 野生蛋白核小球藻和转化藻油脂的提取 | 第48页 |
| 6.2.4 脂肪酸的甲酯化 | 第48页 |
| 6.2.5 气相色谱条件 | 第48-49页 |
| 6.2.6 数据分析 | 第49页 |
| 6.3 结果分析 | 第49-50页 |
| 6.3.1 脂肪酸组成测定 | 第49-50页 |
| 6.4 讨论 | 第50-51页 |
| 6.5 本章小结 | 第51-52页 |
| 7 结论与展望 | 第52-54页 |
| 7.1 结论 | 第52页 |
| 7.2 创新点 | 第52页 |
| 7.3 展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62-63页 |
| 导师简介 | 第63页 |
