| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 苏云金芽孢杆菌及 BT 毒素概况 | 第11-12页 |
| 1.1.1 苏云金芽孢杆菌简介 | 第11页 |
| 1.1.2 苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白分类 | 第11-12页 |
| 1.2 噬菌体展示技术 | 第12-14页 |
| 1.2.1 噬菌体展示技术简介 | 第12页 |
| 1.2.2 噬菌体展示系统的类型 | 第12-13页 |
| 1.2.3 噬菌体展示系统的特点 | 第13-14页 |
| 1.3 抗体的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3.1 抗体的结构 | 第14-15页 |
| 1.3.2 抗体的发展 | 第15-16页 |
| 1.4 转基因食品安全检测研究进展 | 第16-19页 |
| 1.4.1 转基因食品简介 | 第16页 |
| 1.4.2 转基因食品安全性 | 第16-17页 |
| 1.4.3 转基因食品检测方法及应用 | 第17-19页 |
| 1.5 本文的研究目的和内容 | 第19-20页 |
| 第二章 抗 CRY1AC 蛋白毒素单链抗体的筛选 | 第20-32页 |
| 2.1 材料与方法 | 第20-29页 |
| 2.1.1 试验材料和仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.2 噬菌体抗体库的初步鉴定 | 第21-23页 |
| 2.1.3 生物素化的 Cry1Ac 的制备 | 第23-24页 |
| 2.1.4 抗 Cry1Ac 蛋白毒素单链抗体的筛选 | 第24-27页 |
| 2.1.5 单克隆噬菌体 ELISA 鉴定抗 Cry1Ac 蛋白毒素单链抗体 | 第27-28页 |
| 2.1.6 阳性噬菌体 scFv 的 PCR、验证及 DNA 测序 | 第28-29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-31页 |
| 2.2.1 辅助噬菌体 M13K07 库和 Tomlinson I 库的扩增结果 | 第29页 |
| 2.2.2 生物素化的 Cry1Ac 的制备 | 第29页 |
| 2.2.3 特异性噬菌体抗体的富集 | 第29页 |
| 2.2.4 单克隆噬菌体 ELISA 鉴定抗 Cry1Ac 蛋白毒素单链抗体 | 第29-30页 |
| 2.2.5 阳性克隆外源基因序列鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3 讨论与小结 | 第31-32页 |
| 第三章 抗 CRY1AC 毒素单链抗体诱导表达及免疫活性鉴定 | 第32-39页 |
| 3.1 材料与方法 | 第32-35页 |
| 3.1.1 试验材料和仪器 | 第32-33页 |
| 3.1.2 hsCry1Ac-A12 噬菌体上清制备 | 第33页 |
| 3.1.3 hsCry1Ac-A12 噬菌体感染 E.coli HB2151 | 第33页 |
| 3.1.4 诱导表达可溶性抗体 | 第33-34页 |
| 3.1.5 HisTrap HP 镍亲和柱纯化抗 Cry1Ac 可溶性抗体 | 第34页 |
| 3.1.6 双抗夹心 ELISA 检测方法的优化 | 第34页 |
| 3.1.7 双抗夹心 ELISA 检测方法的灵敏度分析 | 第34-35页 |
| 3.2 结果与分析 | 第35-38页 |
| 3.2.1 HSCRY1AC-A12 噬菌体感染 E.COLI HB2151 | 第35页 |
| 3.2.2 抗 Cry1Ac scFv 的诱导表达和纯化 | 第35-36页 |
| 3.2.3 捕获抗体-检测抗体最佳工作浓度的测定 | 第36-37页 |
| 3.2.4 纯化抗体灵敏度测定 | 第37-38页 |
| 3.3 讨论与小结 | 第38-39页 |
| 第四章 利用基因工程抗体建立新型双抗夹心 ELISA 法检测食品中的 CRY1AC 毒素 | 第39-43页 |
| 4.1 材料与方法 | 第39-40页 |
| 4.1.1 试验材料和仪器 | 第39页 |
| 4.1.2 食品模拟样品的制备 | 第39-40页 |
| 4.1.3 添加回收试验 | 第40页 |
| 4.1.4 抗体特异性的测定 | 第40页 |
| 4.2 结果与分析 | 第40-41页 |
| 4.2.1 大米中 Cry1Ac 毒素的添加回收实验 | 第40-41页 |
| 4.2.2 单链抗体的特异性检测 | 第41页 |
| 4.3 讨论与小结 | 第41-43页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第43-44页 |
| 5.1 结论 | 第43页 |
| 5.2 创新点 | 第43-44页 |
| 附录 | 第44-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
