摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 文献综述 | 第11-17页 |
1.1 乳酸菌概述 | 第11页 |
1.2 乳酸菌在工业及生物技术上的应用 | 第11页 |
1.3 乳酸乳球菌面临的多种胁迫 | 第11-12页 |
1.4 乳酸乳球菌的呼吸作用 | 第12-13页 |
1.4.1 呼吸作用 | 第12页 |
1.4.2 乳酸乳球菌的呼吸作用 | 第12-13页 |
1.5 血红素的测定方法 | 第13页 |
1.6 蛋白质组学 | 第13-17页 |
1.6.1 蛋白质组学的主要研究策略 | 第14页 |
1.6.2 蛋白质组学的技术路线 | 第14-17页 |
2 引言 | 第17-19页 |
3 材料与方法 | 第19-32页 |
3.1 实验仪器设备与主要试剂 | 第19-20页 |
3.1.1 实验所用主要仪器 | 第19页 |
3.1.2 实验所用主要试剂 | 第19-20页 |
3.2 菌株与培养条件 | 第20-22页 |
3.2.1 菌株 | 第20页 |
3.2.2 培养基 | 第20页 |
3.2.3 血红素溶液的配制 | 第20页 |
3.2.4 菌株培养条件 | 第20-22页 |
3.3 双向电泳 | 第22-26页 |
3.3.1 实验溶剂配制方法 | 第22-23页 |
3.3.2 全蛋白样品制备 | 第23-24页 |
3.3.3 蛋白浓度测定 | 第24页 |
3.3.4 等电聚焦 | 第24-25页 |
3.3.5 第二向SDS-PAGE电泳 | 第25-26页 |
3.3.6 染色,显色 | 第26页 |
3.3.7 PDQuest软件分析 | 第26页 |
3.4 质谱鉴定 | 第26-27页 |
3.4.1 样品处理(胶内酶解) | 第26-27页 |
3.4.2 肽质量指纹谱 | 第27页 |
3.4.3 串联MALDI-TOF-TOF质谱检测 | 第27页 |
3.5 反转录实时定量PCR(qRT-PCR) | 第27-28页 |
3.5.1 对照菌乳酸乳球菌NZ9000(pNZ8148)总RNA提取 | 第27页 |
3.5.2 反转录反应 | 第27-28页 |
3.5.3 qRT-PCR验证 | 第28页 |
3.6 琥珀酸脱氢酶酶活的测定 | 第28-29页 |
3.7 胞内ATP含量的测定 | 第29页 |
3.8 过氧化氢酶活性测定 | 第29-30页 |
3.9 血红素含量测定 | 第30页 |
3.10 酸胁迫 | 第30-31页 |
3.11 低温胁迫 | 第31-32页 |
4 结果 | 第32-50页 |
4.1 双向电泳的优化 | 第32-38页 |
4.1.1 不同的提取全蛋白样品方法对双向电泳结果的影响 | 第32-33页 |
4.1.2 不同pH的胶条对双向电泳结果的影响 | 第33-35页 |
4.1.3 不同的SDS-PAGE胶体浓度对双向电泳结果的影响 | 第35-37页 |
4.1.4 不同的聚焦条件对双向电泳结果的影响 | 第37-38页 |
4.2 重组菌乳酸乳球菌NZ9000(pFL010)在不同溶氧条件下的蛋白质组学研究 | 第38-41页 |
4.3 不同培养条件下重组菌乳酸乳球菌NZ9000(pFL010)和对照菌乳酸乳球菌NZ9000(pNZ8148)胞内琥珀酸脱氢酶酶活的变化 | 第41-43页 |
4.4 提高发酵液pH值促进乳酸乳球菌NZ9000(pNZ8148)菌株进行有氧呼吸 | 第43-47页 |
4.4.1 不同培养条件下乳酸乳球菌NZ9000(p NZ8148)菌株发酵参数的差异 | 第43-45页 |
4.4.2 不同培养条件乳酸乳球菌NZ9000(pNZ8148)胞内血红素及ATP含量的变化 | 第45-46页 |
4.4.3 2,4-二硝酸苯酚对乳酸乳球菌NZ9000(pNZ8148)有氧生长的影响 | 第46-47页 |
4.5 不同培养条件下乳酸乳球菌NZ9000(pNZ8148)细胞胞内过氧化氢酶酶活的变化 | 第47-48页 |
4.6 有氧呼吸有助于提高乳酸乳球菌NZ9000(p NZ8148)对低温胁迫和酸胁迫的抗性 | 第48-50页 |
5 讨论 | 第50-52页 |
5.1 乳酸乳球菌胞内琥珀酸脱氢酶酶活的测定 | 第50页 |
5.2 提高发酵液pH促进乳酸乳球菌NZ9000(pNZ8148)有氧呼吸40 | 第50-51页 |
5.3 有氧呼吸有助于提高乳酸乳球菌NZ9000(p NZ8148)对环境胁迫的抗性 | 第51-52页 |
6 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
作者简介 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |