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苯醚甲环唑免疫检测方法的研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
1 前言第9-24页
    1.1 农药概述第9-12页
        1.1.1 农药残留现状第9-10页
        1.1.2 农药残留的危害第10-12页
        1.1.3 农药残留的控制措施第12页
    1.2 苯醚甲环唑概述第12-18页
        1.2.1 三唑类杀菌剂简介第12-13页
        1.2.2 苯醚甲环唑的理化性质第13-14页
        1.2.3 苯醚甲环唑的毒性第14页
        1.2.4 苯醚甲环唑的残留限量第14-16页
        1.2.5 苯醚甲环唑的检测方法第16-18页
    1.3 酶联免疫吸附测定法(ELISA)概述第18-21页
        1.3.1 ELISA的基本原理第18-19页
        1.3.2 ELISA的反应类型第19-20页
        1.3.3 ELISA的应用研究第20-21页
    1.4 农药酶联免疫吸附测定法的建立第21-23页
        1.4.1 目标化合物的选择第21页
        1.4.2 半抗原的设计及合成第21页
        1.4.3 人工抗原的合成第21-22页
        1.4.4 抗体的制备第22页
        1.4.5 最适实验条件的选择第22页
        1.4.6 质量控制指标第22-23页
    1.5 论文研究的目的及意义第23页
    1.6 论文研究内容第23-24页
2 材料与方法第24-37页
    2.1 实验材料第24-27页
        2.1.1 主要药品第24-25页
        2.1.2 主要试剂第25页
        2.1.3 主要仪器设备第25-26页
        2.1.4 待测样品第26页
        2.1.5 常用溶液的配制第26-27页
    2.2 实验方法第27-37页
        2.2.1 苯醚甲环唑半抗原的制备第27-29页
        2.2.2 人工免疫原的制备第29页
        2.2.3 酶标抗原的制备第29页
        2.2.4 包被原的制备第29-30页
        2.2.5 多克隆抗体的制备第30-32页
        2.2.6 直接竞争ELISA方法的建立第32-33页
        2.2.7 样品处理方法第33-34页
        2.2.8 直接竞争ELISA方法性能指标的评价第34页
        2.2.9 直接竞争ELISA方法的高效液相色谱法验证第34-35页
        2.2.10 间接竞争ELISA方法的建立第35-36页
        2.2.11 间接竞争ELISA方法性能指标的评价第36页
        2.2.12 间接竞争ELISA方法的高效液相色谱法验证第36-37页
3 结果与讨论第37-57页
    3.1 苯醚甲环唑半抗原的设计及合成第37-39页
        3.1.1 Hapten1的合成及鉴定第37-38页
        3.1.2 Hapten2的合成及鉴定第38-39页
    3.2 苯醚甲环唑抗体的制备第39-40页
        3.2.1 抗血清效价和特异性的测定第39-40页
        3.2.2 抗体的纯化第40页
    3.3 直接竞争ELISA方法的建立第40-44页
        3.3.1 酶标抗原的确定第40-41页
        3.3.2 抗体包被量和酶标抗原稀释倍数的确定第41页
        3.3.3 封闭液种类及浓度的确定第41-42页
        3.3.4 样品稀释液离子强度的确定第42页
        3.3.5 样品稀释液pH值的确定第42-43页
        3.3.6 直接竞争ELISA标准曲线的绘制第43页
        3.3.7 特异性的测定第43-44页
    3.4 直接竞争ELISA方法性能指标的评价第44-48页
        3.4.1 检测限第44页
        3.4.2 准确度第44-47页
        3.4.3 精密度第47-48页
    3.5 液相色谱法验证直接竞争ELISA方法的准确性第48-49页
        3.5.1 HPLC检测苯醚甲环唑标准曲线的绘制第48页
        3.5.2 HPLC与dc-ELISA检测方法的相关性第48-49页
    3.6 间接竞争ELISA方法的建立第49-52页
        3.6.1 包被原的确定第49页
        3.6.2 包被量和抗体稀释倍数的确定第49-50页
        3.6.3 封闭液种类及浓度的确定第50页
        3.6.4 样品稀释液离子强度的确定第50页
        3.6.5 样品稀释液pH值的确定第50-51页
        3.6.6 间接竞争ELISA标准曲线的绘制第51页
        3.6.7 特异性的测定第51-52页
    3.7 间接竞争ELISA方法性能指标的评价第52-55页
        3.7.1 检测限第52页
        3.7.2 准确度第52-54页
        3.7.3 精密度第54-55页
    3.8 HPLC与ic-ELISA检测方法的相关性第55-57页
4 结论第57-58页
5 展望第58-59页
6 参考文献第59-65页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第65-66页
8 致谢第66页

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