摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
1 前言 | 第9-24页 |
1.1 农药概述 | 第9-12页 |
1.1.1 农药残留现状 | 第9-10页 |
1.1.2 农药残留的危害 | 第10-12页 |
1.1.3 农药残留的控制措施 | 第12页 |
1.2 苯醚甲环唑概述 | 第12-18页 |
1.2.1 三唑类杀菌剂简介 | 第12-13页 |
1.2.2 苯醚甲环唑的理化性质 | 第13-14页 |
1.2.3 苯醚甲环唑的毒性 | 第14页 |
1.2.4 苯醚甲环唑的残留限量 | 第14-16页 |
1.2.5 苯醚甲环唑的检测方法 | 第16-18页 |
1.3 酶联免疫吸附测定法(ELISA)概述 | 第18-21页 |
1.3.1 ELISA的基本原理 | 第18-19页 |
1.3.2 ELISA的反应类型 | 第19-20页 |
1.3.3 ELISA的应用研究 | 第20-21页 |
1.4 农药酶联免疫吸附测定法的建立 | 第21-23页 |
1.4.1 目标化合物的选择 | 第21页 |
1.4.2 半抗原的设计及合成 | 第21页 |
1.4.3 人工抗原的合成 | 第21-22页 |
1.4.4 抗体的制备 | 第22页 |
1.4.5 最适实验条件的选择 | 第22页 |
1.4.6 质量控制指标 | 第22-23页 |
1.5 论文研究的目的及意义 | 第23页 |
1.6 论文研究内容 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-37页 |
2.1 实验材料 | 第24-27页 |
2.1.1 主要药品 | 第24-25页 |
2.1.2 主要试剂 | 第25页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第25-26页 |
2.1.4 待测样品 | 第26页 |
2.1.5 常用溶液的配制 | 第26-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-37页 |
2.2.1 苯醚甲环唑半抗原的制备 | 第27-29页 |
2.2.2 人工免疫原的制备 | 第29页 |
2.2.3 酶标抗原的制备 | 第29页 |
2.2.4 包被原的制备 | 第29-30页 |
2.2.5 多克隆抗体的制备 | 第30-32页 |
2.2.6 直接竞争ELISA方法的建立 | 第32-33页 |
2.2.7 样品处理方法 | 第33-34页 |
2.2.8 直接竞争ELISA方法性能指标的评价 | 第34页 |
2.2.9 直接竞争ELISA方法的高效液相色谱法验证 | 第34-35页 |
2.2.10 间接竞争ELISA方法的建立 | 第35-36页 |
2.2.11 间接竞争ELISA方法性能指标的评价 | 第36页 |
2.2.12 间接竞争ELISA方法的高效液相色谱法验证 | 第36-37页 |
3 结果与讨论 | 第37-57页 |
3.1 苯醚甲环唑半抗原的设计及合成 | 第37-39页 |
3.1.1 Hapten1的合成及鉴定 | 第37-38页 |
3.1.2 Hapten2的合成及鉴定 | 第38-39页 |
3.2 苯醚甲环唑抗体的制备 | 第39-40页 |
3.2.1 抗血清效价和特异性的测定 | 第39-40页 |
3.2.2 抗体的纯化 | 第40页 |
3.3 直接竞争ELISA方法的建立 | 第40-44页 |
3.3.1 酶标抗原的确定 | 第40-41页 |
3.3.2 抗体包被量和酶标抗原稀释倍数的确定 | 第41页 |
3.3.3 封闭液种类及浓度的确定 | 第41-42页 |
3.3.4 样品稀释液离子强度的确定 | 第42页 |
3.3.5 样品稀释液pH值的确定 | 第42-43页 |
3.3.6 直接竞争ELISA标准曲线的绘制 | 第43页 |
3.3.7 特异性的测定 | 第43-44页 |
3.4 直接竞争ELISA方法性能指标的评价 | 第44-48页 |
3.4.1 检测限 | 第44页 |
3.4.2 准确度 | 第44-47页 |
3.4.3 精密度 | 第47-48页 |
3.5 液相色谱法验证直接竞争ELISA方法的准确性 | 第48-49页 |
3.5.1 HPLC检测苯醚甲环唑标准曲线的绘制 | 第48页 |
3.5.2 HPLC与dc-ELISA检测方法的相关性 | 第48-49页 |
3.6 间接竞争ELISA方法的建立 | 第49-52页 |
3.6.1 包被原的确定 | 第49页 |
3.6.2 包被量和抗体稀释倍数的确定 | 第49-50页 |
3.6.3 封闭液种类及浓度的确定 | 第50页 |
3.6.4 样品稀释液离子强度的确定 | 第50页 |
3.6.5 样品稀释液pH值的确定 | 第50-51页 |
3.6.6 间接竞争ELISA标准曲线的绘制 | 第51页 |
3.6.7 特异性的测定 | 第51-52页 |
3.7 间接竞争ELISA方法性能指标的评价 | 第52-55页 |
3.7.1 检测限 | 第52页 |
3.7.2 准确度 | 第52-54页 |
3.7.3 精密度 | 第54-55页 |
3.8 HPLC与ic-ELISA检测方法的相关性 | 第55-57页 |
4 结论 | 第57-58页 |
5 展望 | 第58-59页 |
6 参考文献 | 第59-65页 |
7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第65-66页 |
8 致谢 | 第66页 |