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荧光假单胞菌分离鉴定、生物膜形成及免疫磁珠检测技术的研究

致谢第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-15页
第一章 绪论第15-30页
 1 嗜冷菌的危害第15-16页
   ·嗜冷菌的种类第15页
   ·嗜冷菌对原料乳的影响机制第15-16页
 2 荧光假单胞菌的研究进展第16-19页
   ·荧光假单胞菌生理生化特性第16页
   ·荧光假单胞菌的检测方法第16-19页
     ·平板计数法第17页
     ·直接荧光过滤法DEFT(Direct Epifluorescent Filter Technique)第17页
     ·流式细胞法FCM(Flow Cytometry Method)第17页
     ·PCR法第17-18页
     ·氨肽酶法第18页
     ·ELISA法第18页
     ·免疫磁珠法第18页
     ·其他方法第18-19页
 3 生物膜形成及检测研究进展第19-22页
   ·生物膜的危害第19页
   ·生物膜的形成过程第19-20页
     ·粘附期第20页
     ·生长期第20页
     ·成熟期第20页
     ·扩散期第20页
   ·生物膜的检测方法第20-22页
     ·菌落计数法第20-21页
     ·结晶紫染色第21页
     ·荧光染色第21页
     ·激光共聚焦显微镜第21页
     ·扫描电镜第21-22页
 4 免疫磁珠技术研究进展第22-29页
   ·免疫磁珠的原理及特性第22-24页
     ·免疫磁珠的作用原理第22-23页
     ·免疫磁珠的特性第23-24页
       ·磁珠粒径第23页
       ·磁珠表面基团第23-24页
       ·磁珠特异性第24页
       ·磁珠适用性第24页
   ·免疫磁珠的制备方法及研究进展第24-26页
     ·沉淀法第24-25页
     ·微乳液法第25页
     ·凝胶溶胶法第25页
     ·水热法第25-26页
     ·热分解法第26页
   ·免疫磁珠在动物源食品病原微生物污染检测中的应用进展第26-28页
     ·90年代研究进展第26-27页
     ·2000年来研究进展第27页
     ·近几年研究进展第27-28页
   ·免疫磁珠在动物源食品化学污染物检测中的应用进展第28-29页
     ·动物源食品中添加剂检测第28页
     ·动物源食品中毒素检测第28-29页
     ·动物源食品中农药残留检测第29页
 5、立题目的和意义第29-30页
第二章 荧光假单胞菌的分离及多抗的制备第30-42页
 1 材料第30-31页
   ·实验原料第30页
   ·实验试剂第30页
   ·实验仪器第30-31页
 2 方法第31-36页
   ·原料乳中菌株的分离第31页
   ·生理生化特性鉴定第31-33页
     ·革兰氏染色第31页
     ·41℃不生长第31页
     ·乙醇抑菌实验第31页
     ·蛋白酶实验第31-32页
     ·脂酶实验第32页
     ·过氧化氢实验第32页
     ·水解明胶实验第32页
     ·甲基红(M.R)实验第32页
     ·二乙酰(V-P)实验第32页
     ·糖类发酵实验第32-33页
   ·16S rDNA测序第33页
   ·荧光假单胞菌菌抗原的制备第33页
   ·动物实验第33-34页
   ·CA-AS 纯化血清抗体第34-35页
   ·多克隆抗体浓度测定第35页
   ·效价的测定第35-36页
 3 结果与分析第36-41页
 4 总结和讨论第41-42页
第三章 荧光假单胞菌生物膜的定性观察及影响因素第42-57页
 1 材料第43页
 2 方法第43-45页
   ·结晶紫染色法定性检测荧光假单胞菌生物膜第43页
   ·荧光假单胞菌及其生物膜生长曲线的测定第43-44页
   ·不同环境因素对生物膜形成的影响第44页
   ·优化实验设计第44页
   ·碳源、氮源对生物膜形成的影响第44-45页
     ·碳源对生物膜形成的影响第44-45页
     ·氮源对生物膜形成的影响第45页
 3 结果与分析第45-55页
   ·荧光假单胞菌生物膜定性观察第45-46页
   ·荧光假单胞菌及其生物膜生长曲线的测定第46-47页
   ·不同环境因素对生物膜形成的影响第47-53页
     ·NaCl浓度对生物膜形成的影响第47-48页
     ·pH第48-49页
     ·温度第49-50页
     ·初始浓度第50页
     ·响应面分析第50-53页
   ·营养物质的影响第53-55页
     ·碳源第53-54页
     ·氮源第54-55页
 4 总结和讨论第55-57页
第四章 纳米银对荧光假单胞菌生物膜形成的影响第57-64页
 1 材料第57-58页
 2 方法第58-59页
 3 结果与分析第59-62页
 4 总结和讨论第62-64页
第五章 荧光假单胞菌免疫磁珠检测方法的开发第64-75页
 1 材料第65页
 2 方法第65-67页
   ·水解法合成纳米 Fe_3O_4第65页
   ·纳米 Fe_3O_4的表征第65-66页
     ·傅里叶红外(FTIR)检测第65-66页
     ·XRD表征、磁饱和强度检测第66页
     ·透射电镜(TEM)扫描第66页
   ·免疫磁珠的活化第66页
   ·免疫磁珠的包被第66页
   ·免疫磁珠间接竞争 ELISA 方法的建立第66-67页
     ·最佳工作浓度的确定第66页
     ·标准曲线的建立第66-67页
     ·特异性检测第67页
     ·重复性试验]第67页
       ·板内重复性试验第67页
       ·板间重复性试验第67页
     ·样品检测第67页
 3 结果与分析第67-74页
   ·磁珠表征第67-70页
     ·傅里叶红外(FTIR)第67-68页
     ·XRD表征、磁饱和强度检测第68-69页
     ·透射电镜(TEM)扫描第69-70页
   ·磁珠偶联第70-71页
   ·最佳工作浓度的确定第71页
   ·标准曲线的建立第71-72页
   ·特异性检测第72页
   ·重复性实验第72-73页
     ·板内重复性实验第72-73页
     ·板间重复性实验第73页
   ·样品检测第73-74页
 4 总结和讨论第74-75页
结论与展望第75-76页
参考文献第76-86页
作者简历第86页

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