致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-15页 |
第一章 绪论 | 第15-30页 |
1 嗜冷菌的危害 | 第15-16页 |
·嗜冷菌的种类 | 第15页 |
·嗜冷菌对原料乳的影响机制 | 第15-16页 |
2 荧光假单胞菌的研究进展 | 第16-19页 |
·荧光假单胞菌生理生化特性 | 第16页 |
·荧光假单胞菌的检测方法 | 第16-19页 |
·平板计数法 | 第17页 |
·直接荧光过滤法DEFT(Direct Epifluorescent Filter Technique) | 第17页 |
·流式细胞法FCM(Flow Cytometry Method) | 第17页 |
·PCR法 | 第17-18页 |
·氨肽酶法 | 第18页 |
·ELISA法 | 第18页 |
·免疫磁珠法 | 第18页 |
·其他方法 | 第18-19页 |
3 生物膜形成及检测研究进展 | 第19-22页 |
·生物膜的危害 | 第19页 |
·生物膜的形成过程 | 第19-20页 |
·粘附期 | 第20页 |
·生长期 | 第20页 |
·成熟期 | 第20页 |
·扩散期 | 第20页 |
·生物膜的检测方法 | 第20-22页 |
·菌落计数法 | 第20-21页 |
·结晶紫染色 | 第21页 |
·荧光染色 | 第21页 |
·激光共聚焦显微镜 | 第21页 |
·扫描电镜 | 第21-22页 |
4 免疫磁珠技术研究进展 | 第22-29页 |
·免疫磁珠的原理及特性 | 第22-24页 |
·免疫磁珠的作用原理 | 第22-23页 |
·免疫磁珠的特性 | 第23-24页 |
·磁珠粒径 | 第23页 |
·磁珠表面基团 | 第23-24页 |
·磁珠特异性 | 第24页 |
·磁珠适用性 | 第24页 |
·免疫磁珠的制备方法及研究进展 | 第24-26页 |
·沉淀法 | 第24-25页 |
·微乳液法 | 第25页 |
·凝胶溶胶法 | 第25页 |
·水热法 | 第25-26页 |
·热分解法 | 第26页 |
·免疫磁珠在动物源食品病原微生物污染检测中的应用进展 | 第26-28页 |
·90年代研究进展 | 第26-27页 |
·2000年来研究进展 | 第27页 |
·近几年研究进展 | 第27-28页 |
·免疫磁珠在动物源食品化学污染物检测中的应用进展 | 第28-29页 |
·动物源食品中添加剂检测 | 第28页 |
·动物源食品中毒素检测 | 第28-29页 |
·动物源食品中农药残留检测 | 第29页 |
5、立题目的和意义 | 第29-30页 |
第二章 荧光假单胞菌的分离及多抗的制备 | 第30-42页 |
1 材料 | 第30-31页 |
·实验原料 | 第30页 |
·实验试剂 | 第30页 |
·实验仪器 | 第30-31页 |
2 方法 | 第31-36页 |
·原料乳中菌株的分离 | 第31页 |
·生理生化特性鉴定 | 第31-33页 |
·革兰氏染色 | 第31页 |
·41℃不生长 | 第31页 |
·乙醇抑菌实验 | 第31页 |
·蛋白酶实验 | 第31-32页 |
·脂酶实验 | 第32页 |
·过氧化氢实验 | 第32页 |
·水解明胶实验 | 第32页 |
·甲基红(M.R)实验 | 第32页 |
·二乙酰(V-P)实验 | 第32页 |
·糖类发酵实验 | 第32-33页 |
·16S rDNA测序 | 第33页 |
·荧光假单胞菌菌抗原的制备 | 第33页 |
·动物实验 | 第33-34页 |
·CA-AS 纯化血清抗体 | 第34-35页 |
·多克隆抗体浓度测定 | 第35页 |
·效价的测定 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-41页 |
4 总结和讨论 | 第41-42页 |
第三章 荧光假单胞菌生物膜的定性观察及影响因素 | 第42-57页 |
1 材料 | 第43页 |
2 方法 | 第43-45页 |
·结晶紫染色法定性检测荧光假单胞菌生物膜 | 第43页 |
·荧光假单胞菌及其生物膜生长曲线的测定 | 第43-44页 |
·不同环境因素对生物膜形成的影响 | 第44页 |
·优化实验设计 | 第44页 |
·碳源、氮源对生物膜形成的影响 | 第44-45页 |
·碳源对生物膜形成的影响 | 第44-45页 |
·氮源对生物膜形成的影响 | 第45页 |
3 结果与分析 | 第45-55页 |
·荧光假单胞菌生物膜定性观察 | 第45-46页 |
·荧光假单胞菌及其生物膜生长曲线的测定 | 第46-47页 |
·不同环境因素对生物膜形成的影响 | 第47-53页 |
·NaCl浓度对生物膜形成的影响 | 第47-48页 |
·pH | 第48-49页 |
·温度 | 第49-50页 |
·初始浓度 | 第50页 |
·响应面分析 | 第50-53页 |
·营养物质的影响 | 第53-55页 |
·碳源 | 第53-54页 |
·氮源 | 第54-55页 |
4 总结和讨论 | 第55-57页 |
第四章 纳米银对荧光假单胞菌生物膜形成的影响 | 第57-64页 |
1 材料 | 第57-58页 |
2 方法 | 第58-59页 |
3 结果与分析 | 第59-62页 |
4 总结和讨论 | 第62-64页 |
第五章 荧光假单胞菌免疫磁珠检测方法的开发 | 第64-75页 |
1 材料 | 第65页 |
2 方法 | 第65-67页 |
·水解法合成纳米 Fe_3O_4 | 第65页 |
·纳米 Fe_3O_4的表征 | 第65-66页 |
·傅里叶红外(FTIR)检测 | 第65-66页 |
·XRD表征、磁饱和强度检测 | 第66页 |
·透射电镜(TEM)扫描 | 第66页 |
·免疫磁珠的活化 | 第66页 |
·免疫磁珠的包被 | 第66页 |
·免疫磁珠间接竞争 ELISA 方法的建立 | 第66-67页 |
·最佳工作浓度的确定 | 第66页 |
·标准曲线的建立 | 第66-67页 |
·特异性检测 | 第67页 |
·重复性试验] | 第67页 |
·板内重复性试验 | 第67页 |
·板间重复性试验 | 第67页 |
·样品检测 | 第67页 |
3 结果与分析 | 第67-74页 |
·磁珠表征 | 第67-70页 |
·傅里叶红外(FTIR) | 第67-68页 |
·XRD表征、磁饱和强度检测 | 第68-69页 |
·透射电镜(TEM)扫描 | 第69-70页 |
·磁珠偶联 | 第70-71页 |
·最佳工作浓度的确定 | 第71页 |
·标准曲线的建立 | 第71-72页 |
·特异性检测 | 第72页 |
·重复性实验 | 第72-73页 |
·板内重复性实验 | 第72-73页 |
·板间重复性实验 | 第73页 |
·样品检测 | 第73-74页 |
4 总结和讨论 | 第74-75页 |
结论与展望 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-86页 |
作者简历 | 第86页 |