| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-41页 |
| 第一章 单核细胞增多性李斯特菌流行病学研究进展 | 第12-17页 |
| 一、 生长特性 | 第12-13页 |
| 二、 分布 | 第13-14页 |
| 三、 传播途径 | 第14-15页 |
| 四、 易感人群和动物及临床表现 | 第15页 |
| 五、 人类李斯特菌病发病情况 | 第15-17页 |
| 第二章 食品中单核细胞增多性李斯特菌快速检测研究进展 | 第17-26页 |
| 一、 选择性增菌 | 第17-19页 |
| 二、 免疫学检测方法 | 第19-21页 |
| 三、 核酸探针检测方法 | 第21-22页 |
| 四、 PCR检测方法 | 第22-26页 |
| 1． 基于毒力基因的PCR检测 | 第22-24页 |
| 2． 基于特异序列的PCR检测 | 第24-25页 |
| 3． 磁免疫PCR检测 | 第25-26页 |
| 第三章 单核细胞增多性李斯特菌分子分型的研究与应用 | 第26-41页 |
| 一、 单核细胞增多性李斯特菌分子分型概述 | 第27-28页 |
| 1． 分型的理论依据 | 第27页 |
| 2． 分型系统的评估标准 | 第27-28页 |
| 二、 单核细胞增多性李斯特菌的PFGE分型研究 | 第28-30页 |
| 1． PFGE分型原理 | 第28-29页 |
| 2． PFGE用于Lm分型研究 | 第29页 |
| 3． PFGE分型的应用 | 第29-30页 |
| 三、 单核细胞增多性李斯特菌的RAPD分型研究 | 第30-41页 |
| 1． RAPD分型原理 | 第31页 |
| 2． RAPD用于Lm分型研究 | 第31-33页 |
| 3． RAPD分型的应用 | 第33-41页 |
| 第二部分 研究内容 | 第41-79页 |
| 第一章 李斯特菌选择性增菌培养和分离方法 | 第41-49页 |
| 一、 材料 | 第41-42页 |
| 1、 菌株 | 第41页 |
| 2、 培养基 | 第41-42页 |
| 3、 化学试剂 | 第42页 |
| 4、 样品 | 第42页 |
| 二、 方法 | 第42-44页 |
| 1． PALCAM肉汤的优化实验 | 第42-43页 |
| 2． 环境和食物样品中李斯特菌的分离 | 第43-44页 |
| 三、 结果 | 第44-46页 |
| 1． 氯霉素对Lm和B．cereus的抑制作用 | 第44-45页 |
| 2． 改良PALCAM肉汤对不同李斯特菌和B．cereus增菌效果 | 第45页 |
| 3． FDA法、改良NGFIS法和国标法对不同样品李斯特菌的检出结果 | 第45-46页 |
| 四、 讨论 | 第46-49页 |
| 第二章 单核细胞增多性李斯特菌PCR鉴定法研究 | 第49-61页 |
| 一、 材料 | 第49页 |
| 1． 菌株 | 第49页 |
| 2． 培养基与试剂 | 第49页 |
| 3． 仪器 | 第49页 |
| 二、 方法 | 第49-51页 |
| 1． 细菌的培养与DNA抽提 | 第49-50页 |
| 2． PCR引物的设计与合成 | 第50-51页 |
| 3． PCR反应 | 第51页 |
| 4． 引物浓度和PCR扩增条件的优化 | 第51页 |
| 5． 三重PCR对Lm检出的抗干扰能力 | 第51页 |
| 三、 结果 | 第51-57页 |
| 1． 不同组合引物浓度及PCR扩增条件的优化 | 第51-52页 |
| 2． 单一PCR扩增结果 | 第52页 |
| 3． 双重PCR扩增结果 | 第52-54页 |
| 4． 三重PCR扩增结果 | 第54页 |
| 5． 三重PCR对Lm检出的抗干扰能力 | 第54-55页 |
| 6． PCR法对李斯特菌鉴定和Lm鉴别能力的比较 | 第55-57页 |
| 7． PCR、API和ELISA鉴定方法的比较 | 第57页 |
| 四、 讨论 | 第57-61页 |
| 第三章 单核细胞增多性李斯特菌RAPD分型研究 | 第61-73页 |
| 一、 材料 | 第61-62页 |
| 1． 菌株 | 第61页 |
| 2． 试剂 | 第61页 |
| 3． 仪器设备 | 第61-62页 |
| 二、 方法 | 第62-65页 |
| 1． 细菌的培养与DNA的抽提（抽提试剂见附录2） | 第62页 |
| 2． RAPD反应体系和扩增程序的优化 | 第62-64页 |
| 3． 引物的筛选 | 第64-65页 |
| 4． Lm分离株RAPD分型 | 第65页 |
| 三、 结果 | 第65-70页 |
| 1． 模板DNA浓度 | 第65页 |
| 2． RAPD反应体系和扩增程序的优化 | 第65页 |
| 3． 酶和dNTP优化浓度 | 第65-67页 |
| 4． 引物筛选 | 第67-68页 |
| 5． Lm分离菌株的RAPD分型 | 第68-70页 |
| 四、 讨论 | 第70-73页 |
| 第四章 李斯特菌PCR鉴定和RAPD分型技术在安全牛奶生产中的应用 | 第73-79页 |
| 一、 材料 | 第73页 |
| 二、 方法 | 第73-74页 |
| 1． 样品的采集与处理 | 第73-74页 |
| 2． 李斯特菌的选择性增菌分离 | 第74页 |
| 3． 李斯特菌的PCR鉴定与API鉴定 | 第74页 |
| 4． 李斯特菌RAPD分型 | 第74页 |
| 三、 结果 | 第74-76页 |
| 1． 各种样品的李斯特菌检出 | 第74-75页 |
| 2． Linnocua分离株RAPD分型结果 | 第75-76页 |
| 四、 讨论 | 第76-79页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 附录1． 培养基 | 第81-84页 |
| 附录2． 试剂 | 第84页 |
