| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 文献综述 | 第14-26页 |
| 1 小肠结肠炎耶尔森菌 | 第14-17页 |
| ·生物学特性 | 第14页 |
| ·生物学分型 | 第14-15页 |
| ·流行病学 | 第15-16页 |
| ·致病机制 | 第15页 |
| ·致病基因 | 第15-16页 |
| ·传染源 | 第16页 |
| ·发病症状 | 第16页 |
| ·食品卫生学意义 | 第16-17页 |
| 2 小肠结肠炎耶尔森菌的前增菌方法 | 第17-18页 |
| 3 小肠结肠炎耶尔森菌分子生物学检测方法 | 第18-22页 |
| ·普通PCR方法 | 第18-19页 |
| ·实时荧光PCR(Real-time PCR) | 第19-20页 |
| ·内部扩增质控(Internal Amplification Control,IAC)技术 | 第20-22页 |
| 参考文献 | 第22-26页 |
| 第一章 小肠结肠炎耶尔森菌普通PCR反应的建立 | 第26-42页 |
| 1 材料和方法 | 第26-30页 |
| ·材料与仪器 | 第26-27页 |
| ·菌种 | 第26-27页 |
| ·培养基及主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·试验方法 | 第27-30页 |
| ·标准菌株的培养 | 第27页 |
| ·基因组DNA提取 | 第27-28页 |
| ·引物的选择 | 第28页 |
| ·普通PCR反应 | 第28-29页 |
| ·双重PCR反应 | 第29-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-37页 |
| ·单重普通PCR反应 | 第30-34页 |
| ·特异性及引物浓度试验 | 第30-32页 |
| ·退化温度的选择 | 第32-34页 |
| ·灵敏性反应 | 第34页 |
| ·双重PCR反应 | 第34-36页 |
| ·引物浓度比例的选择 | 第34-35页 |
| ·退火温度的选择 | 第35页 |
| ·双重PCR灵敏性反应 | 第35-36页 |
| ·实时荧光PCR | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 4.本章小结 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-42页 |
| 第二章 小肠结肠炎耶尔森菌前增菌方法的优化 | 第42-52页 |
| 1 材料与方法 | 第42-45页 |
| ·材料与仪器 | 第42-43页 |
| ·菌种及主要试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| ·前增菌培养 | 第43-44页 |
| ·DNA提取 | 第44页 |
| ·普通PCR反应 | 第44-45页 |
| ·实时荧光PCR反应 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-48页 |
| ·传统培养方法 | 第45-46页 |
| ·普通PCR反应结果 | 第46-47页 |
| ·实时荧光PCR反应结果 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-49页 |
| 4.本章小结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
| 第三章 小肠结肠炎耶尔森菌实时荧光PCR方法的建立 | 第52-74页 |
| 1 材料和方法 | 第52-57页 |
| ·材料与仪器 | 第52-53页 |
| ·菌种 | 第52-53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器设备 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-57页 |
| ·纯培养及DNA提取 | 第53页 |
| ·单重实时荧光PCR | 第53-55页 |
| ·内部扩增质控反应 | 第55-56页 |
| ·SYBR GREEN染料法双重实时荧光PCR | 第56页 |
| ·Taqman探针法实时荧光PCR反应 | 第56-57页 |
| ·实际样品检验 | 第57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-70页 |
| ·单重实时荧光PCR | 第57-60页 |
| ·引物浓度 | 第57-59页 |
| ·特异性 | 第59-60页 |
| ·灵敏性实验 | 第60页 |
| ·内部扩增质控反应 | 第60-62页 |
| ·干扰性试验 | 第60-61页 |
| ·大米模板浓度 | 第61-62页 |
| ·大米引物浓度 | 第62页 |
| ·SYBR GREEN实时荧光PCR | 第62-65页 |
| ·双重反应扩增试验 | 第62-63页 |
| ·SYBR GREEN双重特异性 | 第63-65页 |
| ·Taqman探针法实时荧光PCR | 第65-70页 |
| ·Taqman探针法灵敏度 | 第65页 |
| ·Taqman探针法特异性 | 第65-67页 |
| ·人工布菌样品检测 | 第67-68页 |
| ·实际样品检测 | 第68-70页 |
| 3 讨论 | 第70-72页 |
| 4 本章小结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-74页 |
| 全文结论 | 第74-76页 |
| 附图 | 第76-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 攻读学位期间发表文章 | 第84页 |