| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-17页 |
| ·胆固醇氧化酶的来源与分类 | 第8-9页 |
| ·不同微生物产胆固醇氧化酶的分离技术概况 | 第9-13页 |
| ·短杆菌属(Brevibacterium sp.) | 第9-10页 |
| ·链霉菌属(Streptomyces sp.) | 第10-11页 |
| ·诺卡氏菌属(Nocardia sp.) | 第11页 |
| ·红球菌属(Rhodococcus sp.) | 第11页 |
| ·假单胞菌属(Pseudomonas sp.) | 第11-12页 |
| ·基因工程菌 | 第12-13页 |
| ·COD 的应用研究现状 | 第13-15页 |
| ·检测胆固醇含量 | 第13-14页 |
| ·去除食品中的胆固醇 | 第14-15页 |
| ·其他应用 | 第15页 |
| ·立题背景及本文的主要研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第17-23页 |
| ·实验材料 | 第17-18页 |
| ·菌株 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-23页 |
| ·常用试剂的配制 | 第18页 |
| ·酶活力测定方法 | 第18-19页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第19页 |
| ·重组E.coli 的培养与收集 | 第19页 |
| ·确定最适的超声破碎时间、菌悬液浓度 | 第19-20页 |
| ·(NH_4)_2SO_4 盐析与有机溶剂沉淀COD | 第20页 |
| ·透析条件 | 第20页 |
| ·COD 的CM Sepharose FF 层析条件 | 第20页 |
| ·COD 的Sephadex G-75 凝胶层析条件 | 第20页 |
| ·分子量测定 | 第20页 |
| ·酶的动力学参数测定 | 第20页 |
| ·HPLC 测定胆固醇 | 第20-21页 |
| ·样品处理方法[36] | 第21页 |
| ·胆固醇转化率、分离率 | 第21-22页 |
| ·蛋黄的超声处理 | 第22页 |
| ·确定蛋黄的最适超声处理时间、体积 | 第22页 |
| ·影响蛋黄胆固醇转化率的相关因素的分析 | 第22页 |
| ·蛋黄主要营养物质测定 | 第22页 |
| ·胆固醇氧化物薄层层析 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-42页 |
| ·重组E.coli 产胞内COD 的提取 | 第23-29页 |
| ·菌体分离和破碎前的预处理 | 第23页 |
| ·酶活与超声处理时间、菌悬液浓度的关系 | 第23-24页 |
| ·(NH_4)_2SO_4 盐析与有机溶剂沉淀的比较 | 第24-26页 |
| ·酶的透析脱盐 | 第26页 |
| ·CM Sepharose FF 层析分离COD | 第26-27页 |
| ·Sephadex G-75 凝胶层析分离COD | 第27-28页 |
| ·分离纯化流程 | 第28-29页 |
| ·纯化结果 | 第29页 |
| ·重组E.coli 产COD 的酶学性质研究 | 第29-34页 |
| ·COD 分子量与亚基数推断 | 第30-31页 |
| ·COD 的最适pH 及酸碱稳定性 | 第31-32页 |
| ·COD 的最适反应温度及热稳定性 | 第32页 |
| ·金属离子对COD 活性的影响 | 第32-33页 |
| ·COD 的酶促反应动力学 | 第33-34页 |
| ·超声破乳辅助COD 去除蛋黄胆固醇 | 第34-42页 |
| ·胆固醇标准曲线的重建 | 第34-36页 |
| ·超声处理效果比较 | 第36-37页 |
| ·最适的超声处理时间、体积 | 第37-38页 |
| ·COD 处理时间、加酶量与转化率的关系 | 第38-39页 |
| ·处理前后主要营养物质的比较 | 第39-40页 |
| ·胆固醇氧化物的鉴定 | 第40-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第47页 |