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重组E.coli产胆固醇氧化酶的提取、酶学性质及应用研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 引言第8-17页
   ·胆固醇氧化酶的来源与分类第8-9页
   ·不同微生物产胆固醇氧化酶的分离技术概况第9-13页
     ·短杆菌属(Brevibacterium sp.)第9-10页
     ·链霉菌属(Streptomyces sp.)第10-11页
     ·诺卡氏菌属(Nocardia sp.)第11页
     ·红球菌属(Rhodococcus sp.)第11页
     ·假单胞菌属(Pseudomonas sp.)第11-12页
     ·基因工程菌第12-13页
   ·COD 的应用研究现状第13-15页
     ·检测胆固醇含量第13-14页
     ·去除食品中的胆固醇第14-15页
     ·其他应用第15页
   ·立题背景及本文的主要研究内容第15-17页
第二章 实验材料与方法第17-23页
   ·实验材料第17-18页
     ·菌株第17页
     ·主要仪器第17页
     ·主要试剂第17-18页
     ·培养基第18页
   ·方法第18-23页
     ·常用试剂的配制第18页
     ·酶活力测定方法第18-19页
     ·蛋白质浓度的测定第19页
     ·重组E.coli 的培养与收集第19页
     ·确定最适的超声破碎时间、菌悬液浓度第19-20页
     ·(NH_4)_2SO_4 盐析与有机溶剂沉淀COD第20页
     ·透析条件第20页
     ·COD 的CM Sepharose FF 层析条件第20页
     ·COD 的Sephadex G-75 凝胶层析条件第20页
     ·分子量测定第20页
     ·酶的动力学参数测定第20页
     ·HPLC 测定胆固醇第20-21页
     ·样品处理方法[36]第21页
     ·胆固醇转化率、分离率第21-22页
     ·蛋黄的超声处理第22页
     ·确定蛋黄的最适超声处理时间、体积第22页
     ·影响蛋黄胆固醇转化率的相关因素的分析第22页
     ·蛋黄主要营养物质测定第22页
     ·胆固醇氧化物薄层层析第22-23页
第三章 结果与讨论第23-42页
   ·重组E.coli 产胞内COD 的提取第23-29页
     ·菌体分离和破碎前的预处理第23页
     ·酶活与超声处理时间、菌悬液浓度的关系第23-24页
     ·(NH_4)_2SO_4 盐析与有机溶剂沉淀的比较第24-26页
     ·酶的透析脱盐第26页
     ·CM Sepharose FF 层析分离COD第26-27页
     ·Sephadex G-75 凝胶层析分离COD第27-28页
     ·分离纯化流程第28-29页
     ·纯化结果第29页
   ·重组E.coli 产COD 的酶学性质研究第29-34页
     ·COD 分子量与亚基数推断第30-31页
     ·COD 的最适pH 及酸碱稳定性第31-32页
     ·COD 的最适反应温度及热稳定性第32页
     ·金属离子对COD 活性的影响第32-33页
     ·COD 的酶促反应动力学第33-34页
   ·超声破乳辅助COD 去除蛋黄胆固醇第34-42页
     ·胆固醇标准曲线的重建第34-36页
     ·超声处理效果比较第36-37页
     ·最适的超声处理时间、体积第37-38页
     ·COD 处理时间、加酶量与转化率的关系第38-39页
     ·处理前后主要营养物质的比较第39-40页
     ·胆固醇氧化物的鉴定第40-42页
结论第42-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-47页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第47页

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